脂肪的測(cè)定無(wú)重復(fù)

脂肪的測(cè)定無(wú)重復(fù)演示文稿目前一頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)（優(yōu)選）脂肪的測(cè)定無(wú)重復(fù)目前二頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)食品中的脂含量表1列出了牛奶中脂類(lèi)的含量。該表顯示了牛奶中的脂類(lèi)在極性和濃度方面的復(fù)雜性。

目前三頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)表1牛奶的脂類(lèi)含量脂肪的種類(lèi)脂類(lèi)中的百分含量甘油三酯97-99甘油二酯0.28-0.59甘油一酯0.016-0.038磷脂0.2-1.0膽固醇0.25-0.40三十碳六烯痕量游離脂肪酸0.1-0.44蠟質(zhì)痕量維生素A7-8.5μg/g類(lèi)胡羅卜素8-10μg/g維生素D痕量維生素E2-5μg/g維生素K痕量目前四頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)分析的重要性是食品中的重要的營(yíng)養(yǎng)成分之一，是一種富含熱能的營(yíng)養(yǎng)素，是人體熱能的主要來(lái)源。在食品加工生產(chǎn)過(guò)程中，原料、半成品、成品的脂類(lèi)含量對(duì)產(chǎn)品的風(fēng)味、組織結(jié)構(gòu)、品質(zhì)、外觀、口感等都有直接的影響。

目前五頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)概述脂類(lèi)溶于有機(jī)溶劑，不溶于水——此性質(zhì)為脂類(lèi)的重要分析特征，并作為其與蛋白質(zhì)、水、碳水化合物分離的基礎(chǔ)。在食品中存在狀態(tài)：游離態(tài)（脂肪、油脂）和結(jié)合態(tài)（磷脂、糖脂、脂蛋白）對(duì)于結(jié)合態(tài)的脂，必須打破脂類(lèi)與蛋白質(zhì)或碳水化合物之間的結(jié)合，使脂類(lèi)能游離并溶于有機(jī)萃取液中，才能進(jìn)行成功的萃取。

目前六頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)分析方法溶劑萃取法：脂類(lèi)不溶于水，溶于有機(jī)溶劑（乙醚、石油醚、氯仿-甲醇）

精確性較大程度上取決于脂類(lèi)在所用萃取劑中的溶解性。某一食品采用一種溶劑萃取后得到的脂含量與用另一種溶劑萃取后得到的結(jié)果很可能相差很大。非溶劑萃取法：巴布科克法，蓋勃法、紅外光譜法、NMR法、介電常數(shù)法等目前七頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)一、溶劑萃取法用于脂肪萃取的理想溶劑應(yīng)具有下列條件：（1）對(duì)脂類(lèi)具有很強(qiáng)的溶解能力，而對(duì)蛋白質(zhì)、氨基酸和碳水化合物則沒(méi)有或只有很低的溶解能力；（2）可直接揮發(fā)而不留殘?jiān)?；具有相?dāng)?shù)偷姆悬c(diǎn)；（3）在液態(tài)和氣態(tài)下不可燃且無(wú)毒害；（4）可直接滲透樣品顆粒；（5）形成的萃取組分比較簡(jiǎn)單以避免再分餾；（6）價(jià)格便宜；（7）不吸濕。乙醚和石油醚，戊烷和正己烷是最常用的溶劑。二至三種溶劑的組合使用也是溶劑萃取中常用的方法。這些溶劑必須經(jīng)純化，且不含過(guò)氧化物。并且必須采用適當(dāng)?shù)娜軇┡c溶質(zhì)的比例以獲得最佳萃取效果。

目前八頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)溶劑乙醚和石油醚是最常用的溶劑，戊烷和正己烷也常用于大豆油的萃取。乙醚：溶解脂肪能力強(qiáng)，較其它溶劑便宜。但沸點(diǎn)低（34.6℃），但其易燃易爆。使用乙醚時(shí)室內(nèi)需空氣流暢，因?yàn)橐颐言诳諝庵?，最大允許濃度為400ppm，超過(guò)這個(gè)極限易爆炸。乙醚能被2%的水飽和，含水的乙醚抽提能力降低（氧與水能形成氫鍵使穿透組織能力降低，即抽提能力下降）。含水的乙醚使非脂成分溶解，而被抽提出來(lái)，使結(jié)果偏高（糖蛋白質(zhì)等），因此，使用乙醚時(shí)，樣品不能含水分，必須干燥。目前九頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)提取卵磷脂(25℃)（mg/100g）低分子成分無(wú)水乙醚含水乙醚葡萄糖10.5315蔗糖15150絲氨酸015NaCl

025目前十頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)乙醚一般貯存在棕色瓶中放置一段時(shí)間后，因?yàn)樵诠庀抡丈鋾?huì)產(chǎn)生過(guò)氧化物，過(guò)氧化物也容易爆炸，如果乙醚貯存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，在使用前一定要檢查有無(wú)過(guò)氧化物，如果有應(yīng)當(dāng)除掉。檢查過(guò)氧化物的方法：

在乙醚中+少量的Fe2++少量KCNS待到紅色出現(xiàn)，說(shuō)明有過(guò)氧化物存在，反之為無(wú)色，排除過(guò)氧化物的方法如下：

含過(guò)氧化物乙醚+FeSO4(少量)------可除掉過(guò)氧化物目前十一頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)石油醚：石油醚溶解脂肪的能力比乙醚弱些，沸點(diǎn)為35--38℃，吸收水分比乙醚少。沒(méi)有乙醚易燃。使用時(shí)允許樣品含有微量水分，它沒(méi)有膠溶現(xiàn)象，不會(huì)夾帶膠溶淀粉、蛋白質(zhì)等物質(zhì)。采用石油醚提取劑，測(cè)定值比較接近真實(shí)值。只能用于提取游離脂肪，對(duì)于結(jié)合脂肪，必須預(yù)先用酸或堿破壞結(jié)合才能提取。乙醚與石油醚常?；旌鲜褂?。目前十二頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)氯仿-甲醇：對(duì)于脂蛋白、磷脂的提取率較高，特別適用于水產(chǎn)品、家禽、蛋制品等食品脂肪的提取。目前十三頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)樣品預(yù)處理有時(shí)需要粉碎、切碎、研磨等，有時(shí)需要烘干等。目的是為了增加樣品的表面積，減少樣品含水量，使有機(jī)溶劑更有效地提取出脂類(lèi)。目前十四頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)1.索氏提取法索氏提取法（AOAC法920.39C測(cè)定谷類(lèi)中的脂肪含量，AOAC法960.39測(cè)定肉類(lèi)中的脂肪含量）是一種半連續(xù)溶劑萃取法。是我國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法。目前十五頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)原理與特性將經(jīng)前處理的樣品用無(wú)水乙醚或石油醚回流提取，使樣品中的脂肪進(jìn)入溶劑中，蒸去溶劑后所得到的殘留物即為脂肪（粗脂肪）。本法提取的脂溶性物質(zhì)為脂肪類(lèi)物質(zhì)的混合物，除含有脂肪外還含有磷脂、色素、樹(shù)脂、固醇、芳香油等醚溶性物質(zhì)。因此，使用該法測(cè)得的也是粗脂肪。目前十六頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)適用范圍適用于脂類(lèi)含量較高、結(jié)合態(tài)的脂類(lèi)含量較少、能烘干磨細(xì)、不易吸濕結(jié)塊的樣品的測(cè)定，測(cè)得的只是游離態(tài)脂肪（結(jié)合脂肪不能直接被有機(jī)溶劑提取）。對(duì)大多數(shù)樣品結(jié)果比較可靠，但費(fèi)時(shí)間，溶劑用量大，且需專(zhuān)門(mén)的索氏抽提器。目前十七頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)樣品處理固體樣品：精密稱(chēng)取干燥并研細(xì)的樣品2~5g（可取測(cè)定水分后的樣品），必要時(shí)拌以海沙。半固體或液體樣品：稱(chēng)取5.0~10.0g于蒸發(fā)皿中，加海砂于沸水浴上蒸干，在烘干（最好是減壓低溫干燥），研細(xì)。目前十八頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)儀器索氏提取器索氏提取器，又稱(chēng)脂肪抽取器或脂肪抽出器。索氏提取器是由提取瓶、提取管、冷凝器三部分組成的，提取管兩側(cè)分別有虹吸管和連接管，各部分連接處要嚴(yán)密不能漏氣。目前十九頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)虹吸是利用液面高度差的作用力現(xiàn)象，將液體充滿一根倒U形的管狀結(jié)構(gòu)內(nèi)后，將開(kāi)口高的一端置于裝滿液體的容器中，容器內(nèi)的液體會(huì)持續(xù)通過(guò)虹吸管從開(kāi)口于更低的位置流出。虹吸的實(shí)質(zhì)是因?yàn)橹亓头肿娱g粘聚力而產(chǎn)生。裝置中管內(nèi)最高點(diǎn)液體在重力作用下往低位管口處移動(dòng)，在U型管內(nèi)部產(chǎn)生負(fù)壓，導(dǎo)致高位管口的液體被吸進(jìn)最高點(diǎn)，從而使液體源源不斷地流入低位置容器。目前二十頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)儀器索氏提取器提取時(shí)，將待測(cè)樣品包在脫脂濾紙包內(nèi)，放入提取管內(nèi)。提取瓶?jī)?nèi)加入石油醚，加熱提取瓶，石油醚氣化，由連接管上升進(jìn)入冷凝器，凝成液體滴入提取管內(nèi)，浸提樣品中的脂類(lèi)物質(zhì)。待提取管內(nèi)石油醚液面達(dá)到一定高度，溶有粗脂肪的石油醚經(jīng)虹吸管流入提取瓶。流入提取瓶?jī)?nèi)的石油醚繼續(xù)被加熱氣化、上升、冷凝，滴入提取管內(nèi)，如此循環(huán)往復(fù)，直到抽提完全為止。目前二十一頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)目前二十二頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)操作步驟濾紙筒的制備：將8m×15cm的濾紙，用直徑約為2cm的試管為模型，將濾紙以試管壁為基礎(chǔ)，疊成底端封口的濾紙筒，筒內(nèi)底部放一小片脫脂棉。將預(yù)先干燥過(guò)的接收燒瓶稱(chēng)重。目前二十三頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)操作步驟樣品處理①固體樣品：精密稱(chēng)取2～5g（可取測(cè)定水分后的樣品），必要時(shí)拌以海砂，全部移入濾紙筒內(nèi)。②液體或半固體樣品：稱(chēng)5.00~10.00g，置于蒸發(fā)皿中，加入約20g海砂于沸水浴上蒸干后，在100±5℃干燥，研細(xì)，全部移入濾紙筒內(nèi)。蒸發(fā)皿及附有樣品的玻棒，均用沾有乙醚的脫脂棉擦凈，并將棉花放入濾紙筒內(nèi)。目前二十四頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)操作步驟抽提將濾紙筒放入索氏抽提器內(nèi)，連接接受瓶，由冷凝管上端加入無(wú)水乙醚或石油醚。加量為接受瓶的2/3體積，于水?。?5℃或80℃）上加熱使乙醚或石油醚不斷地回流提取，一般6~12小時(shí)，至抽提完為止。稱(chēng)量將含有脂肪的接收瓶取下，回收乙醚或石油醚，待接收瓶中乙醚剩1~2mL時(shí)，在水浴上蒸干，在100~105℃烘箱內(nèi)干燥2小時(shí)，稱(chēng)重并重復(fù)至恒重。

目前二十五頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)計(jì)算脂肪%=（接收瓶和脂肪的質(zhì)量-接收瓶的質(zhì)量）/樣品質(zhì)量×100目前二十六頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)注意及說(shuō)明樣品應(yīng)干燥后研細(xì)，樣品含水會(huì)影響溶劑提取效果，而且溶劑會(huì)吸收樣品中的水分造成非脂成分溶出。裝樣品的濾紙筒一定要嚴(yán)密，不能往外漏樣品，但也不要包的太緊影響溶劑滲透。對(duì)含多量糖和糊精的樣品，要先用冷水使糖及糊精溶解除去，抽提殘?jiān)?。抽提用乙醚和石油醚要求無(wú)水、無(wú)醇、無(wú)過(guò)氧化物，揮發(fā)殘?jiān)康?。水浴溫度不能過(guò)高。冷凝管上端最好連接一支氯化鈣干燥管，或塞一團(tuán)干燥的脫脂棉球防止空氣中水分進(jìn)入。不可用直接火加熱揮發(fā)乙醚或石油醚。目前二十七頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)2.酸水解法原理：試樣與鹽酸溶液一同加熱進(jìn)行水解，使結(jié)合或包藏在組織里的脂肪游離出來(lái)，再用乙醚或石油醚提取脂肪，回收溶劑，干燥后稱(chēng)重。適用范圍：各類(lèi)食品中脂肪的測(cè)定，對(duì)固體、半固體、粘稠液體或液體食品，特別是加工后的混合食品，容易吸濕、結(jié)塊、不易烘干的食品，不能采取索氏抽提法時(shí)，用此法效果好。不適用與含糖高的食品（糖遇強(qiáng)酸易炭化）。測(cè)定的是總脂肪（游離態(tài)和結(jié)合態(tài)）。目前二十八頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)儀器

100mL具塞刻度量筒目前二十九頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)試劑(1)鹽酸。(2)乙醇(95％)。(3)乙醚。(4)石油醚(30~60℃沸程)。目前三十頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)操作方法(1)樣品處理①固體樣品：稱(chēng)取約2.00g，按索氏抽提法制備的樣品置于50mL大試管內(nèi)，加8mL水，混勻后再加10mL鹽酸。②液體樣品：稱(chēng)取10.00g，置于50mL大試管內(nèi)，加10mL鹽酸。目前三十一頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)(2)水解將試管放入70~80℃水浴中，每隔5~10min以玻璃棒攪拌一次，至樣品消化完全為止，約40~50min。目前三十二頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)(3)提取取出試管，加入10mL乙醇，混合。冷卻后將混合物移于100mL具塞量筒中，以25mL乙醚分次洗試管，一并倒入量筒中。待乙醚全部倒入量筒后，加塞振搖1min，小心開(kāi)塞，放出氣體，再塞好，靜置12min，小心開(kāi)塞，并用石油醚—乙醚等量混合液沖洗塞及筒口附著的脂肪。靜置10~20min，待上部液體清晰，吸出上清液于已恒重的錐形瓶?jī)?nèi)，再加5mL乙醚于具塞量筒內(nèi)，振搖，靜置后，仍將上層乙醚吸出，放入原錐形瓶?jī)?nèi)。目前三十三頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)(4)回收溶劑、烘干、稱(chēng)重

將錐形瓶置水浴上蒸干，置100±5℃干燥箱中干燥2h，取出放干燥器內(nèi)冷卻0.5h后稱(chēng)量，重復(fù)以上操作直至恒重。目前三十四頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)酸水解萃取食品脂肪的效果

酸水解后測(cè)得的脂肪含量沒(méi)有酸水解測(cè)得的脂肪含量干蛋42.3936.74酵母6.353.74面粉1.721.20面條3.77-4.842.1-3.91粗粒小麥粉1.86-1.931.1-1.37目前三十五頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)3.氯仿-甲醇提取法原理：將試樣分散于氯仿-甲醇混合溶液中，在水浴中輕微沸騰，氯仿、甲醇和試樣中的水分形成三種成分的溶劑，可把包括結(jié)合態(tài)脂類(lèi)在內(nèi)的全部脂類(lèi)提取出來(lái)。經(jīng)過(guò)除去非脂成分，回收溶劑，殘留的脂類(lèi)用石油醚提取，蒸餾除去石油醚后定量。適合于結(jié)合態(tài)的脂類(lèi)，特別是磷脂含量高的食品，如魚(yú)、貝類(lèi)、肉、禽、蛋及其制品、大豆及其制品等。對(duì)高水分試樣的測(cè)定更為有效，對(duì)于干燥試樣，可先在試樣中加入一定量水。目前三十六頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)4.羅茲-哥特里法原理：利用氨-乙醇溶液破壞乳的膠體性狀及脂肪球膜，使非脂部分溶解于氨-乙醇溶液中，而脂肪游離出來(lái)，再用乙醚-石油醚提取出脂肪，蒸餾去除溶劑后沒(méi)，殘留物為乳脂肪。適用范圍：各種液體乳、各種煉乳、乳粉、奶油及冰激凌等能在堿性溶液中溶解的乳制品，也適用于豆乳或加水呈乳狀的食品。目前三十七頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)儀器抽脂瓶100mL具塞量筒或抽脂瓶：

內(nèi)徑2.0~2.5cm，容積100mL。電熱恒溫水浴鍋：50-80℃。目前三十八頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)試劑(1)20%氨水：相對(duì)密度0.91。(2)96%乙醇。(3)乙醚。(4)石油醚：沸程30~60℃。目前三十九頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)操作方法準(zhǔn)確稱(chēng)取樣品(如乳粉樣品)1~1.2g，或吸取10mL鮮牛乳置于抽脂瓶(或具塞量筒)中，加入1.25mL濃氨水，充分混勻，置60℃水浴中加熱5min，再振搖2min，加入10mL乙醇，充分搖勻，于冷水中冷卻后，加入25mL乙醚，塞好塞子振搖0.5min，加入25mL石油醚，再振搖0.5min，靜置30min，待上層液澄清時(shí)，讀取醚層體積。放出醚層至一已恒重的燒瓶中，記錄體積，蒸餾回收乙醚，置燒瓶于98~100℃。干燥1h后稱(chēng)量，再置98~100℃干燥0.5h后稱(chēng)量，直至前后兩次質(zhì)量相差不超過(guò)1mg。目前四十頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)說(shuō)明(1)本法測(cè)定已結(jié)塊乳粉中脂肪，結(jié)果往往偏低；(2)若使用具塞量筒代替抽脂瓶，待分層后讀數(shù)，澄清液可從管口倒出，但不能攪動(dòng)下層液體；(3)此法除可用于各種液態(tài)乳及乳制品中脂肪測(cè)定外，還可用于豆乳或加水呈乳狀的食品脂肪的測(cè)定。(4)在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過(guò)算術(shù)平均值的5％。目前四十一頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)5.Goldfish法原理與特性連續(xù)溶劑萃取法：萃取溶劑連續(xù)地流過(guò)置于陶瓷萃取管中的樣品進(jìn)行萃取。樣品的脂肪含量則通過(guò)樣品失重或脂肪的抽提量測(cè)得。連續(xù)萃取法比半連續(xù)萃取法更快速、有效。然而有時(shí)會(huì)引起溝流，使得萃取不完全。Goldfish法就是連續(xù)萃取法中的一種。目前四十二頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)目前四十三頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)操作步驟

1．將預(yù)先干燥過(guò)的多孔陶瓷萃取管稱(chēng)重，將經(jīng)真空干燥箱干燥的樣品加入管中，再稱(chēng)重（樣品與海砂混合后放入管中，干燥）。2．將預(yù)先干燥過(guò)的萃取杯稱(chēng)重。3．將陶瓷萃取管放入玻璃夾管中，與萃取裝置的冷凝管聯(lián)接4．將無(wú)水乙醚（或石油醚）倒入萃取杯中，將萃取杯置于加熱板上。5．萃取4小時(shí)。6．停止加熱，使樣品冷卻。7．取下萃取杯，在空氣中干燥過(guò)夜，然后再在100℃下干燥30分鐘，移入干燥器中，冷卻后稱(chēng)重。目前四十四頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)計(jì)算公式樣品脂肪含量=（萃取杯＋脂肪）－萃取杯脂肪含量%（以干基計(jì)）=（樣品脂肪克數(shù)/干樣品克數(shù)）×100

目前四十五頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)6.高溫高壓溶劑萃取法在高溫高壓條件下，利用溶劑與樣品相互作用原理進(jìn)行萃取脂肪的方法。超臨界流體提?。⊿FE）和加速溶劑萃取法（ASE），這兩個(gè)方法目前已經(jīng)越來(lái)越多地替代了傳統(tǒng)溶劑萃取法，因?yàn)榄h(huán)保鼓勵(lì)在實(shí)驗(yàn)室減少有機(jī)溶劑的使用。目前四十六頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)超臨界流體萃取法（SFE）1.原理

流體（大多數(shù)為CO2）充入一個(gè)特殊壓力—溫度裝置中，使之成為能從樣品中將脂肪選擇性地萃取出來(lái)的超臨界態(tài)。樣品在設(shè)定的時(shí)間、壓力、溫度下，始終處于超臨界流體的包圍中，使樣品中的脂肪發(fā)生溶解，溶解后的脂肪通過(guò)沉降從高壓溶劑中分離出來(lái)。沉降后的脂肪經(jīng)干燥后，定量，以重量百分比表示。目前四十七頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)目前四十八頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)分析步驟1)稱(chēng)重。精確稱(chēng)取3—5克（精確至毫克）干燥樣品，置于萃取室中。2)關(guān)閉萃取器，加熱爐升溫至80℃，萃取室加壓至10，000psi。收集瓶應(yīng)保持在60—70℃，壓力與環(huán)境相同。3)用泵將通過(guò)萃取室的CO2流速控制在15升/分鐘。4)在設(shè)定的溫度與壓力下使萃取室出來(lái)的脂肪移至收集瓶，約20分鐘。5)萃取室降壓，停止萃取，關(guān)閉加熱爐，移開(kāi)收集瓶（內(nèi)含有脂肪）。6)收集瓶的內(nèi)容物可通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)（60分鐘，50℃，內(nèi)容物置于預(yù)先稱(chēng)重的底瓶中）除去油產(chǎn)品中CO2殘留或水。7)冷卻，將燒瓶與脂肪一起稱(chēng)重。目前四十九頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)應(yīng)用由于采用SFE萃取的許多樣品具有不同的密度和化學(xué)組成等特性，萃取時(shí)可能需要通過(guò)改變上述方法中所用的壓力與溫度條件以達(dá)到最大萃取效率。SFE除了用于對(duì)總脂肪含量進(jìn)行定量分析外，通過(guò)改變SFE中的壓力-溫度-時(shí)間條件，可對(duì)樣品中少量極性及非極性組分進(jìn)行選擇性萃取。而夾帶劑如甲醇通常用來(lái)幫助超臨界CO2萃取強(qiáng)極性化合物。隨著SFE萃取儀與色譜系統(tǒng)如GC（SFE-GC）的聯(lián)用，使得對(duì)每個(gè)萃取組分進(jìn)行快速準(zhǔn)確的分離及定量分析成為可能。因?yàn)镾FE比傳統(tǒng)的萃取法省時(shí)、省錢(qián)。同時(shí)，由于其精確性及準(zhǔn)確性，該技術(shù)在脂類(lèi)萃取領(lǐng)域中將得到進(jìn)一步的應(yīng)用和發(fā)展。

目前五十頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)加速溶劑萃取法（ASE法）1．原理將固體或半固體樣品置于高溫高壓下的非極性溶劑中，采用靜態(tài)或動(dòng)態(tài)模式進(jìn)行脂肪萃取。在靜態(tài)模式中，萃取時(shí)無(wú)溶劑流出。而在動(dòng)態(tài)模式中，則有新鮮溶劑在萃取時(shí)不斷地流過(guò)樣品，溶解的脂肪從樣品顆粒中心擴(kuò)散至表面，壓縮空氣將溶解的脂肪轉(zhuǎn)移至收集器中。目前五十一頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)目前五十二頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)步驟a.

稱(chēng)重。稱(chēng)取3-5克（精確到毫克級(jí)）干樣品，置于萃取室中。b.

關(guān)閉加熱爐中的萃取室，使萃取溫度達(dá)到150℃（也可以200℃）。在預(yù)熱過(guò)程中打開(kāi)緩沖閥。c.

在達(dá)到要求的溫度后，打開(kāi)泵閥讓溶劑流入萃取室直到約有1ml溶劑積于收集瓶。d.

關(guān)閉緩沖閥，讓萃取室中壓力升至約2000psi。e.

使加壓的靜止溶劑萃取10分鐘。f.

再打開(kāi)緩沖閥，使新的溶劑進(jìn)入萃取室中萃取，收集萃取溶劑于收集瓶中。g.

關(guān)閉泵閥，打開(kāi)吹洗閥使萃取室中剩余溶劑進(jìn)入收集瓶中。h.

經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（50℃60分鐘，用預(yù)先稱(chēng)重過(guò)的底瓶）除去脂肪中的溶劑。i.

冷卻，稱(chēng)重，計(jì)算脂肪含量。目前五十三頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)應(yīng)用動(dòng)態(tài)ASE能進(jìn)行快速萃取，但同時(shí)也會(huì)增加溶劑的消耗。靜態(tài)ASE需要的時(shí)間較長(zhǎng)，但使用的溶劑最少，更適合于痕量分析。動(dòng)態(tài)和靜態(tài)的結(jié)合使用（方法如前所述）通常能使脂肪的萃取得到最佳的結(jié)果。ASE能提供脂類(lèi)的萃取，與用索氏抽提法和其它類(lèi)似技術(shù)相比，ASE只需較短的時(shí)間和少量的有機(jī)溶劑。

目前五十四頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)SFE無(wú)需使用有毒的有機(jī)溶劑，因此完全避免了對(duì)這些溶劑的處理所需的花費(fèi)和所帶來(lái)的危險(xiǎn)。相反，惰性、無(wú)毒且便宜的溶劑如CO2被加熱、加壓至呈超臨界流體態(tài)，在這個(gè)氣—液“混合性”狀態(tài)下，液體密度的超臨界流體對(duì)脂肪樣品具有很強(qiáng)的萃取能力。同時(shí)超臨界流體具有的氣體特性又可促進(jìn)脂肪在萃取完成后從溶劑流體中分離出來(lái)。ASE盡管不能完全排除有機(jī)溶劑的使用，但至少能明顯地降低它們的消耗。因?yàn)樵贏SE過(guò)程中采用了高壓，所以樣品中的脂肪萃取能在高于萃取溶劑沸點(diǎn)的溫度下進(jìn)行，從而可明顯縮短萃取時(shí)間，減少溶劑消耗。目前五十五頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)二、非溶劑萃取法巴布科克法、蓋勃法洗滌劑法折光法紅外光譜法介電常數(shù)法NMR法目前五十六頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)巴布科克法原理用濃硫酸溶解乳中的乳糖和蛋白質(zhì)等非脂成分，將牛奶中的酪蛋白鈣鹽轉(zhuǎn)變成可溶性的重硫酸酪蛋白，使脂肪球膜被破壞，脂肪游離出來(lái)，再利用加熱離心，使脂肪完全迅速分離，直接讀取脂肪層的數(shù)值，便可知被測(cè)乳的含脂率。巴布科克法目前五十七頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)巴布科克法是測(cè)定乳制品中脂肪含量最常用的方法，適用于鮮乳及乳制品脂肪的測(cè)定。時(shí)間約需45min，平行實(shí)驗(yàn)誤差在0.1%之內(nèi)。無(wú)法測(cè)定乳制品中的磷脂，也不適合測(cè)定含巧克力、糖的食品，因?yàn)榱蛩峥墒骨煽肆吞前l(fā)生炭化。改良巴布科克法可用于測(cè)定風(fēng)味提取液中芳香油的含量(AOAC法932.11)及海產(chǎn)品中脂肪(AOAC法964.12)的含量。適用范圍及特點(diǎn)目前五十八頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)儀器(1)乳脂離心機(jī)。(2)巴布科克氏乳脂瓶：3.試劑(1)硫酸：相對(duì)密度1.820~1.825。(2)異戊醇。目前五十九頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)巴布科克法測(cè)定牛奶脂肪（AOAC法989.04和989.10）操作步驟準(zhǔn)確吸取17.6mL樣品，倒入巴布科克氏乳脂瓶中，再取17.5mL濃硫酸，沿瓶頸緩緩流入瓶中，將瓶頸回旋，使液體充分混合，至無(wú)凝塊并成均勻的棕色。將乳脂瓶離心5分鐘(1000r/min)，加入熱水使脂肪上浮至瓶頸部分，再離心2分鐘。再加入熱水使脂肪上浮至2或3刻度處，離心1分鐘。置55~60水浴5分鐘后，立即讀取脂肪層最高與最低點(diǎn)所占的格數(shù)，即為樣品含脂肪的百分率。目前六十頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)蓋勃法原理同巴布科克法目前六十一頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)蓋勃法操作步驟在15-21℃下，將10ml硫酸倒入蓋勃氏乳脂瓶中。精確移取11ml牛奶加入蓋勃氏乳脂瓶中。加入1ml異戊醇。蓋緊塞子，搖勻。將乳脂瓶離心4min。將乳脂瓶置于60-63℃水浴中，5min后，從蓋勃氏乳脂瓶頸的刻度線上讀出脂肪含量。

目前六十二頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)應(yīng)用蓋勃法較巴布科克法簡(jiǎn)單快速，廣泛應(yīng)用于不同乳制品的脂肪測(cè)定中。使用異戊醇是為了防止糖的炭化。該法在歐洲比在美國(guó)使用更為廣泛。

目前六十三頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)洗滌劑法洗滌劑法的原理是洗滌劑與蛋白質(zhì)反應(yīng)形成復(fù)雜的酪蛋白鹽-洗滌劑，從而打破乳化液，釋放出脂肪。該方法首先被用來(lái)測(cè)定牛奶中的脂肪，因?yàn)榘筒伎瓶朔ㄖ辛蛩峋哂懈g性，而該法經(jīng)改良后也可用作測(cè)定其它樣品。將牛奶裝入巴布科克乳脂瓶中，加入陰離子洗滌劑-二苯基磷酸鈉，洗滌劑滲透至維持脂肪穩(wěn)定的蛋白質(zhì)層，使脂肪游離出來(lái)。然后使用強(qiáng)親水性非離子型聚氧乙烯洗滌劑把脂肪從食品的其它組分中分離出來(lái)，并通過(guò)容量法測(cè)定脂肪的百分含量。

目前六十四頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)折光法測(cè)定肉制品中的脂肪原理折射率是各種脂肪的特征常數(shù)，它隨著脂肪的不飽和度、氧化程度、熱處理方法、分析溫度以及脂肪含量的變化而變化。使用溶劑萃取脂肪，將溶劑的折射率和萃取脂肪后溶液的折射率進(jìn)行比較。目前六十五頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)操作步驟1.

精確稱(chēng)取2g樣品。2.

移入研缽中。3.

加1.5g干燥的海砂。4.

加3g無(wú)水硫酸鈉。5.

加3ml溴萘。6.

研磨3min。7.

將濾紙放入漏斗中置于燒杯上。8.

將研缽中的樣品倒入漏斗中。9.

收集濾液(萃取脂肪的溶液)。10.

測(cè)定濾液的折射率。目前六十六頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)計(jì)算脂肪%=100Vd(n1－n2)/W(n2－n)其中：V：溴萘的毫升數(shù)

d：脂肪密度(濃度)n：脂肪的折射率

n1：溴萘的折射率

n2：萃取液的折射率

W：樣品的重量目前六十七頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)儀器分析法低分辨率NMR法X射線吸收法

介電常數(shù)測(cè)定法

紅外光譜測(cè)定法

超聲波法

比色分析法

密度測(cè)定法

FOSS-LET法

MILKO-TESTER法

目前六十八頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)低分辨率NMR法NMR法可用于測(cè)定食品中脂肪和油。有二種NMR法可用：時(shí)域低分辨率NMR(有時(shí)又稱(chēng)為脈沖NMR)和頻域NMR(又稱(chēng)NMR光譜)。NMR法的最大優(yōu)勢(shì)是不破壞樣品，同時(shí)也不要求樣品是透明的。NMR法被用來(lái)分析奶油、麥淇淋、起穌油、巧克力、油籽、肉制品、奶粉、奶酪、面粉等食品的脂肪含量，目前六十九頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于一點(diǎn)低分辨率NMR法NMR法的一個(gè)分析示例。該示例中只能測(cè)定液態(tài)脂肪的信號(hào)強(qiáng)度。而由于油籽中