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培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化內(nèi)容全ppt課件當(dāng)前第1頁\共有39頁\編于星期三\22點1、血球計數(shù)板的結(jié)構(gòu)
血球計數(shù)板是一種專門用于計算較大單細胞微生物數(shù)量的儀器,由一塊比普通載玻片厚的特制玻片制成的玻片中有四條下凹的槽,構(gòu)成三個平臺。中間的平臺較寬,其中間又被一短橫槽隔為兩半,每半邊上面刻有一個方格網(wǎng)。
當(dāng)前第2頁\共有39頁\編于星期三\22點大方格中方格小方格當(dāng)前第3頁\共有39頁\編于星期三\22點
方格網(wǎng)上刻有9個大方格,其中只有中間的一個大方格為計數(shù)室,供微生物計數(shù)用。
大方格的長和寬各為1mm,深度為0.1mm,即1mm×1mm×0.1mm,其容積為0.1mm3;大方格的長和寬各為2mm,深度為0.1mm,即2mm×2mm×0.1mm,其容積為0.4mm3當(dāng)前第4頁\共有39頁\編于星期三\22點計數(shù)室通常也有兩種規(guī)格16×25型:即大方格內(nèi)分為16中格,每一中格又分為25小格25×16型:即大方格內(nèi)分為25中格,每一中格又分為16小格。
不管計數(shù)室是哪一種構(gòu)造,其每一大方格都是由16×25=25×16=400個小方格組成。當(dāng)前第5頁\共有39頁\編于星期三\22點2、計數(shù)16×25型:
一般取四角的四個中方格(100個小方格)計數(shù)25×16型:一般計數(shù)四個角和中央的五個中方格(80個小方格)的細胞數(shù)。
當(dāng)前第6頁\共有39頁\編于星期三\22點3、計算
以1mm×1mm×0.1mm型為例
計數(shù)室容積為0.1mm3,則每個小方格的容積為1/4000mm3
。100個小方格細胞總數(shù)/100×400×10000×稀釋倍數(shù)
酵母細胞個數(shù)/1mL=80個小方格細胞總數(shù)/80×400×10000×稀釋倍數(shù)
當(dāng)前第7頁\共有39頁\編于星期三\22點例1通常用血球計數(shù)板對培養(yǎng)液中酵母菌進行計數(shù),若計數(shù)室為1mm×1mm×0.1mm方格,由400個小方格組成。若多次重復(fù)計數(shù)后,算得每個小方格中平均有5個酵母菌,則10mL該培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)有
個。2×108當(dāng)前第8頁\共有39頁\編于星期三\22點例2檢測員將1mL水樣稀釋10倍后,用抽樣檢測的方法檢測每毫升藍藻的數(shù)量;將蓋玻片放在計數(shù)室上,用吸管吸取少許培養(yǎng)液使其自行滲入計數(shù)室,并用濾紙吸去多余液體。已知每個計數(shù)室由25×16=400個小格組成,容納液體的總體積為0.1mm3。
現(xiàn)觀察到圖中該計數(shù)室所示a、b、c、d、e5個中格80個小格內(nèi)共有藍藻n個,則上述水樣中約有藍藻
個/mL。5n×105當(dāng)前第9頁\共有39頁\編于星期三\22點探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化一般步驟:(1)提出問題:培養(yǎng)液中酵母菌種群是怎樣隨時間變化的?(2)作出假設(shè):
。(3)討論探究思路:問題(4)制定計劃:(5)實施計劃:(6)分析結(jié)果,得出結(jié)論:(7)表達和交流:(8)進一步探究:當(dāng)前第10頁\共有39頁\編于星期三\22點當(dāng)前第11頁\共有39頁\編于星期三\22點怎樣進行酵母菌的計數(shù)?
對一支試管中的培養(yǎng)液(可定為10ml)中的酵母菌逐個計數(shù)是非常困難的,可以采用抽樣檢測的方法:先將蓋玻片放在計數(shù)室上,用吸管吸取培養(yǎng)液,滴于蓋玻片邊緣,讓培養(yǎng)液自行滲入,多余培養(yǎng)液用濾紙吸去,稍待片刻,待酵母菌細胞全部沉降到計數(shù)室底部,將計數(shù)板放在載物臺的中央,計數(shù)一個小方格內(nèi)的酵母菌數(shù)量,再以此為根據(jù),估算計算中的酵母菌總數(shù),蓋玻片下,培養(yǎng)液厚度為0.1mm,可算出10ml培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)的公式:4×107x(x為小方格內(nèi)酵母菌數(shù))
當(dāng)前第12頁\共有39頁\編于星期三\22點從試管中吸出培養(yǎng)液進行計數(shù)之前,建議你將試管輕輕振蕩幾次。這是為什么?本探究需要設(shè)置對照嗎?如果需要請討論對照組應(yīng)怎樣設(shè)計和操作;如果不需要,請說明理由。需要做重復(fù)實驗嗎?
目的是使培養(yǎng)液中的酵母菌均勻分布,以保證估算的準(zhǔn)確性,減少誤差。
不需要,本實驗旨在探究培養(yǎng)液中酵母菌在一定條件下的種群數(shù)量變化,只要分組實驗,獲得平均數(shù)值即可。
不用重復(fù),只要分組實驗獲得平均值即可。重復(fù)是為了使結(jié)果更準(zhǔn)確。本實驗酵母菌種群數(shù)量足夠多,樣本足夠大。其數(shù)據(jù)是80--100個小方格的平均值,足夠精確。當(dāng)前第13頁\共有39頁\編于星期三\22點5、怎樣記錄結(jié)果?記錄表怎樣設(shè)計?如果一個小方格內(nèi)酵母菌過多,難以計數(shù),應(yīng)采取怎樣的措施?第1天第2天第3天第4天第5天第6天第7天第1組第2組第3組------第n組平均值
搖勻試管取1mL酵母菌培養(yǎng)液稀釋幾倍后,再用血球計數(shù)板計數(shù)只計數(shù)相鄰兩邊及其頂角的酵母菌數(shù)。7對于壓在小方格界線上的酵母菌,應(yīng)當(dāng)怎樣計數(shù)?當(dāng)前第14頁\共有39頁\編于星期三\22點探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化一般步驟:(1)提出問題:培養(yǎng)液中酵母菌種群是怎樣隨時間變化的?(2)作出假設(shè):
。(3)討論探究思路:(4)制定計劃:(5)實施計劃:(6)分析結(jié)果,得出結(jié)論:(7)表達和交流:(8)進一步探究:當(dāng)前第15頁\共有39頁\編于星期三\22點探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化當(dāng)前第16頁\共有39頁\編于星期三\22點單細胞真核生物生長周期短,增殖速度快還可以用酵母菌作為實驗材料研究
探究酵母菌的呼吸方式判斷細胞的死活(探究膜的透性)當(dāng)前第17頁\共有39頁\編于星期三\22點種群數(shù)量的變化包括增長、波動、穩(wěn)定、下降等“S”型曲線有一個K值,即環(huán)境容納量。種群數(shù)量的增長也受到許多環(huán)境因素(如溫度、培養(yǎng)液的pH、培養(yǎng)液的養(yǎng)分種類和濃度、代謝產(chǎn)物等)的影響。當(dāng)前第18頁\共有39頁\編于星期三\22點培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量與時間的變化關(guān)系實驗原理:種群的數(shù)量變化有一定的規(guī)律。在理想條件下,種群呈“J”型增長,在有限的環(huán)境下,種群呈“S”型增長。酵母菌生長周期短,增殖速度快,在實驗室條件下,用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)酵母菌,可以觀察酵母菌種群數(shù)量隨時間變化的情況。當(dāng)前第19頁\共有39頁\編于星期三\22點血球計數(shù)板是一種專門用于計算較大單細胞微生物的一種儀器。計數(shù)時,常采用樣方法。當(dāng)前第20頁\共有39頁\編于星期三\22點
對于壓在小方格界線上的酵母菌應(yīng)取相鄰兩邊及頂角計數(shù)。當(dāng)前第21頁\共有39頁\編于星期三\22點當(dāng)前第22頁\共有39頁\編于星期三\22點第1天當(dāng)前第23頁\共有39頁\編于星期三\22點第4
天第6天當(dāng)前第24頁\共有39頁\編于星期三\22點第7
天死亡當(dāng)前第25頁\共有39頁\編于星期三\22點活菌數(shù)當(dāng)前第26頁\共有39頁\編于星期三\22點在計數(shù)前,還應(yīng)有哪些步驟?需注意些什么?培養(yǎng)液配制滅菌接種培養(yǎng)無菌操作培養(yǎng)條件當(dāng)前第27頁\共有39頁\編于星期三\22點試管編號培養(yǎng)液/mL無菌水/mL酵母菌母液/mL溫度(℃)A10—0.128B10—0.15C—100.128
針對“培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的動態(tài)變化”,有人提出了新的問題,某同學(xué)按下表完成了有關(guān)實驗。當(dāng)前第28頁\共有39頁\編于星期三\22點溫度、營養(yǎng)物質(zhì)對酵母菌生長的影響當(dāng)前第29頁\共有39頁\編于星期三\22點試管編號培養(yǎng)液/mL無菌水/mL酵母菌母液/mL溫度(℃)A10—0.128B10—0.15C—100.128當(dāng)前第30頁\共有39頁\編于星期三\22點培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化探究:當(dāng)前第31頁\共有39頁\編于星期三\22點探究過程1.提出問題:2.作出假設(shè):3.設(shè)計實驗:4.進行實驗:5.分析結(jié)果和表達交流:6.得出結(jié)論:培養(yǎng)液中酵母菌種群的數(shù)量是怎樣隨時間變化的?酵母菌在開始一段時間呈“J”型增長,隨著時間的推移,由于資源和空間有限,呈“S”型增長。連續(xù)培養(yǎng)5天,每天用顯微鏡和血球計數(shù)板計數(shù)出酵母菌種群密度各小組匯報實驗結(jié)果,結(jié)合前4天的結(jié)果,畫出酵母種群增長的曲線圖并進行分析。酵母菌在開始一段時間呈“J”型增長,但隨著時間的推移,由于資源和空間有限,將呈“S”型增長,并最終將全部死亡。當(dāng)前第32頁\共有39頁\編于星期三\22點3.設(shè)計實驗:①將10mL無菌馬鈴薯培養(yǎng)液或肉湯培養(yǎng)液加入試管中;②將酵母菌接種入試管中的培養(yǎng)液中混合均勻;③將試管在28℃條件下連續(xù)培養(yǎng)5d;④每天取樣計數(shù)酵母菌數(shù)量;⑤分析結(jié)果,得出結(jié)論。是否設(shè)置對照組和多組重復(fù)實驗?為什么要連續(xù)培養(yǎng)?如何取樣計數(shù)?記錄表怎樣設(shè)計?計數(shù)時有哪些注意事項?當(dāng)前第33頁\共有39頁\編于星期三\22點計數(shù)室計數(shù)室(中間大方格)的長和寬各為1mm,深度為0.1mm,其體積為______mm3,合_________mL。1mm0.11×10-4血球計數(shù)板:一種專門計數(shù)較大單細胞微生物的儀器當(dāng)前第34頁\共有39頁\編于星期三\22點計數(shù)室計數(shù)室分為25中格(雙線邊)每一中格又分為16小格計數(shù)室是由___________個小格組成25×16=400當(dāng)前第35頁\共有39頁\編于星期三\22點如何計數(shù)?五點取樣法樣方法每mL培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量==A(平均每個中格酵母細胞數(shù))×25×104×稀釋倍數(shù)A1A2A5A3A4當(dāng)前第36頁\共有39頁\編于星期三\22點酵母菌數(shù)量變化記錄表當(dāng)前第37頁\共有39頁\編于星期三\22
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