實驗三血糖測定

實驗三血糖測定第一頁，共十一頁，編輯于2023年，星期二血液中所含的葡萄糖，稱為血糖。它是糖在體內(nèi)的運輸形式。目前國內(nèi)醫(yī)院多采用葡萄糖氧化酶法和鄰甲苯胺法測定血糖。前者特異性強、價廉、方法簡單,其正常值：空腹全血為3.6～5.3毫摩爾/升（65～95毫克/分升），血漿為3.9～6.1毫摩爾/升。后者由于血中絕大部分非糖物質(zhì)及抗凝劑中的氧化物同時被沉淀下來，因而不易出現(xiàn)假性過高或過低,結(jié)果較可靠,其正常值：空腹全血為3.3～5.6毫摩爾/升（60～100毫克/分升），血漿為3.9～6.4毫摩爾/升（70～115毫克/分升）。

第二頁，共十一頁，編輯于2023年，星期二本實驗采用鄰甲苯胺法測定血糖。其原理是葡萄糖在酸性介質(zhì)中加熱脫水反應(yīng)生成5－羥甲基－2－呋喃甲醛，分子中的醛基與鄰甲苯胺縮合成青色（藍(lán)綠色）的薛夫氏堿，通過比色可以定量?；驹淼谌摚彩豁?，編輯于2023年，星期二CH2OH（CHOH）4CHOHOH2C──CHOO+3H2OH+△HOH2C──CHOONH2CH3+HOH2C──CH=ONCH3葡萄糖羥甲基糠醛鄰甲苯胺Schiff堿第四頁，共十一頁，編輯于2023年，星期二操作方法1、標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作2、血糖濃度測定第五頁，共十一頁，編輯于2023年，星期二取干燥試管7支，編號后，按下表順序加入試劑管號12345測定空白標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖液(ml)0.250.51.01.52.0／／血清（ml）／／／／／0.05／蒸餾水(ml)1.751.51.00.5／1.952.0鄰甲苯胺試劑(ml)5.05.05.05.05.05.05.0A630試劑加畢，混勻，于沸水浴中煮沸10min取下，流水冷卻，在630nm波長下，以空白管調(diào)零，測定各管的A值，并作好記錄。第六頁，共十一頁，編輯于2023年，星期二標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖應(yīng)用液濃度為：5.56mmol/L即1mg/ml第七頁，共十一頁，編輯于2023年，星期二結(jié)果處理1、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制（以1~5管繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線）×××××0.020.040.060.080.10（x，y）mg0.10.40.30.20.5第八頁，共十一頁，編輯于2023年，星期二2、計算結(jié)果（1）從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取測定管的血糖濃度，并求出1L血清中葡萄糖的含量。（2）選取一管光密度與測定管接近的標(biāo)準(zhǔn)管計算1L血清中葡萄糖的含量。結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)曲線上查找的結(jié)果進行比較。第九頁，共十一頁，編輯于2023年，星期二鄰苯甲胺法測定血糖具有操作簡單,特異性較高的優(yōu)點,試劑成本也較低,。但該法一般在濃酸高溫條件下發(fā)生反應(yīng),因此在做血糖測定時須多加注意。注意事項第十頁，共十一頁，編輯于2023