病原生物學(xué)與免疫學(xué)-第二十章課件

第二十章蟲媒病毒

和出血熱病毒第一節(jié)蟲媒病毒第一節(jié)蟲媒病毒概述蟲媒病毒（arbovirus）是指通過吸血的節(jié)肢動物（蚊、蜱等）叮咬人、家畜及野生動物而傳播的病毒，具有自然疫源性。對人類有致病性的蟲媒病毒有100多種，我國流行的主要有乙型腦炎病毒、登革熱病毒、森林腦炎病毒等。第一節(jié)蟲媒病毒概述蟲媒病毒的共同特點是：①蟲媒病毒呈小球狀，直徑40～70nm，核酸為單股正鏈RNA，外面是二十面體對稱衣殼，最外層為脂質(zhì)包膜，其上鑲嵌有血凝素刺突。②蟲媒病毒致病力強，引起的疾病潛伏期短、發(fā)病急、病情重。③節(jié)肢動物是病毒的傳播媒介，又是儲存宿主。④所致疾病有明顯的季節(jié)性和地域性。第一節(jié)蟲媒病毒一、流行性乙型腦炎病毒.流行性乙型腦炎病毒（encephalitisBvirus）簡稱乙腦病毒，是流行性乙型腦炎（乙腦）的病原體，于1935年由日本學(xué)者首先從腦炎死亡者的腦組織中分離獲得，故亦稱日本腦炎病毒。乙腦病毒傳播范圍廣，引起疾病死亡率高，幸存者可留下神經(jīng)性后遺癥。隨著兒童普遍進行疫苗接種，我國乙型腦炎發(fā)病率顯著下降。第一節(jié)蟲媒病毒一、流行性乙型腦炎病毒（一）生物學(xué)性狀1．形態(tài)結(jié)構(gòu)乙腦病毒呈球形，直徑30～40nm。核衣殼外面有一層薄的外膜，表面有突起，為病毒的血凝素刺突，能凝集鵝、鴿及雛雞的紅細胞。第一節(jié)蟲媒病毒一、流行性乙型腦炎病毒（一）生物學(xué)性狀2．培養(yǎng)特性乙腦病毒在地鼠腎、幼豬腎等原代培養(yǎng)細胞及白紋伊蚊傳代細胞中均能增殖，并引起明顯的細胞病變。乙腦病毒最易感的動物為乳鼠，經(jīng)腦內(nèi)接種病毒后，3～5天即可發(fā)病，表現(xiàn)為神經(jīng)系統(tǒng)興奮性增高，肢體麻痹而死亡。第一節(jié)蟲媒病毒一、流行性乙型腦炎病毒（一）生物學(xué)性狀3．抗原性乙腦病毒抗原性穩(wěn)定，只有一個血清型，很少變異，不同地區(qū)、不同時期分離的病毒株之間無明顯差別。因此，應(yīng)用疫苗預(yù)防效果良好。4．抵抗力乙腦病毒抵抗力較弱，加熱56℃經(jīng)30分鐘或100℃經(jīng)2分鐘均可使之滅活；對酸、乙醚、氯仿等脂溶劑及化學(xué)消毒劑均敏感。第一節(jié)蟲媒病毒一、流行性乙型腦炎病毒（二）致病性與免疫性1．傳染源和傳播途徑乙腦病毒的主要傳播媒介是三帶喙庫蚊。我國乙腦流行高峰期在6—9月，南方偏早，北方偏遲，主要與帶病毒蚊蟲出現(xiàn)的早晚和密度有關(guān)。蚊體可攜帶乙腦病毒過冬并可經(jīng)卵傳代，故蚊不僅是傳播媒介，還是病毒的儲存宿主。第一節(jié)蟲媒病毒一、流行性乙型腦炎病毒（二）致病性與免疫性1．傳染源和傳播途徑家畜和家禽是乙腦病毒的中間宿主和傳染源，特別是幼豬。動物感染乙腦病毒后，雖不出現(xiàn)明顯癥狀，但有短暫的病毒血癥期。在病毒血癥期的動物，可成為更多蚊蟲感染病毒的傳染源。第一節(jié)蟲媒病毒一、流行性乙型腦炎病毒（二）致病性與免疫性1．傳染源和傳播途徑在一定外界氣溫條件下，病毒在被感染的蚊的唾液腺和腸內(nèi)增殖1～2周后，若蚊叮咬豬、牛、羊、馬等家畜或家禽，可導(dǎo)致動物感染。感染的動物再次被叮咬后又形成新的“蚊-動物-蚊”，以此不斷循環(huán)。若蚊叮咬易感人群，可引起人體感染。乙腦患者和隱性感染者也可成為傳染源。第一節(jié)蟲媒病毒一、流行性乙型腦炎病毒（二）致病性與免疫性2．所致疾病人群對乙腦病毒普遍易感，但絕大多數(shù)表現(xiàn)為隱性或輕型感染，疫區(qū)隱性感染在80%左右，只有少數(shù)引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀，發(fā)生腦炎。第一節(jié)蟲媒病毒一、流行性乙型腦炎病毒（二）致病性與免疫性2．所致疾病乙腦病毒侵入人體后，先在局部血管內(nèi)皮細胞及淋巴結(jié)增殖，隨后少量病毒進入血液，形成第一次病毒血癥。病毒隨血液播散至肝、脾，在單核吞噬細胞內(nèi)繼續(xù)增殖，隨后再次進入血液，引起第二次病毒血癥，臨床上表現(xiàn)為發(fā)熱、寒戰(zhàn)、頭痛及全身不適等癥狀。第一節(jié)蟲媒病毒一、流行性乙型腦炎病毒（二）致病性與免疫性2．所致疾病絕大多數(shù)患者病情不再繼續(xù)發(fā)展，成為隱性感染。少數(shù)患者機體免疫力低下時，病毒可穿過血—腦脊液屏障在腦組織增殖，造成腦實質(zhì)及腦膜病變，引起高熱、劇烈頭痛、嘔吐、痙攣、驚厥、昏迷等癥狀。治療不及時可遺留各種后遺癥，如癱瘓、癡呆、失語、耳聾等。第一節(jié)蟲媒病毒一、流行性乙型腦炎病毒（二）致病性與免疫性3．免疫性病后或隱性感染后均可獲得牢固的免疫力。中和抗體在保護性免疫中起主要作用，完整的血—腦屏障及細胞免疫也有重要作用。第一節(jié)蟲媒病毒一、流行性乙型腦炎病毒（三）微生物學(xué)檢查1．病毒學(xué)檢查乙腦早期患者的血液和腦脊液中可分離出病毒，病毒分離后可用已知抗體鑒定，鵝紅細胞血凝吸附和致敏感細胞病變也可作為病毒鑒定的指標。但病毒分離陽性率低，故較少用于臨床診斷。第一節(jié)蟲媒病毒一、流行性乙型腦炎病毒（三）微生物學(xué)檢查2．血清學(xué)檢查臨床診斷一般檢測患者血清中特異性乙腦病毒抗體，取患者急性期和恢復(fù)期雙份血清，用血凝抑制試驗、補體結(jié)合試驗、中和試驗、IgM抗體捕獲的酶聯(lián)免疫吸附試驗等方法檢測，若特異性抗體效價有4倍或4倍以上增高時可確定診斷。第一節(jié)蟲媒病毒一、流行性乙型腦炎病毒（四）防治原則預(yù)防乙腦的關(guān)鍵是防蚊滅蚊、疫苗接種和動物宿主的管理。對易感人群，特別是6個月～10歲兒童進行疫苗接種可顯著降低乙腦發(fā)生率。豬是乙腦病毒的主要傳染源和中間宿主，因此給幼豬接種疫苗，可控制傳染源，降低乙腦發(fā)病率。乙腦目前無特異性治療方法，我國采用中西醫(yī)結(jié)合治療法，使用白虎湯、清瘟敗毒飲等中醫(yī)驗方，使乙腦的病死率明顯下降。第一節(jié)蟲媒病毒二、登革病毒登革病毒（denguevirus）是登革熱的病原體。登革熱是由伊蚊傳播的急性傳染病，于熱帶、亞熱帶地區(qū)，特別是東南亞、西太平洋、中南美洲地區(qū)流行。我國廣東、海南及廣西等地區(qū)均有發(fā)生。由于患者患病后有發(fā)熱、肌肉關(guān)節(jié)劇痛等癥狀，故俗稱斷骨熱。第一節(jié)蟲媒病毒二、登革病毒登革病毒為小球形單股正鏈RNA病毒，有包膜。按抗原結(jié)構(gòu)的不同，可分為四個血清型，各型病毒間有交叉抗原。登革病毒能在多種組織細胞中增殖，并產(chǎn)生明顯的細胞病變。初生小鼠對登革病毒敏感，但用3周鼠或成鼠接種病毒很少出現(xiàn)癥狀。將病毒接種于猴、猩猩、長臂猿等實驗動物，可致隱性感染而不產(chǎn)生癥狀。（一）生物學(xué)性狀第一節(jié)蟲媒病毒二、登革病毒人和猴是登革病毒的自然宿主，伊蚊是傳播媒介。病毒通過伊蚊叮咬進入人體，在血管內(nèi)皮細胞和單核巨噬細胞系統(tǒng)中增殖，然后經(jīng)血液播散，引起發(fā)熱、肌肉和關(guān)節(jié)酸痛、淋巴結(jié)腫脹、皮膚及內(nèi)臟器官出血，甚至休克等。一般初次感染病情較輕，1周內(nèi)恢復(fù)；再次感染病情較重，往往出現(xiàn)登革熱綜合征，病死率達5%～10%，這可能是患者血清中已有特異性抗體的關(guān)系。（二）致病性第一節(jié)蟲媒病毒二、登革病毒可取患者發(fā)病1～3天血接種白紋伊蚊C6/36細胞株以分離病毒，亦可接種巨蚊成蚊的胸內(nèi)或巨蚊幼蚊的腦內(nèi)。血清學(xué)試驗可查患者血凝抑制抗體、補體結(jié)合抗體，如恢復(fù)期血清較早期特異性抗體效價高4倍或4倍以上，則有診斷意義。特異性抗體IgM型抗體檢出有助于早期診斷。登革病毒感染的預(yù)防措施主要是滅蚊及改善環(huán)境衛(wèi)生、減少蚊蟲孳生和對人叮咬。目前，疫苗尚未研制成功。（三）微生物學(xué)檢查第一節(jié)蟲媒病毒三、森林腦炎病毒.森林腦炎病毒（forestencephalitisvirus）又稱俄羅斯春夏腦炎病毒，因該病毒引起的疾病首先在俄羅斯發(fā)現(xiàn)，以春夏季發(fā)病為主而得名，是森林腦炎的病原體。該病毒在世界范圍內(nèi)廣泛分布，我國東北和西北林區(qū)有本病流行，為一種蜱傳的自然疫源性疾病。第一節(jié)蟲媒病毒三、森林腦炎病毒.森林腦炎病毒為球形，直徑30～40nm，衣殼為二十面體立體對稱，外有包膜，含血凝素糖蛋白，核酸為單正鏈RNA。動物感染范圍廣，小鼠敏感性高，多種接種途徑均能使之感染。第一節(jié)蟲媒病毒三、森林腦炎病毒.森林腦炎是一種中樞神經(jīng)系統(tǒng)的急性傳染病，蜱是傳播媒介。病毒在蜱體內(nèi)增殖，經(jīng)卵傳代，并可在蜱體內(nèi)過冬，因此，蜱既是傳播媒介，又是儲存宿主。在自然疫源地，病毒通過蜱叮咬獸類和野鳥在野生動物間傳播；人類進入自然疫源地，被帶病毒的蜱類叮咬而受感染。除通過蜱叮咬傳播外，病毒還可通過消化道傳播，感染病毒的山羊可通過乳汁排出病毒，人飲用生羊奶可致感染。第一節(jié)蟲媒病毒三、森林腦炎病毒.人類大多數(shù)為隱性感染，少數(shù)感染者經(jīng)7～14天潛伏期后突然發(fā)病，出現(xiàn)高熱、頭痛、嘔吐、頸項強直、肢體遲緩性癱瘓等癥狀。重癥者可出現(xiàn)發(fā)音及吞咽困難、呼吸循環(huán)衰竭等延髓麻痹癥狀，死亡率可高達30%。森林腦炎的預(yù)防應(yīng)以滅蜱和防蜱叮咬為重點，尤其是林區(qū)工作者應(yīng)特別注意做好個人防護。特異性預(yù)防方法是對有關(guān)人員接種地鼠腎細胞培養(yǎng)的滅活疫苗。第二節(jié)出血熱病毒第二節(jié)出血熱病毒一、漢坦病毒漢坦病毒（Hantaanvirus）又叫腎綜合征出血熱病毒（hemorrhagicfeverwithrenalsyndromevirus，HFRSV），是腎綜合征出血熱的病原體，屬于布尼亞病毒科的漢坦病毒屬。此病毒于1978年從韓國漢坦河附近流行性出血熱疫區(qū)捕獲的黑線姬鼠的肺組織中分離出來，以后又從患者血清中分離得到。第二節(jié)出血熱病毒一、漢坦病毒（一）生物學(xué)性狀1．形態(tài)與結(jié)構(gòu)漢坦病毒呈球形、卵圓形或多形態(tài)性，平均直徑120nm，核酸類型為單股負鏈RNA，有長、中、短三個片段，分別編碼病毒的RNA多聚酶（L）、糖蛋白（G1、G2）和核衣殼蛋白（NP）（見圖20-3）。核衣殼外有雙層脂質(zhì)包膜，包膜上有由G1和G2構(gòu)成的刺突，具有血凝素活性，可凝集鵝紅細胞，并具有免疫原性，能刺激機體產(chǎn)生中和抗體。第二節(jié)出血熱病毒一、漢坦病毒（一）生物學(xué)性狀2．培養(yǎng)特性漢坦病毒能在多種傳代、原代及二倍體細胞內(nèi)增殖，實驗室常用非洲綠猴腎細胞分離培養(yǎng)該病毒。病毒在細胞內(nèi)增殖后，細胞病變不明顯，故通常需采用免疫學(xué)方法檢測證實。易感動物有黑線姬鼠、長爪沙鼠、小白鼠及大白鼠等，感染后可在鼠腎及鼠肺等組織中檢出大量病毒。第二節(jié)出血熱病毒一、漢坦病毒（一）生物學(xué)性狀3．抵抗力漢坦病毒對酸、熱的抵抗力弱。60℃經(jīng)1小時可被滅活，4～20℃時相對穩(wěn)定，傳染性可維持較長時間；在pH<3的環(huán)境中易被滅活；對脂溶劑敏感，乙醚、苯酚、丙酮、氯仿等均能將其滅活。第二節(jié)出血熱病毒一、漢坦病毒（二）致病性與免疫性HFRS具有明顯的地區(qū)性和季節(jié)性，與鼠類分布和活動有關(guān)。我國漢坦病毒的宿主動物有幾十種，主要有黑線姬鼠、褐家鼠、長尾倉鼠、野兔、貓、犬等。攜帶病毒的動物通過唾液、尿、糞排出病毒，污染食物、水、空氣等，人或動物經(jīng)呼吸道、消化道或皮膚傷口接觸等方式傳播。第二節(jié)出血熱病毒一、漢坦病毒（二）致病性與免疫性病毒進入人體后，潛伏期約1～2周，起病急，典型的臨床表現(xiàn)為高熱、出血和腎損害，常伴有三痛（頭痛、腰痛、眼眶痛）及三紅（面、頸、上胸部潮紅）。患者可出現(xiàn)眼結(jié)膜、咽部及軟腭充血，軟腭、腋下、前胸等處也有出血點。典型的臨床過程包括發(fā)熱期、低血壓休克期、少尿期、多尿期和恢復(fù)期。第二節(jié)出血熱病毒一、漢坦病毒（二）致病性與免疫性發(fā)病機制：漢坦病毒對毛細血管內(nèi)皮細胞及免疫細胞有較強的吞嗜性和侵襲力，除病毒可直接引起全身小血管和毛細血管損傷、血管通透性增高、血管舒縮功能和微循環(huán)障礙外，還與病毒感染引起的免疫病理有關(guān)。病毒抗原與其抗體形成免疫復(fù)合物，沉積在小血管壁和腎小球基底膜等組織，激活補體，導(dǎo)致血管、腎臟的免疫病理損傷，引起出血。第二節(jié)出血熱病毒一、漢坦病毒（二）致病性與免疫性漢坦病毒感染后，發(fā)病1～2天即可出現(xiàn)特異性IgM，第7～10天達高峰。IgG抗體在第3～4天出現(xiàn)，第10～14天達高峰，可持續(xù)多年。病后免疫力持久。第二節(jié)出血熱病毒一、漢坦病毒（三）微生物學(xué)檢查1．病毒分離與鑒定在具有嚴格隔離條件的實驗室，患者急性期血清、病死者的器官及被感染動物的肺、腎組織，均可用于病毒分離和抗原檢測。將待檢標本接種細胞培養(yǎng)，用免疫熒光抗體染色檢測細胞質(zhì)內(nèi)的病毒抗原。標本接種黑線姬鼠、大鼠或初生乳鼠后，可在肺組織中查到特異性病毒抗原。第二節(jié)出血熱病毒一、漢坦病毒（三）微生物學(xué)檢查2．血清學(xué)診斷用感染漢坦病毒的鼠肺抗原片或細胞培養(yǎng)抗原片，檢測患者血清中病毒特異性IgM或IgG抗體，單份血清IgM陽性或雙份IgG抗體有4倍或4倍以上增高者，均有診斷意義。第二節(jié)出血熱病毒一、漢坦病毒（四）防治原則預(yù)防漢坦病毒感染主要采取滅鼠、防鼠、滅蟲、消毒和個人防護等措施。對患者采取早發(fā)現(xiàn)、早治療和就近治療的處理原則。對患者的排泄物和污染物嚴格消毒。我國應(yīng)用金黃地鼠腎細胞培養(yǎng)漢坦病毒制備精制純化滅活疫苗，人體接種后無不良反應(yīng)并能產(chǎn)生較高的中和抗體。第二節(jié)出血熱病毒二、新疆出血熱病毒.新疆出血熱病毒又稱克里米亞—剛果出血熱病毒，是從我國新疆塔里木盆地出血熱患者的血液、尸體臟器及疫區(qū)捕獲的硬蜱中分離獲得的。該病毒呈球形或橢圓形，直徑90～120nm，核酸為單股正鏈RNA，核衣殼為二十面體立體對稱，外有包膜，表面有血凝素，能用雞胚分離傳代，抵抗力與漢坦病毒相似。1～4天齡乳鼠對本病毒易感。第二節(jié)出血熱病毒二、新疆出血熱病毒.新疆出血熱是一種自然疫源性疾病，有嚴格的地區(qū)性和明顯的季節(jié)性。野生嚙齒動物（如子午沙鼠、塔里木兔）和家畜（如羊、駱駝、牛、馬等）是主要的儲存宿主。硬蜱是該病毒的傳播媒介，亦是儲存宿主，病毒可經(jīng)蜱卵傳代。每年4—5月，蜱大量繁殖，也是發(fā)病的高峰期。人被帶病毒的蜱咬傷后，經(jīng)5～7天潛伏期發(fā)病，臨床表現(xiàn)以發(fā)熱、全身疼痛、中毒癥狀和皮膚黏膜有出血點為主要特征，嚴重者有鼻出血、嘔血、血尿及蛋白尿。病后機體可產(chǎn)生多種抗體，可獲得持久免疫力。第二節(jié)出血熱病毒二、新疆出血熱病毒.防治措施主要包括：①防蜱叮咬和滅蜱。②對患者嚴格隔離治療，患者血液、分泌物、排出物等要消毒處理。③醫(yī)務(wù)人員要加強防護，防止感染。我國已成功研究出精制滅活乳鼠腦新疆出血熱疫苗，該疫苗安全有效。第二節(jié)出血熱病毒三、埃博拉病毒埃博拉病毒（Ebolavirus）引起的Ebola出血熱是一種烈性傳染病，主要特征是高熱、疼痛、全身廣泛性出血、多器官功能性障礙、休克，死亡率高達50%～90%。因1976年首次在扎伊爾北部的Ebola河附近暴發(fā)流行，故命名為Ebola病毒。Ebola病毒屬絲狀病毒科，直徑80nm，核衣殼螺旋對稱，外有類脂包膜，包膜上有糖蛋白刺突。病毒基因組為單負鏈RNA，長約12.7kb，編碼7種蛋白。Ebola病毒可感染猴、乳鼠、田鼠、豚鼠，可引起動物死亡。Ebola病毒抵抗力不強，但室溫條件下可穩(wěn)定保持傳染性。第二節(jié)出血熱病毒三、埃博拉病毒.Ebola病毒在猴群中傳播，通過猴傳給人，并在人群中流行。傳播途徑主要有密切接觸傳播、注射傳播和空氣傳播。病毒從皮膚黏膜侵入宿主，在細胞質(zhì)中復(fù)制，產(chǎn)生大量病毒，在肝、脾、肺、淋巴結(jié)中引起廣泛組織壞死。第二節(jié)出血熱病毒三、埃博拉病毒.Ebola病毒可破壞內(nèi)皮細胞導(dǎo)致血管損傷，造成廣泛出血及低血量性休克。Ebola病毒感染潛伏期為5～10天，臨床特征是突發(fā)起病、高熱、頭疼、肌痛、乏力，進而出現(xiàn)嘔血、黑便、瘀斑、黏膜出血等，患者常死于休克及多器官功能障礙。第二節(jié)出血熱病毒三、埃博拉病毒.微生物檢查要做好安全防御措施，標本采集和處理必須在安全防護的實驗室進行。可直接免疫熒光染色，用ELISA法檢測病毒抗原、抗體；也可用RT-PCR技術(shù)擴增分泌物中的病毒基因組。第二節(jié)出血熱病毒三、埃