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細(xì)菌的接種和注意事項終極版詳解演示文稿當(dāng)前第1頁\共有29頁\編于星期四\7點(優(yōu)選)細(xì)菌的接種和注意事項終極版當(dāng)前第2頁\共有29頁\編于星期四\7點滅菌接種環(huán)1.要充分滅菌接種環(huán),以免污染其標(biāo)本。2.要適當(dāng)冷卻再取標(biāo)本,以免帶不出標(biāo)本中的菌種。當(dāng)前第3頁\共有29頁\編于星期四\7點當(dāng)前第4頁\共有29頁\編于星期四\7點取標(biāo)本1.蘸取標(biāo)本時應(yīng)適量,以免標(biāo)本太少漏檢。2.液體標(biāo)本,如尿液,應(yīng)注意混勻。當(dāng)前第5頁\共有29頁\編于星期四\7點接種1.細(xì)菌的接種方法有很多,如平板劃線法、斜面接種法、穿刺接種法,等等。但我們用的最多的是:★平板劃線法—意義指把混雜在一起的微生物,用接種環(huán)在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線,稀釋得到較多的獨立分布的單個菌落,即將樣本在固體培養(yǎng)基表面多次做由點到線稀釋而達(dá)到分純的目的。當(dāng)前第6頁\共有29頁\編于星期四\7點★一區(qū):所占區(qū)域大約是平板面積的1/5~1/4二區(qū):由一區(qū)向二區(qū)帶出三四條平行線三區(qū):由二區(qū)引出三四次,但三區(qū)面積最大當(dāng)前第7頁\共有29頁\編于星期四\7點當(dāng)前第8頁\共有29頁\編于星期四\7點CO2在細(xì)菌培養(yǎng)中的意義當(dāng)前第9頁\共有29頁\編于星期四\7點1有些細(xì)菌在初次分離培養(yǎng)時,需要5﹪-10﹪的CO2。因為細(xì)菌在生長過程中能夠分解培養(yǎng)基中的某些含氮物質(zhì)產(chǎn)生氮,對該菌有殺滅作用,而CO2能中和細(xì)菌產(chǎn)生的氮,以減少對細(xì)菌的毒性。如腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、牛布魯菌等。
2.為細(xì)菌提供碳源,促進(jìn)細(xì)菌的生長。如肺炎鏈球菌,草綠色鏈球菌。在細(xì)菌室的培養(yǎng)箱上有一個CO2的開關(guān),為什么要用CO2呢?當(dāng)前第10頁\共有29頁\編于星期四\7點常見細(xì)菌的鑒別及其特點當(dāng)前第11頁\共有29頁\編于星期四\7點陽性球菌葡萄球菌---金黃色葡萄球菌當(dāng)前第12頁\共有29頁\編于星期四\7點金葡特點是人類化膿性感染最常見的病原菌,可以引起局部感染,也可以引起全身感染。血漿凝固酶,陽性。血平板上呈黃色菌落,大而凸起,表面光滑,有β溶血環(huán)。G+陽性球菌,葡萄狀排列,無芽孢,無莢膜。1.2.3.4.當(dāng)前第13頁\共有29頁\編于星期四\7點葡萄球菌---表面葡萄球菌當(dāng)前第14頁\共有29頁\編于星期四\7點表葡特點正常存在于人體皮膚、黏膜表面,多見于院內(nèi)感染,如體內(nèi)異物留置,靜脈導(dǎo)管等血漿凝固酶,陰性表葡形態(tài)同金葡相似,但是為白色、扁平菌落,無溶血環(huán)1.2.3.3.當(dāng)前第15頁\共有29頁\編于星期四\7點鏈球菌
常見的鏈球菌主要有化膿性鏈球菌、草綠色鏈球菌、肺炎鏈球菌。
根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)不同可以把鏈球菌分為A、B、C、D等二十個群,但對人類有致病性的大多數(shù)屬于A群,少量屬于B群。當(dāng)前第16頁\共有29頁\編于星期四\7點根據(jù)在血平板上溶血分為以下三種:甲型(α型)溶血性鏈球菌,又稱草綠色鏈球菌,菌落周圍有草綠色溶血環(huán),致病力弱,是條件致病菌。乙型(β型)溶血性鏈球菌,產(chǎn)生強(qiáng)烈的溶血毒素,在血平板上可使菌落周圍出現(xiàn)2~4mm的無色透明溶血環(huán)。丙型(r-)鏈球菌,菌落周圍無溶血環(huán),又叫不溶血性鏈球菌,通常不致病。
當(dāng)前第17頁\共有29頁\編于星期四\7點肺炎鏈球菌菌落特點:在血平板上0.5~1.5mm,灰白色半透明,表面光滑,扁平,周圍環(huán)繞草綠色溶血環(huán),培養(yǎng)放置24h以上的菌落,還會因為產(chǎn)生自溶酶的作用,而致菌落中央塌陷而邊緣隆起,呈臍窩狀。當(dāng)前第18頁\共有29頁\編于星期四\7點肺炎鏈球菌、A群、B群的區(qū)分:
Opt試驗抑菌環(huán)>14,鑒定為肺鏈+桿菌肽試驗-+-A群CAMP試驗+B群當(dāng)前第19頁\共有29頁\編于星期四\7點Opt實驗當(dāng)前第20頁\共有29頁\編于星期四\7點桿菌肽實驗當(dāng)前第21頁\共有29頁\編于星期四\7點11當(dāng)前第22頁\共有29頁\編于星期四\7點葡萄球菌與鏈球菌的鑒別:1.涂片—涂片革蘭染色,葡萄球菌呈葡萄串樣,鏈球菌呈鏈狀。2.M-H試驗—當(dāng)染片不能區(qū)別時,接種到M-H平板,長成菌落之后,可挑單個菌落做觸酶試驗,+是葡萄球菌,-是鏈球菌。當(dāng)前第23頁\共有29頁\編于星期四\7點腸球菌腸球菌屬特點:G+,成圓球形或橢圓形,單個,成對,或短鏈,均可。在血平板上可形成灰白色不透明表面光滑,0.5~1.0mm大小的菌落,可有溶血現(xiàn)象。當(dāng)前第24頁\共有29頁\編于星期四\7點以糞腸球菌和屎腸球菌為常見:阿拉伯糖山梨醇屎腸球菌陽性陰性糞腸球菌陰性陽性
當(dāng)前第25頁\共有29頁\編于星期四\7點陰性桿菌大腸桿菌:G-桿菌,有鞭毛、菌毛,無芽胞。菌落2~3mm,圓形凸起,灰白濕潤,光滑半透明,邊緣整齊。某些菌落可產(chǎn)生有透明溶血環(huán)。當(dāng)前第26頁\共有29頁\編于星期四\7點鮑曼不動桿菌菌落特點:圓形、凸起光滑、邊緣整齊不透明、灰白色有粘性的菌落多數(shù)菌落不溶血在中國蘭上為粉紅色菌落當(dāng)前第27頁\共有29頁\編于星期四\7點菌落特點:較大菌落、凸起、灰白色黏液型、相鄰菌落容易發(fā)生融合可挑出長絲狀細(xì)絲肺炎克雷伯桿菌
當(dāng)前第28頁\共有29頁\編于星期四\7點
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