細菌培養(yǎng)及報告單解讀

關于細菌培養(yǎng)及報告單解讀第1頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月抗生素的概述、作用及要素抗生素的概述抗生素大家實際上不陌生了，嚴格意義上講，抗生素就是在非常低濃度下對所有的生命物質有抑制和殺滅作用的藥物?？股氐淖饔脷绺腥疚覀兊奈⑸?，目的是把病原體殺滅，控制疾病，以最終治療疾病抗生素的3要素

1選藥2用量3用法

第2頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月2010年我院標本的送檢率及陽性率

2010年統(tǒng)計顯示，標本送檢率20%，陽性檢出率30%，

血培養(yǎng)陽性檢出率10%以上，呼吸道標本苛養(yǎng)菌的分離率5%以上。標本類型全年送檢量（人次）全年陽性檢出量（人次）陽性檢出百分比痰液10811375934.77%尿液136053739.48%各種分泌物及導管尖端139375238.50%靜脈血7452108714.58%腦脊液、骨髓135821615.90無菌體液51011322.15%第3頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月

正確采集標本

醫(yī)學實驗中心微生物組在保證檢驗質量的工作中，堅持不斷的持續(xù)改進，優(yōu)化操作流程。從標本接收到及時查對，選擇正確的培養(yǎng)基、按要求接種、培養(yǎng)、分純，儀器鑒定及藥敏試驗。經儀器鑒定到種的細菌結果經組內有經驗的人員判斷結果，發(fā)出最終報告（準確率在90%以上）。因細菌生長需要足夠時間，故微生物組培養(yǎng)加藥敏試驗所需時間較長，因此一份合格的標本對微生物來說顯得尤為重要，高質量的標本是質量保證的前提，只有實驗室收到符合要求的標本，才能保證后續(xù)的培養(yǎng)鑒定及藥敏檢測結果的準確性，時效性。如何正確采集各類標本呢？第4頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月痰液用溫開水清洗或漱口去除口腔表面菌從肺深部咳出痰液，采集到無菌容器內采集量：無菌容器＞1mL送檢要求：≤2h常溫對于不能自主留取標本的患者，應經抽吸獲得一天中僅需送檢1次，無需多次重復送檢相同標本用于檢查結核分枝桿菌時，為了提高陽性率，應收集24h痰液第5頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月尿液在未使用抗生素之前采集標本，注意避免消毒劑污染標本最好留取早晨清潔中端尿，采集量：無菌管≥3mL送檢要求:≤2h常溫需導尿的病人：采集前用70%異丙基乙醇消毒導管采集部位長機采集無菌尿液5-10mL標本不能直接從導尿袋放出，易孳生污染菌細菌一天中僅需送檢1次，無需多次重復送檢相同標本結核分枝桿菌集菌檢查：留取24h尿液，取沉淀部分送檢。第6頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月糞便挑取膿血、粘液部分的糞便2～3g置大便于專用無菌培養(yǎng)容器內，如為稀水便，可直接收集1～2mL于專用培養(yǎng)杯中，蓋好塞子，及時送檢。試管中不可混入尿液等異物及其它化學藥品。若做厭氧菌培養(yǎng)則領取專用厭氧拭子由肛門插入約6～7cm，輕輕旋動取出大便少許，放回厭氧拭子培養(yǎng)試管中，蓋好塞子，滅菌封口送檢。標本需1h內送檢，操作中應嚴格執(zhí)行無菌技術第7頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月靜脈血、腦脊液、骨髓培養(yǎng)瓶的消毒：用70%異丙基乙醇消毒橡膠塞30s靜脈穿刺消毒：嚴格按照皮膚消毒步驟操作（酒精-碘酊-酒精）。血液培養(yǎng)須特別注意消毒，因許多微生物，尤其葡萄球菌屬通常存在皮膚表面或近表層處，易造成污染。天氣寒冷時要注意腦脊液標本應在保溫條件下送檢，以免病原菌死亡，送檢要求：≤1h常溫禁止冷藏血培養(yǎng)的采樣時間：在寒戰(zhàn)出現時或發(fā)熱初期采集血培養(yǎng)最佳建議從不同部位采2-3套（一套為1瓶需氧+1瓶厭氧血培養(yǎng)瓶）如不能立即送檢，應置于室溫，禁止放入冰箱。血培養(yǎng)專用瓶成人：8-10mL/瓶；嬰幼兒：1-5mL/瓶第8頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月無菌體液（穿刺液、心包液、胸水、腹水、關節(jié)液等）注意徹底消毒，因許多微生物，尤其葡萄球菌屬通常存在皮膚表面或近表層處，易造成污染盡可能留取多量標本采集時間應在患者用抗菌藥物之前，或停止用藥1～2日后，或下次用藥前，或藥物濃度較低時抽取，胸水及腹水一般抽取5～10mL，心包液、關節(jié)液一般抽取1～5mL，2、疑為厭氧菌感染時，取材后立即將注射器內空氣排空，無菌操作注入3～5mL穿刺液于厭氧血培養(yǎng)瓶內，及時送檢第9頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月膿汁及病灶分泌物封閉性膿腫：先用碘酒或碘伏消毒患者病灶局部的皮膚或粘膜表面，再用75％的酒精脫碘，以無菌干燥注射器穿刺抽取，將采集的膿汁無菌操作注入5～10mL滅菌培養(yǎng)管中，如懷疑是厭氧菌應領取專用厭氧拭子做厭氧培養(yǎng)并建議同時做一般細菌涂片鏡檢開放性膿腫和病灶分泌物：對采樣部位，應先用滅菌生理鹽水洗凈病灶表面的污染物，對表皮、粘膜應充分消毒，采集病灶部位膿性分泌物于滅菌培養(yǎng)管或滅菌棉拭子試管內，立即送檢。第10頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月實驗室選擇抗生素的依據選用藥物根據衛(wèi)生部規(guī)定使用的標準，依據CLSI（美國臨床實驗室標準化委員會）標準來選擇。微生物組現采用兩種藥敏檢測方法：

MIC法（定量藥敏）KB法（定性藥敏）。住院病人采用上機MIC法，商品化的藥敏試卡，卡中所包含藥物的種類的是固定的，實驗室會定期更換藥敏試卡，在選擇試卡的過程中充分與藥劑科共同溝通，盡可能選擇我院藥劑科能提供的抗生素。現在臨床需要實驗室提供臨床常用藥物敏感試驗如“頭孢硫醚“等這類藥物但CLSI無判斷標準，國內也無相應的藥敏紙片，雖臨床有需求，實驗室無法提供藥敏實驗。同時有些分離鑒定出的細菌，對某些類抗菌藥物是天然耐藥的（如腸球菌對頭孢類抗生素天然耐藥），實驗室藥敏試驗則不考慮這類藥物。第11頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月微生物組現提供給臨床的2組藥敏卡AST-GN04

革蘭氏陰性藥敏卡Amikacin 阿米卡星Ampicillin 氨芐西林Ampicillin/Sulbactam氨芐西林/舒巴坦Aztreonam 氨曲南Cefazolin 頭孢唑啉Cefepime 頭孢吡肟Cefotetan 頭孢替坦Ceftazidime 頭孢他啶Ceftriaxone 頭孢曲松Cefuroxime 頭孢呋辛Ciprofloxacin 環(huán)丙沙星Gentamicin 慶大霉素Imipenem 亞胺培南Levofloxacin 左氧氟沙星Nitrofurantoin 呋喃妥因Piperacillin 哌拉西林Piperacillin/Tazobactam哌拉西林+他唑巴坦Ticarcillin/ClavulanicAcid替卡西林/棒酸Tobramycin 妥布霉素Trimethoprin/Sulfa復方新諾明AST-P535(22067)葡萄球菌、腸球菌、B組鏈球菌Ampicillin 氨芐西林Ampicillin/Sulbactam氨芐西林/舒巴坦BenzyPenicillin青霉素GCiprofloxacin 環(huán)丙沙星Clindamycin 氯潔霉素Erythromycin 紅霉素Fosfomycin磷霉素FusidicAcid呋西地酸Gentamicin慶大霉素GentamicinHighlevel高濃度慶大霉素(協(xié)同)Imipenem 亞胺培南Linezolid(Zyvox)利奈唑烷Moxifloxacin莫西沙星OxacillinMICNCCLS苯唑西林OxacillinBreakpoint苯唑西林臨界點Quinupristin/Dalfoprsifin喹努普汀/達福普汀Rifampin利福平StreptomycinHighLevel高濃度鏈霉素(協(xié)同)Teicoplarin替考拉寧Tetracycline 四環(huán)素Trimethoprin/Sulfamethoxazole復方新諾明Vancomycin 萬古霉素第12頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月藥敏卡的選擇依據含蓋各類抗生素以及抗生素的不同代數（包括青霉素類、頭孢類、碳青霉烯類、氨基糖苷類、氟喹諾酮類、單環(huán)內酰胺類及葉酸代謝途徑抑制劑等）大部分為臨床常用藥物滿足臨床約90%的用藥需求代表藥的耐藥性可預示同類抗生素的耐藥性第13頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月特殊細菌的藥敏選擇嗜麥芽窄食單胞菌其具有復雜的耐藥機制，外膜通透性低，對多種抗生素不易滲透，可產生多種B-內酰胺酶，如青霉素酶，頭孢菌素L2酶以及金屬鋅酶，因此對B-內酰胺類，氨基糖苷類，喹諾酮類抗生素耐藥，同時對碳青酶烯類抗生素也耐藥由于嗜麥芽窄食單胞菌的耐藥性較強，依據CLSI選擇K-B法藥敏實驗，包括四環(huán)素類（米諾環(huán)素)、氟喹諾酮類（左氧氟沙星）、葉酸代謝途徑抑制劑（復方新諾明）這3種藥報告臨床第14頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月肺炎鏈球菌從腦脊液中分離的肺炎鏈球菌應測試青霉素、頭孢噻肟或頭孢曲松、美羅培南及萬古霉素的MIC值對于非膜炎分離株，青霉素MIC能預報菌株對其他β－內酰胺酶類敏感性的藥物如：青霉素MICs<=0.06ug/ml（或苯唑西林抑菌圈直徑>=20mm）提示分離菌株對氨芐西林（口服或注射）、氨芐西林/舒巴坦、頭孢克洛、頭孢地尼、頭孢托侖、頭孢泊肟、頭孢丙烯、頭孢唑肟、頭孢呋辛、亞胺培南、氯碳頭孢和美羅培南敏感。青霉素MICs<=2ug/ml提示對一下藥物敏感：阿莫西林、阿莫西林/克拉維酸、頭孢吡肟、頭孢噻肟、頭孢曲松和厄他培南第15頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月鮑曼不動桿菌鮑曼不動桿菌為非發(fā)酵革蘭陰性桿菌，該菌是醫(yī)院感染的重要病原菌，對常用抗生素的耐藥率有逐年增加的趨勢，Ab約占臨床分離的不動桿菌的70%以上。Ab對第三代和第四代頭孢菌素的耐藥率已達63.0%～89.9%。對三種氨基糖苷類（慶大酶素、奈替米星、妥布霉素）和環(huán)丙沙星的耐藥率菌達96.3%。我院目前的絕大多數菌株對亞胺培南、美羅培南等也產生了不同程度的耐藥實驗室結合臨床目前治療措施，追加了頭孢派酮/舒巴坦、多黏菌素B、米諾環(huán)素及亞胺培南的K-B法藥敏對儀器報告結果進行補充以滿足臨床需求由于CLSI中對頭孢哌酮/舒巴坦及多粘菌素B無判斷指標，實驗室只報告抑菌圈直徑未標注敏感與耐藥。第16頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月靜脈血、腦脊液、骨髓標本的

處理流程第17頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月陰性結果報告血培養(yǎng)如培養(yǎng)至第5天，未見細菌生長，方可發(fā)出陰性報告，“經鑒定無細菌生長”陽性結果報告報告通常分為三級；一級報告陽性報警血培養(yǎng)瓶應進行涂片革蘭染色，將涂片染色結果在實驗室信息系統(tǒng)（LIS）“預報告處理”欄處報告危急值。電話通知臨床聯(lián)系人，在“備注”欄記錄“XXX培養(yǎng)陽性”，“革蘭XX菌”，與臨床聯(lián)系人姓名和檢驗者姓名