我國迪謝內(nèi)肌營養(yǎng)不良分子遺傳學(xué)研究概況

概況迪謝內(nèi)肌營養(yǎng)不良（DMD）X1/35003～5KunkelcDNADMD1987DMD一、基因結(jié)構(gòu)的研究基因全順序的人工酵母染色體（YAC）克隆：柴建華等［1］DMDcDNAYAC5YACHindⅢDNAYAC5′3′2500kb。5YACDNAMluⅠ、ClaSfiⅠ酶切譜［2］1～481380kb7MluⅠ切點，3Cla5′3′端，Mlu400kb、240kb、50kb、280kb、120kb、80kb，Cla250kb、300kb,SfiⅠ的酶切譜與國外報道的相似。余龍等［3］3′端3′725kbSfiDMDcDNA9～14163′Hind3′SfiⅠ/IJ1719［4］Alu-PCRYACDXS166YACDXS16613.5MbYAC精細(xì)限制酶譜及外顯子的定位［5］DMDcDNA8XDNAEcoRⅠ、HindKpn分酶切，λ5113kb3Kpn4RⅠ切點，5HindKpn513.1kbHindⅢ片段的中央。5051［6，7］HindpUC1185051AT70%36n228DNA［8］50、51ATDNA點，分析了另一缺失熱點（44）254bpAT63.6%5051二、基因診斷DMDRFLPsPCRDNAPCR、RT-PCR方法亦得到了開展。DNADMDC7、87-15、87-30、87-8、87-1、X.J1.1、X.J2.3、J.Bir20%DMD［9］，cDNA1-2a、cDNA2b-320%［10］，cDNA5b-7、8、9、10cDNA8cDNA55%～65%。DNAPCRPCRDMDPCRPCRDMD/BMD980%的缺失患者；Beggs1898%的缺失患者。18PCR報道不多，楊軍等［12］1817DMD9文英等［13］1837DMD/BMD，199PCRDMD/BMD9134DMD/BMD49.3%。據(jù)我們對2749PCR47%5(12、17、45、48、5146996%。DMDPCR-SSCP171GT另外，RT-PCR［16］DNA［11］復(fù)，國內(nèi)亦見有文獻(xiàn)報道。RFLP［9］C7、87-1587-30、87-8、87-1、X.J1.1、X.J2.3、J.Bir95%RFLP是雜合的。陳凡等［17］754、pERT87-8、P208DMD2511［18］9DMDpERT87-7、X.J2.3、X.J1.190%的女性出現(xiàn)多態(tài)位點。許順斌等［19］PCR5′3′CA5′CA60.033～0.267，多態(tài)信息量（PIC)0.75。3′CA0.75、0.25，PIC0.375DMD1DMDDNA(2)雖然PCRRFLPRFLP資料；(3)有可能因染色體重組而造成誤診，由于抗肌萎縮蛋白基因的基因內(nèi)重組率高達(dá)10%，因而其誤診率可能是不容忽視的。DNA大，很難普及推廣。1996PCRDMD4DMD11，6［20］。直接PCRPCR對數(shù)擴增期是相等的或具有某一線性關(guān)系。RFLPPCRRFLP1DMD，1流產(chǎn)或分娩驗證。高百紅等［21］PCRpERT87-15DNAXmn52DNA，PCRDMD10DMDPCR73DMD，31者，以上結(jié)果經(jīng)出生后復(fù)檢證實。吳元清等［23］14PCR4DMD三、基因產(chǎn)物——抗肌萎縮蛋白（dystrophin）的研究抗肌萎縮蛋白的疏水結(jié)構(gòu)［24］DMD95～120,1990～2010,2438～24933150～33005154%,遠(yuǎn)較整個蛋白中疏水氨基酸的比例（26%）為高。DMD/BMD［25］:為驗證缺失熱區(qū)疏水結(jié)構(gòu)的重要性，65DMD136BMD75%的整碼缺DMD98%BMD段是抗肌萎縮蛋白的一個重要功能區(qū)，它的存在與否直接影響疾病的預(yù)后。MonacoDMD，BMD。這一假設(shè)已廣為接8%的例外。我們的發(fā)現(xiàn)是對以上假設(shè)很好的補充。DMD點之一，對研究該蛋白的結(jié)構(gòu)和功能，以及制備相應(yīng)的抗體用于蛋白診斷均具有重要的意義。顏真等［26］cDNA5824～7007bppSM43TAP106，在國內(nèi)首次獲得49000DMDcDNA5-7白。進(jìn)一步將由以上方法制備的蛋白經(jīng)純化處理后免疫兔，得到了高效價的抗Anti5-7［27］DMD/BMD四、基因治療DMDcDNA14kb，目前已cDNADMD/BMD因治療造成了很大的困難。肌母細(xì)胞移植是近年來發(fā)展起來的技術(shù)，并曾在美國應(yīng)用于臨床，獲得了一定的效果。但對此治療效果爭議頗大，部分研究發(fā)現(xiàn)肌母細(xì)胞移植后，經(jīng)過一定的時間，移植入的肌母細(xì)胞幾乎無一成活。DMD進(jìn)行新載體的研究，并擬開展肌母細(xì)胞移植工作。五、存在問題和發(fā)展方向抗肌萎縮蛋白基因巨大，缺失率高，對該基因結(jié)構(gòu)的研究有助于我們了解染色體重排的規(guī)律及對缺失機制的認(rèn)識。我國在對抗肌萎縮蛋白的基因結(jié)構(gòu)方面的研究取得了可喜的成績，但對內(nèi)含子序列的研究仍然不多。尤其是缺失患者斷裂點局部序列的研究仍然是空白。另外，對抗肌萎縮蛋白及其相關(guān)蛋白（dystrophin-associatedproteins）功能的研究亦是國際研究的熱點之一。我國目前尚缺乏大規(guī)模的對中國人抗肌萎縮蛋白基因突變特點的研究。部DMDDMD國開展更有針對性的檢測提供依據(jù)。DMDPCRPCR-RFLPDNADNADMDDMDcDNADMD二是雖然對肌母細(xì)胞移植的療效有爭議，但畢竟目前研究