無菌操作接種前準(zhǔn)備

項目二無菌操作園藝技術(shù)專業(yè)教學(xué)資源庫模塊三組培基本操作技術(shù)12CONTENTS外植體選擇和處理項目二無菌操作3接種用品準(zhǔn)備無菌操作（一）滅菌與消毒的區(qū)別滅菌消毒滅菌：用理化方法殺死物體表面和孔隙內(nèi)一切微生物或生物體。消毒：殺死、消除或抑制部分微生物，使之不發(fā)生作用。思考：滅菌和消毒有何區(qū)別？

一、接種用品準(zhǔn)備園藝植物組織培養(yǎng)物理滅菌過濾滅菌熱力滅菌輻射滅菌干熱滅菌濕熱滅菌電離輻射紫外輻射超聲波微波灼燒滅菌煮沸滅菌烘烤滅菌高壓蒸汽滅菌（二）消毒方法園藝植物組織培養(yǎng)

一、接種用品準(zhǔn)備園藝植物組織培養(yǎng)

一、接種用品準(zhǔn)備園藝植物組織培養(yǎng)

一、接種用品準(zhǔn)備化學(xué)滅菌熏蒸滅菌噴霧滅菌涂擦滅菌浸泡滅菌5-8ml/m3甲醛+5g/m3

高錳酸鉀；或冰醋酸加熱。70%酒精；0.1-0.2%新潔爾滅。各種表面消毒劑同噴霧滅菌園藝植物組織培養(yǎng)

一、接種用品準(zhǔn)備園藝植物組織培養(yǎng)

一、接種用品準(zhǔn)備

1.環(huán)境滅菌◆培養(yǎng)室滅菌◆接種室滅菌（三）組培滅菌方法例舉園藝植物組織培養(yǎng)

一、接種用品準(zhǔn)備接種室滅菌方法超凈臺噴霧消毒:75%酒精。紫外燈照射：波長260nm，距離小于1.2m，20-30min。臭氧滅菌機：1-2h。熏蒸滅菌:5-8ml/m3甲醛+5g/m3高錳酸鉀；冰醋酸；1-3%高錳酸鉀或3%來蘇兒。園藝植物組織培養(yǎng)

一、接種用品準(zhǔn)備培養(yǎng)室滅菌方法新建培養(yǎng)室用前一定要徹底熏蒸1次。隔2-5d用洗衣粉水或3%來蘇水拖地1次，用0.1-1.0%高錳酸鉀液擦架1次。園藝植物組織培養(yǎng)

一、接種用品準(zhǔn)備

2.培養(yǎng)基滅菌高壓濕熱滅菌某些激素、維生素采用過濾滅菌園藝植物組織培養(yǎng)

一、接種用品準(zhǔn)備1.外桶2.鍋蓋3.安全閥4.排氣閥5.氣壓表6.內(nèi)桶7.排氣軟管8.支架手提式高壓濕熱滅菌鍋園藝植物組織培養(yǎng)

一、接種用品準(zhǔn)備手提式高壓濕熱滅菌方法裝鍋加水封蓋通電加熱排冷空氣升溫保壓斷電降壓出鍋冷卻園藝植物組織培養(yǎng)

一、接種用品準(zhǔn)備

自動高壓濕熱滅菌鍋電源水位指示燈溫度、壓力顯示窗溫度壓力設(shè)置鈕壓力表放汽閥園藝植物組織培養(yǎng)

一、接種用品準(zhǔn)備裝鍋加水封外蓋升溫排冷氣升溫保壓降壓出鍋冷卻

自動高壓濕熱滅菌方法通電設(shè)置參數(shù)封內(nèi)蓋園藝植物組織培養(yǎng)

一、接種用品準(zhǔn)備

培養(yǎng)基高壓滅菌所必需的最少時間

容器體積(mL)121℃滅菌所需最少時間(min)

20-5015

100030

250-50025

75-15020園藝植物組織培養(yǎng)

一、接種用品準(zhǔn)備

過濾滅菌濾膜?0.45um以下1.過濾器先滅菌，滅菌溫度不超過121℃。2.溶液先進行初濾(濾膜?0.65um)園藝植物組織培養(yǎng)

一、接種用品準(zhǔn)備3.培養(yǎng)用品及器具等的滅菌消毒方法玻璃器皿滅菌接種工具滅菌實驗服、口罩、濾紙滅菌物體表面滅菌玻璃器皿及量具的清洗消毒園藝植物組織培養(yǎng)

一、接種用品準(zhǔn)備玻璃器皿滅菌干熱滅菌：160-180℃,1.5-2.0h濕熱滅菌：121℃,20-40min接種前用酒精棉球擦試消毒，并灼燒滅菌。園藝植物組織培養(yǎng)

一、接種用品準(zhǔn)備接種工具滅菌用前干熱滅菌：160-180℃,1.5-2.0h用前濕熱滅菌：121℃,20-30min接種前用酒精棉球擦試，浸入95%酒精液中，并灼燒滅菌。園藝植物組織培養(yǎng)

一、接種用品準(zhǔn)備濕熱滅菌：121℃,20-30min實驗服滅菌后置于緩沖間或密封好。實驗服、口罩、濾紙滅菌園藝植物組織培養(yǎng)

一、接種用品準(zhǔn)備物體表面滅菌滅菌方式：噴霧、涂抹殺菌消毒劑：70%酒精；1-2%來蘇水；0.1-2%新潔爾滅；洗衣粉；吐溫-80應(yīng)用：桌面、墻面、雙手、材料表面園藝植物組織培養(yǎng)

一、接種用品準(zhǔn)備