實(shí)驗(yàn)一分光光度計(jì)的性能檢驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)一分光光度計(jì)的性能檢驗(yàn)第一頁，共十三頁，編輯于2023年，星期五目的（1）學(xué)會(huì)使用分光光度計(jì)。（2）掌握分光光度計(jì)的性能檢驗(yàn)方法。第二頁，共十三頁，編輯于2023年，星期五實(shí)驗(yàn)原理（1）分光光度計(jì)的性能好壞，直接影響到測定結(jié)果的準(zhǔn)確性，因此新購儀器及使用一定時(shí)間后，均需進(jìn)行檢驗(yàn)調(diào)整。（2）利用KMnO4溶液的最大吸收值來檢驗(yàn)波長的精度。（3）同種厚度的比色皿，由于材料及工藝等原因，往往造成透光率的不一致，從而影響測定結(jié)果，故在使用時(shí)需加以選擇配對(duì)。第三頁，共十三頁，編輯于2023年，星期五儀器和試劑（1）722型分光光度計(jì)（2）容量瓶：25ml1支；100ml1支（3）吸量管：1ml1支，10ml1支（4）0.2mol/LKMnO4溶液（5）0.02mol/LK2Cr2O7溶液第四頁，共十三頁，編輯于2023年，星期五操作步驟1

1．比色皿透光率的檢查

以空氣的透光率為100%，則比色皿的透光率應(yīng)不低于84%，同時(shí)在450nm、650nm處測其透光率，各透光率差值應(yīng)小于5%。2．比色皿的配對(duì)性同種厚度的比色皿之間，透光率誤差應(yīng)小于0.5%。檢查方法：將0.02mol/L的K2Cr2O7溶液5ml稀釋到25ml,分別注入厚度相同的幾個(gè)比色皿中。以其中一個(gè)比色皿的溶液做空白，在440nm波長處分別測定其它各比色皿中溶液的透光率，然后選擇相差小于0.5%的比色皿使用。第五頁，共十三頁，編輯于2023年，星期五操作步驟2

3.重現(xiàn)性儀器在同一工作條件下(440)，用同種溶液連續(xù)測定7次，其透光率最大讀數(shù)與最小讀數(shù)之差(極差)應(yīng)小于0.5%。檢查方法如下:以蒸餾水的透光率為100%,用同一K2Cr2O7溶液連續(xù)測定7次，求出極差，如小于0.5%，則符合要求。第六頁，共十三頁，編輯于2023年，星期五操作步驟24.波長精度的檢查為了檢查分光系統(tǒng)的質(zhì)量,可用KMnO4溶液的吸光度最大吸收波長525nm為標(biāo)準(zhǔn),在待檢查儀器上測繪KMnO4溶液的吸收曲線。檢查方法如下:取0.2mol/L的KMnO4溶液0.3ml,用水稀釋到100ml。以水為空白調(diào)零，在460~570nm處，每隔5nm分別測定吸光度，在坐標(biāo)紙上繪出吸收曲線。若測得的最大吸收波長在525±10nm以內(nèi)，說明該儀器符合使用要求。第七頁，共十三頁，編輯于2023年，星期五722型分光光度計(jì)使用方法

1.開機(jī)后需預(yù)熱20分鐘。2.波長設(shè)定需從短波向長波方向調(diào)整。3.調(diào)零需在透射比模式下將比色皿架置于調(diào)零檔。4.調(diào)滿度時(shí)將空白樣品置于光路，按100%T（OA）鍵。5.按方式鍵可實(shí)現(xiàn)透射比，吸光度方式轉(zhuǎn)換。6.波長改變后千萬不能忘了再調(diào)到零和調(diào)滿度。第八頁，共十三頁，編輯于2023年，星期五注意事項(xiàng)

1.待測溶液裝量應(yīng)超過比色皿2/3，但也不能裝得太滿。2.實(shí)驗(yàn)過程中，注意不要將溶液撒入機(jī)器內(nèi)部，如果發(fā)生上述情況，請(qǐng)及時(shí)清理干凈。3.比色皿用后，請(qǐng)洗凈后，用95%乙醇浸泡，長期不用，請(qǐng)擦干后，收好。第九頁，共十三頁，編輯于2023年，星期五300400500600700/nm350525545Cr2O72-MnO4-1.00.80.60.40.2AbsorbanceCr2O72-、MnO4-的吸收光譜350第十頁，共十三頁，編輯于2023年，星期五數(shù)據(jù)1．比色皿透光率的檢查4個(gè)比色皿在450nm、650nm的透光率2．比色皿的配對(duì)性4個(gè)比色皿中K2Cr2O7溶液在440nm的透光率3.重現(xiàn)性1個(gè)比色皿中K2Cr2O7溶液在440nm的透光率4.波長精度的檢查1個(gè)比色皿中KMnO4溶液在460～570nm吸光度第十一頁，共十三頁，編輯于2023年，星期五思考題

1．同種比色皿透光度的差異對(duì)測定有何影響？2．檢查分光光度計(jì)的波長精度及重現(xiàn)性對(duì)測定有什么