細(xì)胞增殖與細(xì)胞周期

關(guān)于細(xì)胞增殖與細(xì)胞周期第1頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月細(xì)胞分裂第2頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月細(xì)胞分裂的類型

無絲分裂(amitosis)有絲分裂(mitosis)減數(shù)分裂(meiosis)第3頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月無絲分裂又稱直接分裂，由R.Remark（1841）首次發(fā)現(xiàn)于雞胚血細(xì)胞。表現(xiàn)為細(xì)胞核伸長，從中部縊縮，然后細(xì)胞質(zhì)分裂，其間不涉及紡錘體形成及染色體變化。無絲分裂可存在原核生物及高等動植物(植物的胚乳細(xì)胞、動物的胎膜，間充組織及肌肉細(xì)胞等)。第4頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月無絲分裂第5頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月有絲分裂

真核生物細(xì)胞分裂的基本形式,也稱間接分裂。特點(diǎn):1,出現(xiàn)由許多紡錘絲構(gòu)成的紡錘體，

2,染色質(zhì)集縮成棒狀的染色體,

3,分裂中期形成臨時(shí)性細(xì)胞結(jié)構(gòu)：有絲分裂器

4,子染色體被平均分配到子細(xì)胞，

5,該分裂方式普遍見于高等動植物。

第6頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月有絲分裂分期為了便于描述,人為地劃分為六個(gè)時(shí)期：①間期（interphase）；②前期(prophase)；③前中期(premetaphase)；④中期(metaphase)；⑤后期(anaphase)；⑥末期(telophase)。

其中間期包括G1期、S期和G2期，主要進(jìn)行DNA復(fù)制、中心體復(fù)制、細(xì)胞體積增大等準(zhǔn)備工作。第7頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月前期①染色質(zhì)凝縮②分裂極確立與紡錘體開始形成:分裂極的確立即細(xì)胞分裂方向的確定，由紡錘體形成的方向決定，與中心粒（centriole）的活性有關(guān)③核仁解體④核膜消失第8頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月第9頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月Twocentrosomes,andtheirformingradialarraysofastralmicrotubules

separatingonthesurfaceofanearlyprophasenewtlungcellnucleus.第10頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月中心粒與中心體中心粒在細(xì)胞周期中ＤＮＡ合成期（S期）已完成復(fù)制，在前期移向兩極，兩對中心粒之間形成紡錘體微管，核膜解體時(shí)，中心粒已到達(dá)兩極，并形成紡錘體；中心粒由9組3聯(lián)微管構(gòu)成；兩個(gè)相互垂直的中心粒構(gòu)成中心體中心體（centrosome）周圍是一些無定形或纖維形、高電子密度的物質(zhì)，叫做外中心粒物質(zhì)（PCM，pericentriolarmaterial）第11頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月外中心粒物質(zhì)中心體結(jié)構(gòu)模型

第12頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月前中期

核膜解體到染色體排列到赤道面(equatorialplane)上

第13頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月中期

1.染色體排列到赤道面上；

2.紡錘體＋中心粒＋染色體－－有絲分裂器（臨時(shí)性細(xì)胞結(jié)構(gòu)）

第14頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月有絲分裂器第15頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月紡錘體微管紡錘體的三種微管結(jié)構(gòu)：

–①極體微管（polarmt）兩極間的微管，在紡錘體中部重疊，重疊部位結(jié)合有分子馬達(dá)。

–②著絲點(diǎn)微管（kinetochoremt）:與染色質(zhì)的著絲粒相連,是從著絲點(diǎn)到另一極的微管；

–③星體微管（astralmt），由中心粒放射出來的微管。第16頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月紡錘體微管星體微管著絲點(diǎn)微管極體微管第17頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月著絲粒(centromere)位于染色體主縊痕的染色質(zhì)部位（大多數(shù)為異染色質(zhì)）；染色體中的一部分特異的核苷酸順序；DNA順序是高度重復(fù)的,富含A—T堿基；其上有特異的著絲點(diǎn)蛋白與之相結(jié)合；有絲分裂中期以前,兩條染色單體靠著絲粒相連,后期開始時(shí),著絲粒的分離－－兩條姐妹染色單體分開。第18頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月著絲粒-動粒復(fù)合體紡錘絲微管束通過兩個(gè)三層盤狀結(jié)構(gòu),即動粒(Kinetochore)與著絲粒染色質(zhì)相結(jié)合動粒內(nèi)層緊貼著絲粒異染色質(zhì),外層主要與微管束相聯(lián)由著絲粒和動粒共同組成的功能單位稱著絲粒-動粒復(fù)合體(Centromere-kinetochorecomplex,CKC).第19頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月著絲粒-動粒復(fù)合體結(jié)構(gòu)

動粒結(jié)構(gòu)域

中心結(jié)構(gòu)域

配對結(jié)構(gòu)域

衛(wèi)星DNA染色單體１染色單體２馬達(dá)蛋白

馬達(dá)蛋白

動粒動粒第20頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月后期

姊妹染色體單體分開并移向兩極第21頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月末期

從子染色體到達(dá)兩極，至形成兩個(gè)新細(xì)胞為止的時(shí)期。涉及子核的形成和胞質(zhì)分裂兩個(gè)方面。第22頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月末期子核的形成與胞質(zhì)分裂

末期子核的形成，經(jīng)歷了染色體解聚縮，核仁出現(xiàn)和核膜重新形成。核分裂與胞質(zhì)分裂（cytokinesis）是相繼發(fā)生的，屬于兩個(gè)分離的過程.細(xì)胞的胞質(zhì)分裂是通過胞質(zhì)收縮環(huán)的收縮實(shí)現(xiàn);收縮環(huán)處于細(xì)胞質(zhì)的周邊,由微絲(大量平行排列的肌動蛋白)組成.第23頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月第24頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月有絲分裂期細(xì)胞發(fā)生分裂障礙

有絲分裂期細(xì)胞發(fā)生分裂障礙有生理和病理兩種情況:

病理狀態(tài)下分裂障礙的細(xì)胞有可能觸發(fā)有絲分裂危象(mitoticcatastrophe);有絲分裂危象是由異常的有絲分裂所導(dǎo)致的細(xì)胞死亡的一種形式，細(xì)胞可呈多倍體、非整倍體，可出現(xiàn)多核（奇數(shù)核）、巨核，胞漿移動障礙，額外的中心體及微核形成等.

生理狀態(tài)的分裂障礙大多為胞質(zhì)分裂滯后或無胞質(zhì)分裂.如大多數(shù)昆蟲的卵，核可進(jìn)行多次分裂而無胞質(zhì)分裂，某些藻類的多核細(xì)胞可長達(dá)數(shù)尺，以后胞質(zhì)才分裂形成單核細(xì)胞。另外,許多真核生物的血細(xì)胞也有上述特點(diǎn).第25頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月減數(shù)分裂（Meiosis）特點(diǎn)：DNA復(fù)制一次，細(xì)胞連續(xù)分裂兩次，形成單倍體的精子和卵子，通過受精作用又恢復(fù)二倍體分裂過程中同源染色體間發(fā)生交換，使配子的遺傳多樣化，增加了后代的適應(yīng)性，是保證生物物種染色體數(shù)目穩(wěn)定的機(jī)制，也是物種適應(yīng)環(huán)境變化不斷進(jìn)化的機(jī)制。第26頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月減數(shù)分裂前期I減數(shù)分裂的特殊過程主要發(fā)生在前期I該期人為劃分為5個(gè)時(shí)期：①細(xì)線期（leptotene）②偶線期（zygotene）③粗線期（pachytene）④雙線期（diplotene）⑤終變期（diakinesis）

第27頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月細(xì)線期染色體呈細(xì)線狀，持續(xù)時(shí)間最長，占減數(shù)分裂周期的40%。細(xì)線期雖然染色體已經(jīng)復(fù)制，但光鏡下分辨不出兩條染色單體。第28頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月偶線期同源染色體配對的時(shí)期，這種配對稱為聯(lián)會(synapsis)；這一時(shí)期同源染色體間形成聯(lián)會復(fù)合體(synaptonemalcomplex，SC)；在光鏡下可以看到兩條結(jié)合在一起的染色體，稱為二價(jià)體（bivalent）；每一對同源染色體都經(jīng)過復(fù)制，含四個(gè)染色單體，所以又稱為四分體（tetrad）。

第29頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月偶線期圖聯(lián)會復(fù)合體聯(lián)會復(fù)合體第30頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月聯(lián)會復(fù)合體（SC）

由兩條同源染色體沿縱軸形成，外觀呈梯子狀；能夠幫助交換的完成：粗線期SC上有重組節(jié)（與SC寬度相近，為電子致密球狀小體），是交換發(fā)生（DNA重組）的部位；主要由堿性蛋白質(zhì)和RNA組成，并含有少量DNA；形成于偶線期，成熟于粗線期，消失于雙線期．第31頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月聯(lián)會復(fù)合體姐妹染色單體１和２（父本的）姐妹染色單體１和２（母本的）中央成分側(cè)體第32頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月粗線期染色體變短，結(jié)合緊密，光鏡下只在局部可以區(qū)分同源染色體，同源染色體的非姊妹染色單體之間存在交叉（片斷交換）；聯(lián)會復(fù)合體上的重組節(jié)與DNA的重組有關(guān)。第33頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月粗線期圖第34頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月雙線期聯(lián)會的同源染色體相互排斥、開始分離，但在交叉點(diǎn)(chiasma)上還保持著聯(lián)系－交叉端化(terminalization)聯(lián)會復(fù)合體開始消失

二價(jià)體（四分體）第35頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月終變期二價(jià)體顯著變短，并向核周邊移動，在核內(nèi)均勻散開；交叉端化過程發(fā)展－交叉數(shù)目減少，多只有一～二個(gè)交叉；核仁開始消失；核被膜解體。

第36頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月減數(shù)分裂分期中期I后期I

–二價(jià)體的兩條同源染色體分開，分別向兩極移動

–同源染色體隨機(jī)分向兩極，染色體重組，人類染色體重組概率有2的23次方個(gè)末期I減數(shù)分裂間期減數(shù)分裂II

分為前、中、后、末四個(gè)四期，與有絲分裂相似結(jié)果：一個(gè)精母細(xì)胞形成4個(gè)精子；一個(gè)卵母細(xì)胞形成１個(gè)卵子及2-3個(gè)極體。第37頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月減數(shù)分裂模式圖一第38頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月減數(shù)分裂模式圖二減數(shù)分裂前的細(xì)胞父本的母本的染色單體

聯(lián)會第39頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月減數(shù)分裂后ＤＮＡ重組模式第40頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月Chromosomerecombination１

Minimumnumberofgametetypes=2n,Inhumans,n=23

第41頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月Chromosomerecombination２

第42頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月有絲分裂與減數(shù)分裂的比較

減數(shù)分裂前期有同源染色體配對（聯(lián)會）；減數(shù)分裂遺傳物質(zhì)交換（非姐妹染色單體片段交換）；減數(shù)分裂中期后染色體獨(dú)立分離，而有絲分裂則著絲點(diǎn)裂開后均衡分向兩極；減數(shù)分裂完成后染色體數(shù)減半；分裂中期著絲點(diǎn)在赤道板排列有差異：減數(shù)分裂中同源染色體的著絲點(diǎn)分別排列于赤道板兩側(cè)，而有絲分裂時(shí)則整齊地排列在赤道板上第43頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月細(xì)胞周期第44頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月2001年諾貝爾生理醫(yī)學(xué)獎獲獎?wù)撸◤淖笾劣遥㎜elandHartwell、TimHunt和PaulNurse。2001的諾貝爾生理醫(yī)學(xué)獎授予了3位研究細(xì)胞周期并取得卓越成就的科學(xué)家第45頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月概念及分期

概念：由細(xì)胞分裂結(jié)束到下一次細(xì)胞分裂結(jié)束所經(jīng)歷的過程。分期：

G1期(gap1)，指從有絲分裂完成到DNA復(fù)制之前的間隙時(shí)間。

S期(synthesisphase)，指DNA復(fù)制的時(shí)期。

G2期(gap2)，指DNA復(fù)制完成到有絲分裂開始之前的一段時(shí)間。

M期又稱D期(mitosisordivision)，細(xì)胞分裂開始到結(jié)束。第46頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月EucaryoticCellCycle

第47頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月G1期細(xì)胞生長期，主要進(jìn)行RNA和蛋白質(zhì)的生物合成,為S期的DNA合成做準(zhǔn)備,特別是合成DNA的前身物質(zhì)、DNA聚合酶和合成DNA所必不可少的其他酶系,以及儲備能量；整個(gè)細(xì)胞周期中時(shí)間變化最大，各種細(xì)胞的周期時(shí)間的不同，其主要差別在于G1期長短不一

第48頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月S期從G1期進(jìn)入S期是細(xì)胞增殖的關(guān)鍵時(shí)刻，與S期激活因子(SPF)有關(guān)；S期最主要的特征是DNA的合成，進(jìn)行DNA分子的復(fù)制，且其合成與組蛋白合成強(qiáng)度同步；DNA復(fù)制具有嚴(yán)格的程序性控制通常只要DNA的合成一開始,細(xì)胞增殖活動就會進(jìn)行下去,直到分成兩個(gè)子細(xì)胞第49頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月G2期

G2期又稱“有絲分裂準(zhǔn)備期”,主要為后面的M期做準(zhǔn)備；DNA的合成已終止,仍有RNA和蛋白質(zhì)的合成,但其合成量逐漸減少:1.微管蛋白的合成,為M期紡錘體微管的組裝提供原料

2.M期促進(jìn)因子(MPF)的活化第50頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月M期細(xì)胞周期中占時(shí)最短有絲分裂期是一個(gè)連續(xù)的過程；細(xì)胞有極明顯的形態(tài)變化：

1.染色質(zhì)濃縮成染色體

2.有絲分裂器形成

3.S期復(fù)制的兩套DNA分子均分到兩個(gè)子細(xì)胞中第51頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月細(xì)胞周期室－cellcyclecompartment除了DNA含量變化的因素外，決定細(xì)胞周期過程的因素還應(yīng)考慮：RNA及染色質(zhì)凝集程度等根據(jù)上述因素（物質(zhì)條件）的不同，處于G1、S、G2期的細(xì)胞均可以分別處于增殖活性、靜止或分化等狀態(tài)；例如RNA及觸發(fā)蛋白的含量可決定G1期細(xì)胞是否能由G1A態(tài)進(jìn)入G1B態(tài)（增殖活性狀態(tài)），即是否能繼續(xù)進(jìn)行增殖Zynkiewicz在上述理論的基礎(chǔ)上提出：細(xì)胞周期室的概念．第52頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月細(xì)胞周期室G1DG0G1AG1B第53頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月細(xì)胞周期調(diào)控–---

cyclins-CDKs-CKIs系統(tǒng)第54頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月細(xì)胞周期的調(diào)控因子

cyclin:細(xì)胞周期蛋白，CDK：周期蛋白依賴性激酶,cyclin與CDK結(jié)合形成激酶復(fù)合體,cyclin為調(diào)節(jié)亞基,CDK為催化亞基CKI：CDK激酶抑制物,CDK的負(fù)調(diào)節(jié)因子，可使CDK失活第55頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月細(xì)胞周期蛋白(cyclin)第56頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月種類:高等動物的cyclin分為A1A2B1B2B3CD1D2D3E1E2FGH特點(diǎn)：（1）均含有一段相當(dāng)保守的氨基酸序列---周期蛋白框（Cyclinbox）,介導(dǎo)周期蛋白與CDK結(jié)合。不同的周期蛋白框識別不同的CDK，組成不同的周期蛋白－CDK復(fù)合體，表現(xiàn)出不同CDK激酶活性。（2）M周期蛋白的分子結(jié)構(gòu)含有另一特點(diǎn)，在近N端含有一段有9個(gè)氨基酸組成的特殊序列，成為破壞框（destructionboxRXXLGX1X1N（x代表可變性氨基酸））參與泛素介導(dǎo)的周期蛋白A和周期蛋白B的降解。（3）G1周期蛋白分子中不含破壞框，但其C端含有一段特殊的PEST序列（Pro-Glu-Ser-Thr,與其穩(wěn)定性有關(guān)）第57頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月細(xì)胞周期蛋白的降解盒與降解途徑

第58頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月蛋白酶體(Proteasome)的結(jié)構(gòu)示意圖第59頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月CDK（cyclin—dependentkinase）

第60頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月種類:

cdc2(CDK1)，CDK2，CDK3，CDK4…CDK8特點(diǎn):(1)在整個(gè)細(xì)胞周期里，CDK的量保持在一個(gè)穩(wěn)定的水平，但在單獨(dú)存在時(shí)沒有酶活性；(2)CDK只有與周期蛋白結(jié)合后才能發(fā)揮蛋白激酶的功能;(3)由于周期蛋白的合成與降解，導(dǎo)致CDK蛋白激酶活性在細(xì)胞周期各個(gè)時(shí)相內(nèi)的轉(zhuǎn)換。

第61頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月不同類型的周期蛋白

激酶復(fù)合體脊椎動物第62頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月cyclin－CDK對細(xì)胞周期進(jìn)程的調(diào)控作用第63頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月生長因子刺激細(xì)胞G1期cyclinD表達(dá)，與CDK4、CDK6結(jié)合下游的蛋白質(zhì)如Rb磷酸化磷酸化的Rb釋放出轉(zhuǎn)錄因子E2F促進(jìn)許多基因的轉(zhuǎn)錄，如編碼cyclinE、A和CDK1的基因

（一）第64頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月CyclinD與CDK結(jié)合使Rb釋放結(jié)合的轉(zhuǎn)錄因子E2F

第65頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月（二）G1-S期，cyclinE與CDK2結(jié)合，促進(jìn)細(xì)胞通過G1/S限制點(diǎn)而進(jìn)入S期；細(xì)胞內(nèi)注射CyclinE抗體能使細(xì)胞停滯于G1期－細(xì)胞進(jìn)入S期需要CyclinE的參與；將CyclinA的抗體注射到胞內(nèi)－能抑制細(xì)胞的DNA合成－推測CyclinA為DNA復(fù)制所必需。第66頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月（三）G2-M期，cyclinA、cyclinB與CDK1結(jié)合結(jié)合后CDK1可使底物蛋白磷酸化１．組蛋白H1磷酸化－染色體凝縮２．核纖層蛋白磷酸化－核膜解體等下游細(xì)胞周期事件

第67頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月（四）Ｍ期中期，MPF活性達(dá)到最高通過一種未知的途徑，激活后期促進(jìn)因子APC泛素連接在cyclinB上cyclinB被蛋白酶體（proteasome）降解一個(gè)細(xì)胞周期完成第68頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月Cyclin-dependentkinaseinhibitors，CKI

第69頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月種類及特點(diǎn)①Ink4：如P16ink4a、P15ink4b、P18ink4c、P19ink4d，特異性抑制cdk4·cyclinD1、cdk6·cyclinD1復(fù)合物②Kip：包括P21cip1、P27kip1、P57kip2等，能抑制大多數(shù)CDK的激酶活性，P21cip1還能與DNA聚合酶δ的輔助因子PCNA（proliferatingcellnuclearantigen）結(jié)合，直接抑制DNA的合成第70頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月P21cip1抑制CDK和PCNA(增殖細(xì)胞核抗原)DNA聚合酶δ的輔助因子

第71頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月細(xì)胞周期調(diào)控–---細(xì)胞周期檢驗(yàn)點(diǎn)

第72頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月細(xì)胞要分裂，必須正確復(fù)制DNA和達(dá)到一定的體積(獲得足夠物質(zhì)支持)；細(xì)胞周期的運(yùn)行，是在一系列稱為檢驗(yàn)點(diǎn)（checkpoint）的嚴(yán)格檢控下進(jìn)行的；當(dāng)DNA發(fā)生損傷，復(fù)制不完全或紡錘體形成不正常，細(xì)胞將不能通過檢驗(yàn)點(diǎn)，而使周期被阻斷;多種因素可以對檢驗(yàn)點(diǎn)進(jìn)行調(diào)控：例如作用于G1／S檢驗(yàn)點(diǎn)的抑素(S因子)可阻止細(xì)胞進(jìn)入S期；作用于G2／M檢驗(yàn)點(diǎn)的抑素(M因子)可阻止G2期細(xì)胞進(jìn)入M期第73頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月檢驗(yàn)點(diǎn)包括

1.G1/S檢驗(yàn)點(diǎn):在哺乳動物中稱R點(diǎn)(restrictionpoint)，控制細(xì)胞由靜止?fàn)顟B(tài)的G1進(jìn)入DNA合成期，相關(guān)的事件包括：DNA是否損傷？細(xì)胞外環(huán)境是否適宜？細(xì)胞體積是否足夠大？

2.S期檢驗(yàn)點(diǎn)：DNA復(fù)制是否完成？

3.G2/M檢驗(yàn)點(diǎn)：是決定細(xì)胞一分為二的控制點(diǎn)，相關(guān)的事件包括：DNA是否損傷？細(xì)胞體積是否足夠大？

4.中-后期檢驗(yàn)點(diǎn)（紡錘體組裝檢驗(yàn)點(diǎn)）：任何一個(gè)著絲點(diǎn)沒有正確連接到紡錘體上，都會抑制后期促進(jìn)因子(APC)的活性，引起細(xì)胞周期中斷。第74頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月細(xì)胞周期四個(gè)主要的檢驗(yàn)點(diǎn)

第75頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月細(xì)胞的類型（根據(jù)是否有R點(diǎn)限制）繼續(xù)增殖細(xì)胞：表皮生發(fā)層細(xì)胞、部分骨髓細(xì)胞暫不增殖細(xì)胞：但在適當(dāng)?shù)拇碳は驴芍匦逻M(jìn)入細(xì)胞周期，如淋巴細(xì)胞、肝、腎細(xì)胞等。不再增殖細(xì)胞：指不可逆地脫離細(xì)胞周期，不再分裂的細(xì)胞，又稱終端細(xì)胞，如神經(jīng)、肌肉、多形核細(xì)胞等第76頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月細(xì)胞周期的研究方法細(xì)胞同步化細(xì)胞周期調(diào)控研究方法3H-TdR摻入法標(biāo)記有絲分裂百分率法第77頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月細(xì)胞同步化(synchronization)處于細(xì)胞周期不同階段的細(xì)胞,共同進(jìn)入周期某一特定階段的過程分類:自然同步化人工同步化:選擇同步化誘導(dǎo)同步化兩者的結(jié)合第78頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月選擇同步化有絲分裂選擇法：M期細(xì)胞與培養(yǎng)皿的附著性低，振蕩脫離器壁收集。–優(yōu)點(diǎn)：操作簡單，同步化程度高，細(xì)胞不受藥物傷害。–缺點(diǎn)：獲得的細(xì)胞數(shù)量較少（分裂細(xì)胞約占1%～2%）

第79頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月誘導(dǎo)同步化

DNA合成阻斷法：DNA合成抑制劑可逆地抑制S期細(xì)胞DNA合成----細(xì)胞同步于S期。中期阻斷法秋水仙素等藥物--抑制紡錘體微管的聚合----細(xì)胞阻斷于有絲分裂中期。優(yōu)點(diǎn)是無非均衡生長現(xiàn)象，缺點(diǎn)是可逆性較差。第80頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月細(xì)胞周期調(diào)控研究方法免疫組化法:特異性抗體檢測細(xì)胞周期調(diào)控相關(guān)蛋白的表達(dá)顯微注射法:將需要研究的物質(zhì)注入周期特定階段的細(xì)胞,了解上述物質(zhì)在周期調(diào)控中的作用細(xì)胞融合:了解與細(xì)胞周期某一特定活動相關(guān)的調(diào)節(jié)因素,在時(shí)間及亞細(xì)胞水平的定位第81頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月標(biāo)記有絲分裂百分率法（percentagelabeledmitoses，PLM）一種常用的測定細(xì)胞周期時(shí)間的方法；原理：對測定細(xì)胞進(jìn)行脈沖標(biāo)記、定時(shí)取材、利用放射自顯影技術(shù)顯示標(biāo)記細(xì)胞，通過統(tǒng)計(jì)標(biāo)記有絲分裂細(xì)胞百分?jǐn)?shù)的辦法來測定細(xì)胞周期。第82頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月3H-TdR摻入法細(xì)胞用含3H-TdR的培養(yǎng)基培養(yǎng),用放射自顯影方法分析細(xì)胞中銀粒量的多少及分布位置:1.推斷細(xì)胞周期各時(shí)相的動態(tài)變化

2.研究同步化的S期細(xì)胞DNA合成的動

態(tài)過程第83頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月細(xì)胞增殖(cellproliferation)概念:

細(xì)胞通過生長和分裂使細(xì)胞數(shù)目增加，使子細(xì)胞獲得和母細(xì)胞相同遺傳特性的過程．是細(xì)胞生命活動的基本特征之一．第84頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月調(diào)節(jié)：cyclins-CDKs-CKIs系統(tǒng)環(huán)境因子遺傳因子第85頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月環(huán)境因子抑素環(huán)核苷酸信使系統(tǒng)S期激活因子(SPF)和Ｍ期促進(jìn)因子(MPF)生長因子(多肽類物質(zhì))第86頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月生長因子對細(xì)胞增殖的調(diào)節(jié)作用第87頁，課件共98頁，創(chuàng)作于2023年2月生長因子PDGFG0期向G1期EGF