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關(guān)于熒光PCR檢測原理第1頁,課件共17頁,創(chuàng)作于2023年2月一、熒光信號的檢測第2頁,課件共17頁,創(chuàng)作于2023年2月
熒光標(biāo)記信號的產(chǎn)生
熒光標(biāo)記基團在某波長的激發(fā)光刺激下,產(chǎn)生一個更長波長的發(fā)射光第3頁,課件共17頁,創(chuàng)作于2023年2月FRET?
某熒光標(biāo)記基團在激發(fā)光刺激下生成某波長的發(fā)射光,當(dāng)另一屏蔽基團與其距離合適時,原發(fā)射光將會被屏蔽基團所吸收,并轉(zhuǎn)化為其他波長的發(fā)射光或熱能,稱之為FRET。第4頁,課件共17頁,創(chuàng)作于2023年2月熒光信號熒光染料SYBRgreen——特異性結(jié)合雙鏈,釋放熒光信號特異性熒光探針Taqman雙熒光標(biāo)記探針molecularBeacon熒光標(biāo)記探針熒光標(biāo)記雜交雙探針第5頁,課件共17頁,創(chuàng)作于2023年2月Taqman特異性熒光雙標(biāo)記探針Taqman5’→3’外切酶活性第6頁,課件共17頁,創(chuàng)作于2023年2月Molecular
beacon第7頁,課件共17頁,創(chuàng)作于2023年2月熒光標(biāo)記雜交雙探針第8頁,課件共17頁,創(chuàng)作于2023年2月二、典型的熒光PCR擴增曲線陽性標(biāo)本擴增曲線陰性標(biāo)本擴增曲線第9頁,課件共17頁,創(chuàng)作于2023年2月Bio-radiCycler擴增曲線第10頁,課件共17頁,創(chuàng)作于2023年2月PE-5700擴增曲線第11頁,課件共17頁,創(chuàng)作于2023年2月PE-7700擴增曲線第12頁,課件共17頁,創(chuàng)作于2023年2月RocheLightCycler擴增曲線第13頁,課件共17頁,創(chuàng)作于2023年2月三、Ct值樣本擴增曲線與閾值線交叉點的循環(huán)數(shù)Ct值第14頁,課件共17頁,創(chuàng)作于2023年2月四、熒光PCR定量的原理第15頁,課件共17頁,創(chuàng)作于2023年2月Unknown未知樣本拷貝數(shù)的確定第16頁,課
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