2022年獸醫(yī)實驗室知識500點

獸醫(yī)實驗室人員慣用技術(shù)知識點(一)一、動物防疫法規(guī)

1、動物疫病防止控制機構(gòu)法定職責:

依法承擔動物疫病監(jiān)測、檢測、診斷、流行病學調(diào)查、疫情報告以及其她防止、控制等技術(shù)工作。

2、國內(nèi)對病原微生物實行分類管理,農(nóng)業(yè)部頒布了動物病原微生物分類名錄,將動物病原微生物分為4類,各類動物病原微生物劃分原則如下:

第一類病原微生物,是指可以引起人類或者動物非常嚴重疾病微生物,以及國內(nèi)尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅微生物。如口蹄疫病毒、高致病性禽流感病毒、牛海綿狀腦病病原。

第二類病原微生物,是指可以引起人類或者動物嚴重疾病,比較容易直接或者間接在人與人、動物與人、動物與動物間傳播微生物。如藍舌病病毒、兔病毒性出血癥病毒、炭疽芽孢桿菌、布氏桿菌

第三類病原微生物,是指可以引起人類或者動物疾病,但普通狀況下對人、動物或者環(huán)境不構(gòu)成嚴重危害,傳播風險有限,實驗室感染后很少引起嚴重疾病,并且具備有效治療和防止辦法微生物。如低致病性流感病毒、偽狂犬病病毒、結(jié)核分支桿菌

第四類病原微生物,是指在普通狀況下不會引起人類或者動物疾病微生物。

3、一類動物病原微生物有口蹄疫病毒、高致病性禽流感病毒、豬水泡病病毒、非洲豬瘟病毒、非洲馬瘟病毒、牛瘟病毒、小反芻獸疫病毒、牛傳染性胸膜肺炎絲狀支原體、牛海綿狀腦病病原、癢病病原。

4、二類動物病原微生物有豬瘟病毒、雞新城疫病毒、狂犬病病毒、綿羊痘／山羊痘病毒、藍舌病病毒、兔病毒性出血癥病毒、炭疽芽孢桿菌、布氏桿菌。

5、依照動物疫病對養(yǎng)殖業(yè)和人體健康危害限度,《動物防疫法》規(guī)定管理動物疫病分為3類.各類疫病界定是:

一類疫病,是指對人畜危害嚴重,需要采用緊急、嚴肅強制防止、控制、撲滅辦法;

二類疫病,是指可導致重大經(jīng)濟損失,需要采用嚴格控制,撲滅辦法,防止擴散;

三類疫病,是指常用多發(fā),也許導致重大經(jīng)濟損失,需要控制和凈化。

6、國內(nèi)一類動物疫病有17種:

口蹄疫、豬水泡病、豬瘟、非洲豬瘟、高致病性豬藍耳病、非洲馬瘟、牛瘟、牛傳染性胸膜肺炎、牛海綿狀腦病、癢病、藍舌病、小反芻獸疫、綿羊痘和山羊痘、高致病性禽流感、新城疫、鯉春病毒血癥、白斑綜合征。

7、國內(nèi)二類動物疫病重要有77種:

各種動物共患病(9種):狂犬病、布魯氏菌病、炭疽、偽狂犬病、魏氏梭菌病、副結(jié)核病、弓形蟲病、棘球蚴病、鉤端螺旋體病。

牛病(8種):牛結(jié)核病、牛傳染性鼻氣管炎、牛惡性卡她熱、牛白血病、牛出血性敗血病、牛梨形蟲病(牛焦蟲病)、牛錐蟲病、日本血吸蟲病。

綿羊和山羊病(2種):山羊關(guān)節(jié)炎腦炎、梅迪－維斯納病。

豬病(12種):豬繁殖與呼吸綜合癥(典型豬藍耳病)、豬乙型腦炎、豬細小病毒病、豬丹毒、豬肺疫、豬鏈球菌病、豬傳染性萎縮性鼻炎、豬支原體肺炎、旋毛蟲病、豬囊尾蚴病、豬圓環(huán)病毒病、副豬嗜血桿菌病。

馬病(5種):馬傳染性貧血、馬流行性淋巴管炎、馬鼻疽、馬巴貝斯蟲病、伊氏錐蟲病。

禽病(18種):雞傳染性喉氣管炎、雞傳染性支氣管炎、傳染性法氏囊病、馬立克氏病、產(chǎn)蛋下降綜合征、禽白血病、禽痘、鴨瘟、鴨病毒性肝炎、鴨漿膜炎、小鵝瘟、禽霍亂、雞白痢、禽傷寒、雞敗血支原體感染、雞球蟲病、低致病性禽流感、禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖癥。

兔病(4種):兔病毒性出血病、兔粘液瘤病、野兔熱、兔球蟲病。

蜜蜂病(2種):美洲幼蟲腐臭病、歐洲幼蟲腐臭病。

魚類病(11種):草魚出血病、傳染性脾腎壞死病、錦鯉皰疹病毒病、刺激隱核蟲病、淡水魚細菌性敗血癥、病毒性神經(jīng)壞死病、流行性造血器官壞死病、斑點叉尾鮰病毒病、傳染性造血器官壞死病、病毒性出血性敗血癥、流行性潰瘍綜合征。

甲殼類病(6種):桃拉綜合征、黃頭病、羅氏沼蝦白尾病、對蝦桿狀病毒病、傳染性皮下和造血器官壞死病、傳染性肌肉壞死病。

8、國內(nèi)三類動物疫病重要有71種:

各種動物共患病(8種):大腸桿菌病、李氏桿菌病、類鼻疽、放線菌病、肝片吸蟲病、絲蟲病、附紅細胞體病、Q熱。

牛病(5種):牛流行熱、牛病毒性腹瀉/粘膜病、牛生殖器彎曲桿菌病、毛滴蟲病、牛皮蠅蛆病。

綿羊和山羊病(6種):肺腺瘤病、傳染性膿皰、羊腸毒血癥、干酪性淋巴結(jié)炎、綿羊疥癬,綿羊地方性流產(chǎn)。

馬病(5種):馬流行性感冒、馬腺疫、馬鼻腔肺炎、潰瘍性淋巴管炎、馬媾疫。

豬病(4種):豬傳染性胃腸炎、豬流行性感冒、豬副傷寒、豬密螺旋體痢疾。

禽病(4種):雞病毒性關(guān)節(jié)炎、禽傳染性腦脊髓炎、傳染性鼻炎、禽結(jié)核病。蠶、蜂病(7種):蠶型多角體病、蠶白僵病、蜂螨病、瓦螨病、亮熱厲螨病、蜜蜂孢子蟲病、白堊病。

犬貓等動物病(7種):水貂阿留申病、水貂病毒性腸炎、犬瘟熱、犬細小病毒病、犬傳染性肝炎、貓泛白細胞減少癥、利什曼病。

魚類病(7種):鮰類腸敗血癥、遲緩愛德華氏菌病、小瓜蟲病、黏孢子蟲病、三代蟲病、指環(huán)蟲病、鏈球菌病。

甲殼類病(2種):河蟹顫抖病、斑節(jié)對蝦桿狀病毒病。

貝類病(6種):鮑膿皰病、鮑立克次體病、鮑病毒性死亡病、包納米蟲病、折光馬爾太蟲病、奧爾森派琴蟲病。

兩棲與爬行類病(2種):鱉腮腺炎病、蛙腦膜炎。

敗血金黃桿菌病(8種):大腸桿菌病、李氏桿菌病、類鼻疽、放線菌病、肝片吸蟲病、絲蟲病、附紅細胞體病、Q熱等。

9、農(nóng)業(yè)部發(fā)布人畜共患病名錄病種有26種:

牛海綿狀腦病、高致病性禽流感、狂犬病、炭疽、布魯氏菌病、弓形蟲病、棘球蚴病、鉤端螺旋體病、沙門氏菌病、牛結(jié)核病、日本血吸蟲病、豬乙型腦炎、豬Ⅱ型鏈球菌病、旋毛蟲病、豬囊尾蚴病、馬鼻疽、野兔熱、大腸桿菌病(O157:H7)、李氏桿菌病、類鼻疽、放線菌病、肝片吸蟲病、絲蟲病、Q熱、禽結(jié)核病、利什曼病。

10、國內(nèi)尚未發(fā)現(xiàn)動物疫病是指在其她國家和地區(qū)已經(jīng)發(fā)現(xiàn)、在國內(nèi)尚未發(fā)現(xiàn)發(fā)生過動物疫病。如瘋牛病、非洲豬瘟、非洲馬瘟等。

11、國內(nèi)已消滅動物疫病是指在國內(nèi)曾發(fā)生過、但已撲滅凈化動物疫病,如牛瘟、牛肺疫。

12、動物疫情由縣級以上人民政府獸醫(yī)主管部門認定;其中重大動物疫情由省、自治區(qū)、直轄市人民政府獸醫(yī)主管部門認定,必要時報國務院獸醫(yī)主管部門認定。

13、重大動物疫情應急工作按照屬地管理原則,實行政府統(tǒng)一領(lǐng)導、部門分工負責,逐級建立責任制。

14、重大動物疫病應當由動物防疫監(jiān)督機構(gòu)采集病料,未經(jīng)國務院獸醫(yī)主管部門或者省、自治區(qū)、直轄市人民政府獸醫(yī)主管部門批準,其她單位和個人不得擅自采集病料。

15、采集病原微生物樣本應具備如下4個條件:

(1)具備與采集病原微生物樣本所需要生物安全防護水平相適應設備。

(2)具備掌握有關(guān)專業(yè)知識和操作技能工作人員。

(3)具備有效防止病原微生物擴散和感染辦法。

(4)具備保證病原微生物樣本質(zhì)量技術(shù)辦法和手段。

16、任何單位和個人發(fā)現(xiàn)疑似重大動物疫病病例,應及時向本地動物防疫監(jiān)督機構(gòu)報告。動物防疫監(jiān)督機構(gòu)應及時按照關(guān)于規(guī)定赴現(xiàn)場進行核算。

17、縣級動物防疫監(jiān)督機構(gòu)接到疑似疫情報告后,及時派出不少于2名以上具備有關(guān)資格防疫人員到現(xiàn)場進行臨床和病理診斷等調(diào)查核算。確以為疑似重大動物疫病疫情,應在2小時內(nèi)報告同級獸醫(yī)行政管理部門,并逐級上報至省級動物防疫監(jiān)督機構(gòu)。省級動物防疫監(jiān)督機構(gòu)在接到報告后,1小時內(nèi)向省級獸醫(yī)行政管理部門和國家動物防疫監(jiān)督機構(gòu)報告。

18、重大動物疫情報告重要內(nèi)容:

(1)疫情發(fā)生時間、地點;

(2)染疫、疑似染疫動物種類和數(shù)量、同群動物數(shù)量、免疫狀況、死亡數(shù)量、臨床癥狀、病理變化、與否有人員感染、診斷狀況;

(3)流行病學和疫源追蹤狀況;

(4)已采用控制辦法;

(5)疫情報告單位、負責人、報告人及聯(lián)系方式。

19、依照突發(fā)重大動物疫情性質(zhì)、危害限度、涉及范疇,將突發(fā)重大動物疫情劃分為特別重大(Ⅰ級)、重大(Ⅱ級)、較大(Ⅲ級)和普通(Ⅳ級)四級。

20、有下列情形之一,為口蹄疫I級(特別重大)疫情:

(1)在14日內(nèi),5個以上(含)省份連片發(fā)生疫情;

(2)20個以上縣(區(qū))連片發(fā)生,或疫點數(shù)達到30個以上;

(3)農(nóng)業(yè)部認定其他特別嚴重口蹄疫疫情。

21、有下列情形之一,為口蹄疫II級(重大)疫情:

(1)在14日內(nèi),在一種省級行政區(qū)域內(nèi)有2個以上(含)相鄰地(市)相鄰區(qū)域或者5個以上(含)縣(區(qū))發(fā)生疫情;或有新口蹄疫亞型疫毒引起疫情;

(2)農(nóng)業(yè)部認定其他重大口蹄疫疫情。

22、二、三類動物疫病呈暴發(fā)性流行時,按照一類動物疫病解決。23、以疫點為中心一定范疇內(nèi)區(qū)域劃定為疫區(qū),疫區(qū)劃分時需要考慮因素為:

(1)本地飼養(yǎng)環(huán)境。

(2)天然屏障(如河流、山脈)。

(3)交通因素。

24、種用、乳用動物應當接受動物疫病防止控制機構(gòu)定期檢測。檢測不合格,應當按照國務院獸醫(yī)主管部門規(guī)定予以解決。

25、國家對動物疫病實行防止為主方針,經(jīng)強制免疫動物應當按照國務院獸醫(yī)主管部門規(guī)定建立免疫檔案,加施畜禽標記,實行可追溯管理。

26、國家對嚴重危害養(yǎng)殖業(yè)生產(chǎn)和人體健康動物疫病實行強制免疫。

27、《動物防疫法》第九條規(guī)定:動物疫病防止控制機構(gòu)職責是依法承擔動物疫病監(jiān)測、檢測、診斷、流行病學調(diào)查、疫情報告以及其她防止、控制等技術(shù)工作。

28、《動物防疫法》關(guān)于無規(guī)定動物疫病區(qū)界定是指具備天然屏障或者采用人工辦法,在一定期限內(nèi)沒有發(fā)生規(guī)定一種或者幾種動物疫病,并經(jīng)驗收合格區(qū)域。

29、《動物防疫法》第十五條規(guī)定,動物疫病防止控制機構(gòu)應當按照國務院獸醫(yī)主管部門規(guī)定,對動物疫病發(fā)生、流行等狀況進行監(jiān)測;從事動物飼養(yǎng)、屠宰、經(jīng)營、隔離、運送以及動物產(chǎn)品生產(chǎn)、經(jīng)營、加工、貯藏等活動單位和個人不得回絕或者阻礙。

30、《動物防疫法》第七十一條規(guī)定,動物疫病防止控制機構(gòu)及其工作人員違背本法規(guī)定,有下列行為之一,由本級人民政府或者獸醫(yī)主管部門責令改正,通報批評;對直接負責主管人員和其她直接負責人員依法予以處分:

(1)未履行動物疫病監(jiān)測、檢測職責或者偽造監(jiān)測、檢測成果;

(2)發(fā)生動物疫情時未及時進行診斷、調(diào)查;

(3)其她未依照本法規(guī)定履行職責行為。

31、官方獸醫(yī)是指具備規(guī)定資格條件并經(jīng)獸醫(yī)主管部門任命,負責出具檢疫等證明國家獸醫(yī)工作人員。

二、獸醫(yī)實驗室生物安全

32、獸醫(yī)實驗室是指一切從事獸醫(yī)病原微生物、寄生蟲研究與使用,以及獸醫(yī)臨床診斷和疫病檢疫監(jiān)測實驗室。

33、《病原微生物實驗室生物安全管理條例》是由國務院頒發(fā)。

34、國家依照病原微生物傳染性,感染后對個體或者群體危害限度以及流行狀態(tài)并考慮與否具備有效防止治療辦法等因素,將病原微生物分為4類。

35、國家依照實驗室對病原微生物生物安全防護水平,實行分級管理。

36、實驗室生物安全防護水平分為一級、二級、三級和四級,一級防護水平最低,四級最高。

37、以BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4表達從事體外操作實驗室相應生物安全防護水平。

38、以ABSL-1、ABSL-2、ABSL-3和ABSL-4表達涉及從事動物活體操作實驗室相應生物安全防護水平。

39、BSL-4、BSL-3和ABSL-3、ABSL-4實驗室應當通過國家承認。

40、一類和二類病原微生物統(tǒng)稱為高致病性病原微生物。

41、一級、二級實驗室不得從事高致病性病原微生物實驗活動。

42、開展口蹄疫、高致病性禽流感未經(jīng)培養(yǎng)感染性材料實驗可以在BSL-2實驗室中進行。

43、開展口蹄疫、高致病毒禽流感滅活材料實驗,可以在BSL-2實驗室中進行。

44、開展口蹄疫病毒、高致病毒禽流感病毒分離培養(yǎng)應當在BSL-3實驗室中進行。

45、開展口蹄疫病毒、高致病毒性禽流感病毒動物實驗活動應當在ABSL-3實驗室中進行。

46、二、三、四級生物安全實驗室可開展未經(jīng)培養(yǎng)高致病性禽流感病毒、口蹄疫病毒感染性材料實驗。

47、從事高致病性禽流感病毒、口蹄疫病毒培養(yǎng)及動物接種等實驗活動必要報農(nóng)業(yè)部審批。

48、二級生物安全實驗室必要有生物安全柜、洗眼器、高壓蒸汽滅菌器等生物安全設備。

49、實驗室或者實驗室設立單位應當每年定期對工作人員進行培訓,保證其掌握實驗室技術(shù)規(guī)范、操作規(guī)程、生物安全防護知識和實際操作技能,并進行考核。工作人員經(jīng)考核合格方可上崗。

50、從事高致病性病原微生物有關(guān)實驗活動應當有２名以上工作人員共同進行。

51、在同一種實驗室同一種獨立安全區(qū)域內(nèi),只能同步從事一種高致病性病原微生物有關(guān)實驗活動。

52、人畜共患病是指在脊椎動物與人類之間自然傳播感染疫病。病原體涉及細菌、病毒、支原體、衣原體、螺旋體、立克次體、真菌、原生動物和內(nèi)外寄生蟲等,可通過直接接觸或節(jié)肢動物、嚙齒動物為媒介以及病原污染空氣、水等傳播,重要者為炭疽、結(jié)核病、布魯氏菌病、狂犬病、口蹄疫及旋毛蟲病等。53、實驗室工作人員在解決病原微生物、具有病原微生物實驗材料或寄生蟲時,必要采用綜合防護辦法,以保證明驗對象不對人和動物導致生物傷害,保證周邊環(huán)境不受其污染。如在實驗室和動物實驗室設計與建造、使用個體防護裝置、嚴格遵守原則化工作及操作程序和規(guī)程等。

54、物理防護設備:是用于防止病原微生物逸出和對操作者實行防護物理或機械設備。

55、實驗室初級物理防護屏障(一級防護)涉及各級生物安全設備和個人防護器具。

56、實驗室重要初級生物安全防護設備設施有個人防護用品(服裝、手套、帽子、口罩等)、生物安全柜等。

57、氣溶膠是懸浮于氣體介質(zhì)中粒徑為0.001-100μm固體、液體微小粒子形成膠溶狀態(tài)分散體系。

58、菌(毒)種是指具備保藏價值動物細菌、真菌、放線菌、衣原體、支原體、立克次氏體、螺旋體、病毒等微生物。

59、運送高致病性病原微生物菌(毒)種或者樣本,應當通過陸路運送;沒有陸路通道,必要經(jīng)水路運送,可以通過水路運送;緊急狀況下或者需要將高致病性病原微生物菌(毒)種或者樣本運往國外,可以通過民用航空運送。

60、動物病料跨省航空托運手續(xù)需要(1)符合國家關(guān)于生物安全法律法規(guī)規(guī)定;(2)持有出發(fā)地省級獸醫(yī)行政管理部門頒發(fā)《動物病原微生物菌(毒)種或樣本及動物病料準運證書》;(3)托運人須接受危險品航空動輸訓練,并持有有效證件。

61、運送高致病性病原微生物應具備如下條件:

(1)運送目、高致病性病原微生物用途和接受單位符合國務院衛(wèi)生主管部門或者獸醫(yī)主管部門規(guī)定。

(2)高致病性病原微生物菌(毒)種或者樣本容器應當密封,容器或者包裝材料還應當符合防水、防破損、防外泄、耐高(低)溫、耐高壓規(guī)定。

(3)容器或者包裝材料上應當印有國務院衛(wèi)生主管部門或者獸醫(yī)主管部門規(guī)定生物危險標記、警告用語和提示用語。

62、運送含高致病性病原微生物樣本時,包裝樣本容器應當密封,容器或者包裝材料還應當符合防水、防破損、防外泄、耐高(低)溫、耐高壓規(guī)定;容器或者包裝材料上應當印有農(nóng)業(yè)部規(guī)定生物危險標記、警告用語和提示用語。

63、運送高致病性病原微生物菌(毒)種或者樣本,應當由不少于２人專人護送,并采用相應防護辦法。

64、菌(毒)種和樣品及動物病料托運人或其代理人必要接受危險品航空運送訓練,并持有有效證件。

65、菌(毒)種保藏機構(gòu)分為國家級保藏中心和省級保藏中心。

66、國務院衛(wèi)生主管部門或者獸醫(yī)主管部門指定菌(毒)種保藏中心或者專業(yè)實驗室(如下稱保藏機構(gòu)),承擔集中儲存病原微生物菌(毒)種和樣本任務。

67、依照《動物病原微生物菌(毒)種保藏管理辦法》規(guī)定:保藏機構(gòu)以外任何單位和個人不得保藏菌(毒)種或者樣本。

68、實驗室在有關(guān)實驗活動結(jié)束后,應當依照國務院衛(wèi)生主管部門或者獸醫(yī)主管部門規(guī)定,及時將病原微生物菌(毒)種和樣本就地銷毀或者送交保藏機構(gòu)保管。保藏機構(gòu)接受實驗室送交病原微生物菌(毒)種和樣本,應當予以登記,并開具接受證明。

69、實驗室生物安全管理體系文獻普通涉及實驗室生物安全管理手冊、程序文獻、操作規(guī)程及儀器使用闡明、登記表格等文獻。通過貫徹實驗室安全管理體系文獻可實現(xiàn)對實驗室安全運營狀態(tài)控制、監(jiān)督和記錄,保證明驗室生物安全管理體系有效運營。

70、生物安全管理手冊提出了實驗室生物安全管理方針、管理目的、組織構(gòu)造,規(guī)定了生物安全管理體系各個要素和管理規(guī)定,如對生物傳染性樣本保存、運送,及實驗室設備消毒和清潔、危險廢棄物解決和處置工作,以及與實驗室安全有關(guān)消防安全、電氣安全、化學品安全等方面作出了詳細闡明,是實驗室生物安全工作大綱性、指引性文獻,為一級文獻。

71、生物安全程序文獻根據(jù)實驗室活動目、范疇和職責,規(guī)定了工作流程中生物安全事宜及規(guī)定,是生物安全管理手冊支持性文獻,為二級文獻。

72、生物安全原則操作規(guī)程是實驗室詳細工作中,根據(jù)生物安全規(guī)定制定技術(shù)文獻,涉及實驗操作細則、設施設備原則操作規(guī)程、個人防護裝備原則操作規(guī)程等作業(yè)性文獻,為配套性文獻。

73、生物安全記錄、表格等為輔助性文獻,規(guī)定了必要記錄生物安全工作事項,如實驗室人員培訓、實驗活動、設施設備運營、安全檢查記錄等。

74、實驗室管理層應對實驗室安全管理體系及其所有活動進行評審,涉及設施設備狀態(tài)、人員狀態(tài)、實驗室有關(guān)活動、變更、事件、事故等。

75、微生物危害評估是對病原微生物或寄生蟲也許給人、動物和環(huán)境帶來危害所進行評估。76、當實驗室活動涉及致病性生物因子時,實驗室對微生物致病性和毒力應從如下幾種方面進行評估:

宿主范疇;所引起疾病發(fā)病率和死亡率;疾病傳播媒介;動物體內(nèi)或環(huán)境中病原量和濃度;排出物傳播也許性;病原在自然環(huán)境中存活時間;病原地方流行特性;交叉污染也許性;獲得有效疫苗、防止和治療藥物限度等。

77、實驗室廢棄物包括廢氣、廢液和固形物等,廢棄物解決辦法重要有如高壓滅菌、化學消毒、熏蒸、γ-射線照射或焚燒等。

78、BSL-2實驗室經(jīng)常性危險廢棄物:

(1)也許帶有病原樣本:血清、組織、尸體、培養(yǎng)基、培養(yǎng)液、疫苗;

(2)檢測使用物品:滴頭、離心管、試管、注射器等;

(3)個體防護用品:手套、口罩、防護服等。

79、實驗室危險廢棄物解決原則:

(1)將操作、收集、運送、解決及處置廢物危險減至最小;

(2)將其對環(huán)境有害作用減至最小;

(3)只可使用被承認技術(shù)和辦法解決和處置危險廢物;

(4)排放符合國家或地方規(guī)定和原則規(guī)定。

80、BSL-2實驗室內(nèi)個體防護用品包括防護帽、護目鏡、口罩、工作服、手套等。個體防護用品接觸病原微生物過后應當作危險廢棄物進行解決,普通選用高壓高溫、化學消毒、焚燒等辦法進行無害化解決等。

81、BSL-2實驗室涉及慣用危險標記:

生物危險、有毒有害、腐蝕性、輻射、刺傷、電擊、易燃、易爆、高溫、低溫、強光、振動、噪聲、動物咬傷、砸傷等。

82、BSL-2實驗室原則操作:

(1)工作普通在操作臺面上進行,采用微生物常規(guī)操作和特殊操作。

(2)工作區(qū)內(nèi)禁止吃、喝、抽煙、用手接觸隱形眼鏡和使用化妝品。食物應在專門設計工作區(qū)外柜內(nèi)或冰箱內(nèi)貯藏。

(3)使用移液管吸取液體,禁止用嘴吸取。

(4)操作傳染性材料后要洗手,離開實驗室前脫掉手套并洗手。

(5)制定對利器安全操作對策。

(6)所有操作均須小心,以減少實驗材料外溢、飛濺、產(chǎn)氣憤溶膠。

(7)每天完畢實驗后對工作臺面進行消毒。實驗材料濺出時,要用有效消毒劑消毒。

(8)所有培養(yǎng)物和廢棄物在解決前都要用高壓蒸汽滅菌器消毒。消毒后物品要放入牢固不漏容器內(nèi),按照國家法規(guī)進行包裝,密閉傳出解決。

(9)昆蟲和嚙齒類動物控制應參照其他關(guān)于規(guī)定進行。

(10)妥善保管菌、毒種,使用要經(jīng)負責人批準并登記使用量。

三、實驗室認證承認和管理制度

83、實驗室認證承認工作應按照國家質(zhì)量監(jiān)督檢查檢疫總局于2月21日頒布《實驗室和檢查機構(gòu)資質(zhì)認定管理辦法》進行。

84、從事下列活動機構(gòu)(實驗室)應當通過資質(zhì)認定:

(1)為行政機關(guān)作出行政決定提供具備證明作用數(shù)據(jù)和成果;

(2)為司法機關(guān)作出裁決提供具備證明作用數(shù)據(jù)和成果;

(3)為仲裁機構(gòu)作出仲裁決定提供具備證明作用數(shù)據(jù)和成果;

(4)為社會公益活動提供具備證明作用數(shù)據(jù)和成果;

(5)為經(jīng)濟或者貿(mào)易關(guān)系人提供具備證明作用數(shù)據(jù)和成果;

(6)其她法定需要通過資質(zhì)認定。

85、國家勉勵實驗室獲得經(jīng)國家認監(jiān)委擬定承認機構(gòu)資質(zhì)認定,資質(zhì)認定形式涉及計量認證和審查承認。

86、計量認證是指國家認監(jiān)委和地方質(zhì)檢部門根據(jù)關(guān)于法律、行政法規(guī)規(guī)定,對為社會提供公證數(shù)據(jù)產(chǎn)品質(zhì)量檢查機構(gòu)計量檢定、測試設備工作性能、工作環(huán)境和人員操作技能和保證量值統(tǒng)一、精確辦法及檢測數(shù)據(jù)公正可靠質(zhì)量體系能力進行考核。

87、審查承認是指國家認監(jiān)委和地方質(zhì)檢部門根據(jù)關(guān)于法律、行政法規(guī)規(guī)定,對承擔產(chǎn)品與否符合原則檢查任務和承擔其她原則實行監(jiān)督檢查任務檢查機構(gòu)檢測能力以及質(zhì)量體系進行審查。

88、國家認證承認監(jiān)督管理委員會(國家認監(jiān)委)統(tǒng)一管理、監(jiān)督和綜合協(xié)調(diào)實驗室和檢查機構(gòu)資質(zhì)認定工作。

各省、自治區(qū)、直轄市人民政府質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督部門負責所轄區(qū)域內(nèi)實驗室和檢查機構(gòu)資質(zhì)認定和監(jiān)督檢查工作。89、實驗室資質(zhì)認定(計量認證/審查承認)以《實驗室和檢查機構(gòu)資質(zhì)認定管理辦法》為根據(jù),按《實驗室資質(zhì)認定評審準則》實行評審。實驗室承認依照《檢測和校準實驗室能力承認準則》(ISO/IEC17025)進行評審。

90、實驗室應當建立原則化管理體系文獻,涉及質(zhì)量管理體系文獻和生物安全管理體系文獻。實驗室管理體系應覆蓋其所有場合進行工作。管理體系文獻擺放在明顯位置,易于尋常工作時查閱。

91、實驗室所有管理體系文獻都應當受控,受控文獻應有控制編號。

92、實驗室質(zhì)量管理體系文獻重要由質(zhì)量管理手冊、程序文獻、作業(yè)指引書、技術(shù)登記表格及質(zhì)量登記表格等質(zhì)量文獻構(gòu)成。

93、實驗室質(zhì)量管理方針:

科學、及時、精確。

科學:遵守國家關(guān)于法律法規(guī),根據(jù)檢測技術(shù)規(guī)程、規(guī)范和原則,選用匹配儀器設備,保證檢測辦法科學性。

及時:做好檢測用藥物試劑儲備工作,在規(guī)定期間內(nèi)完畢檢測工作。

精確:檢測報告以精確無誤為原則,保證檢測成果精確性。

94、實驗室質(zhì)量管理目的:

建立并實行完善質(zhì)量體系,保證有效運營并持續(xù)改進。

檢測中重大事故率為零,檢測報告無數(shù)據(jù)或結(jié)論性差錯。

95、實驗室質(zhì)量管理手冊是為貫徹實驗室質(zhì)量管理方針和目的編制、適應檢測工作需要和保證檢測質(zhì)量、本實驗室員工必要遵守大綱性文獻,規(guī)定了質(zhì)量管理體系各個要素和管理規(guī)定,為一級文獻。

96、質(zhì)量管理程序文獻是質(zhì)量管理手冊支持性文獻,為滿足檢測質(zhì)量規(guī)定,描述了檢測各個環(huán)節(jié)、過程,以保證所有過程受控。為二級文獻。

97、作業(yè)指引書是檢測工作技術(shù)文獻,是程序文獻細化。它涉及檢測辦法、檢測實行細則、各類設備操作規(guī)程等詳細操作文獻。為配套性文獻。

98、技術(shù)登記表格及質(zhì)量登記表格等為輔助性文獻,是質(zhì)量控制和檢測工作全過程記載。它是質(zhì)量體系有效運營和檢測工作符合規(guī)定規(guī)定證據(jù),同步也是持續(xù)改進根據(jù)。

99、每次檢測記錄應包括足夠信息,以保證其可以復檢再現(xiàn)。

100、實驗室管理制度:

實驗室崗位責任制,實驗室檔案資料管理制度,儀器設備使用管理制度,藥物試劑管理制度,病料采集、保存及運送制度,實驗室衛(wèi)生安全制度,實驗室生物安全管理制度,實驗室安全操作規(guī)定,實驗記錄、檢查報告審核制度,實驗室樣品管理制度,菌(毒)種管理制度,實驗室劇毒藥物管理領(lǐng)取使用制度,實驗室廢棄物及污染物無害化解決制度等。

101、所有質(zhì)量記錄和原始記錄、計算和導出數(shù)據(jù)、記錄以及證書/證書副本等技術(shù)記錄均應當歸檔并按恰當期限保存。

102、實驗室應有與其從事檢測活動相適應專業(yè)技術(shù)人員和管理人員。所有人員應通過相應培訓并持證上崗。

103、實驗室應建立檢測樣品唯一性標記,避免樣品和記錄浮現(xiàn)混淆。

104、實驗室檢測成果原始記錄應當涉及基本信息:

檢測日期;樣品名稱(樣品種類)、數(shù)量、編號;檢測成果;根據(jù)辦法和原則;試劑名稱、批號;儀器設備名稱、編號;環(huán)境條件(環(huán)境溫度、濕度等);檢查人員、校核或?qū)徍巳藛T等。

105、檢測人員在填寫檢測記錄時如遇記錄錯誤確需更改時,應由項目檢查人員在原始記錄錯誤字符上劃上二橫,將對的字符填在上方并蓋上更改人章或更改人簽名。不得采用涂改、粘貼等方式,以致辨認不清原有字符。

106、實驗室應指定專人對檢測原則進行定期查新,以保證檢測原則時效性。

107、用于實驗室檢測試劑,在使用前必要通過確認,證明可以滿足檢測辦法規(guī)定規(guī)定。

108、PCR實驗室應當嚴格分區(qū),普通提成試劑配制區(qū)、核酸(樣品)提取區(qū)、PCR擴增區(qū)、PCR擴增成果檢測(電泳)區(qū)等4個區(qū)。

109、實驗室屬于強制檢定范疇計量器具,未按照規(guī)定申請檢定或者檢定不合格繼續(xù)使用,責令停止使用,可以并懲罰款。四、動物疫病防控技術(shù)規(guī)范

110、高致病性禽流感特性性臨床癥狀:

急性發(fā)病死亡或不明因素死亡,潛伏期從幾小時到數(shù)天,最長可達21天,腳鱗出血,雞冠出血或發(fā)紺、頭部和面部水腫;鴨、鵝等水禽可見神經(jīng)和腹瀉癥狀,有時可見角膜炎癥,甚至失明;產(chǎn)蛋突然下降。

111、高致病性禽流感臨床診斷指標:

(1)急性發(fā)病死亡或不明因素死亡;

(2)腳鱗出血;

(3)雞冠出血或發(fā)紺、頭部和面部水腫;

(4)肌肉和其她組織器官廣泛性嚴重出血;

(5)明顯神經(jīng)癥狀(適于水禽)。

112、高致病性禽流感血清學診斷指標:

未免疫禽H5或H7血凝抑制(HI)效價達到24及以上,禽流感瓊脂免疫擴散實驗(AGID)陽性。

113、高致病性禽流感病理診斷指標:

(1)消化道、呼吸道粘膜廣泛充血、出血;腺胃粘液增多,可見腺胃乳頭出血,腺胃和肌胃之間交界處粘膜可見帶狀出血。

(2)輸卵管中部可見乳白色分泌物或凝塊;卵泡充血、出血、萎縮、破裂,有可見“卵黃性腹膜炎”。

(3)腦部浮現(xiàn)壞死灶、血管周邊淋巴細胞管套、神經(jīng)膠質(zhì)灶、血管增生等病變;胰腺和心肌組織局灶性壞死。

114、高致病性禽流感疑似病例鑒定原則:

在臨床上懷疑為高致病性禽流感,且符合如下病原學指標之一可鑒定為疑似病例:

(1)反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反映(RT-PCR)檢測,成果H5或H7亞型禽流感陽性;

(2)通用熒光反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反映(熒光RT-PCR)檢測陽性;

(3)神經(jīng)氨酸酶抑制(NI)實驗陽性。

115、高致病性禽流感病原學診斷指標:

(1)反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反映(RT-PCR)檢測,成果H5或H7亞型禽流感陽性;

(2)通用熒光反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反映(熒光RT-PCR)檢測陽性;

(3)神經(jīng)氨酸酶抑制(NI)實驗陽性;

(4)靜脈內(nèi)接種致病指數(shù)(IVPI)不不大于1.2;或用0.2mL1:10無菌感染流感病毒雞胚尿囊液,經(jīng)靜脈注射接種8只4-8周齡易感雞,在接種后10天內(nèi),能致6-7只或8只雞死亡,即死亡率≥75%。

116、口蹄疫流行病學特點:

(1)口蹄疫病毒侵害各種動物,偶蹄獸易感。家畜以牛易感,(奶牛、牦牛、犏牛最易感,水牛次之),另一方面是豬,再次為綿羊、山羊和駱駝。仔豬和犢牛不但易感且死亡率高。野生動物中黃羊、鹿、麝和野豬也感染發(fā)病;長頸鹿、扁角鹿、野牛和瘤牛等都易感。

(2)傳染源重要為潛伏期感染及臨床發(fā)病動物。感染動物呼出物、唾液、糞便、尿液、乳、精液及肉和副產(chǎn)品均可帶毒。康復期動物也可帶毒。

(3)易感動物可通過呼吸道、消化道、生殖道和傷口感染病毒,普通以直接或間接接觸(飛沫等)方式傳播,或通過人或犬、蠅、蜱、鳥等動物媒介,或經(jīng)車輛、器具等被污染物傳播。如果環(huán)境氣候適當,病毒可隨風遠距離傳播。

117、口蹄疫特性性臨床癥狀:

唇部、舌面、齒齦、鼻鏡、蹄踵、蹄叉、乳房等部位浮現(xiàn)水泡。

118、口蹄疫重要病理變化:

(1)消化道可見水泡、潰瘍;

(2)幼畜可見骨骼肌、心肌表面浮現(xiàn)灰白色條紋,形色酷似虎斑。

119、口蹄疫臨床診斷指標:

(1)牛呆立流涎,豬臥地不起,羊跛行;

(2)唇部、舌面、齒齦、鼻鏡、蹄踵、蹄叉、乳房等部位浮現(xiàn)水泡;

(3)發(fā)病后期,水泡破潰、結(jié)痂,嚴重者蹄殼脫落,恢復期可見瘢痕、新生蹄甲。

(4)傳播速度快,發(fā)病率高;成年動物死亡率低,幼畜常突然死亡且死亡率高,仔豬常成窩死亡。

120、豬瘟典型癥狀:

(1)發(fā)病急、死亡率高;

(2)體溫普通升至41℃以上、厭食、畏寒;

(3)先便秘后腹瀉,或便秘和腹瀉交替浮現(xiàn);

(4)腹部皮下、鼻鏡、耳尖、四肢內(nèi)側(cè)均可浮現(xiàn)紫色出血斑點,指壓不褪色,眼結(jié)膜和口腔黏膜可見出血點。121、豬瘟在病理學診斷上肉眼可見典型病變:

(1)淋巴結(jié)水腫、出血,呈現(xiàn)大理石樣變;

(2)腎臟呈土黃色,表面可見針尖狀出血點;

(3)全身漿膜、黏膜和心臟、膀胱、膽囊、扁桃體均可見出血點和出血斑,脾臟邊沿浮現(xiàn)梗死灶;

(4)脾不腫大,邊沿有暗紫色突出表面出血性梗死;

(5)慢性豬瘟在回腸末端、盲腸和結(jié)腸常用“鈕扣狀”潰瘍。

122、豬瘟凈化原則:

對種豬場和規(guī)模養(yǎng)殖場種豬定期采樣進行病原學檢測,對檢測陽性豬及時進行撲殺和無害化解決,逐漸進行凈化。

123、高致病性豬藍耳病臨床癥狀:

體溫明顯升高,可達41℃以上;眼結(jié)膜炎、眼瞼水腫;咳嗽、氣喘等呼吸道癥狀;某些豬后軀無力、不能站立或共濟失調(diào)等神經(jīng)癥狀;仔豬發(fā)病率可達100％、死亡率可達50％以上,母豬流產(chǎn)率可達30％以上,成年豬也可發(fā)病死亡。

124、馬傳染性貧血(簡稱馬傳貧)臨床特性:

急性型高熱稽留,亞急性型呈間歇熱,慢性型不規(guī)則發(fā)熱,但發(fā)熱時間短;隱性型無可見臨床癥狀,體內(nèi)長期帶毒。

125、炭疽典型癥狀:

(1)呈急性通過,多以突然死亡、天然孔出血、尸僵不全為特性。

(2)牛體溫升高常達41℃以上,可視黏膜呈暗紫色,心動過速、呼吸困難。

(3)豬多為局限性變化,呈慢性通過,臨床癥狀不明顯,常在宰后見病變。

126、豬鏈球菌病有如下幾種病型:

敗血癥型、腦膜炎型、淋巴結(jié)膿腫型、關(guān)節(jié)炎型等。

127、依照《馬立克氏病防治技術(shù)規(guī)范》,馬立克氏病實驗室診斷辦法:

病原分離鑒定、組織病理學診斷、瓊脂擴散實驗。

128、馬鼻疽實驗室診斷辦法:

鼻疽菌素點眼法、鼻疽菌素皮下注射法、鼻疽菌素眼瞼皮內(nèi)注射法、酶聯(lián)免疫吸附實驗。

129、發(fā)現(xiàn)重大動物疫病疑似病例時,本地動物疫病防止控制機構(gòu)在按規(guī)定報告同步,應采集病料并送至省級動物疫病防止控制機構(gòu)進行疑似診斷,再送至國家指定參照實驗室進行確診。

130、動物防疫監(jiān)督機構(gòu)在接到疫情報告后,懷疑是高致病性禽流感、口蹄疫,應在2小時以內(nèi)將狀況逐級報到省級畜牧獸醫(yī)行政管理部門。

131、口蹄疫疑似疫情處置辦法:

(1)對疫點實行隔離、監(jiān)控,禁止家畜、畜產(chǎn)品及關(guān)于物品移動,并對其內(nèi)、外環(huán)境實行嚴格消毒辦法。

(2)必要時采用封鎖、撲殺等辦法。

132、口蹄疫疫點、疫區(qū)、受威脅區(qū)劃分:

(1)口蹄疫疫點是指發(fā)病畜所在地點。相對獨立規(guī)?；B(yǎng)殖場/戶,以病畜所在養(yǎng)殖場/戶為疫點;散養(yǎng)畜以病畜所在自然村為疫點;放牧畜以病畜所在牧場及其活動場地為疫點;病畜在運送過程中發(fā)生疫情,以運載病畜車、船、飛機等為疫點;在市場發(fā)生疫情,以病畜所在市場為疫點;在屠宰加工過程中發(fā)生疫情,以屠宰加工廠(場)為疫點。

(2)口蹄疫疫區(qū)是指由疫點邊沿向外延伸3公里內(nèi)區(qū)域。

(3)受威脅區(qū)是指由疫區(qū)邊沿向外延伸10公里區(qū)域。

133、確診為口蹄疫疫情后,應及時啟動相應級別應急預案,對疫點、疫區(qū)別別采用相應辦法:

(1)封鎖:

疫情發(fā)生所在地縣級以上獸醫(yī)行政管理部門報請同級人民政府對疫區(qū)實行封鎖,人民政府在接到報告后,應在24小時內(nèi)發(fā)布封鎖令。

跨行政區(qū)域發(fā)生疫情,由共同上級獸醫(yī)行政管理部門報請同級人民政府對疫區(qū)發(fā)布封鎖令。

(2)對疫點采用辦法:

撲殺疫點內(nèi)所有病畜及同群易感畜,并對病死畜、被撲殺畜及其產(chǎn)品進行無害化解決;

對排泄物、被污染飼料、墊料、污水等進行無害化解決;

對被污染或可疑污染物品、交通工具、用品、畜舍、場地進行嚴格徹底消毒;

對發(fā)病前14天售出家畜及其產(chǎn)品進行追蹤,并做撲殺和無害化解決。(3)對疫區(qū)采用辦法:

在疫區(qū)周邊設立警示標志,在出入疫區(qū)交通路口設立動物檢疫消毒站,執(zhí)行監(jiān)督檢查任務,對出入車輛和關(guān)于物品進行消毒;

所有易感畜進行緊急強制免疫,建立完整免疫檔案;

關(guān)閉家畜產(chǎn)品交易市場,禁止活畜進出疫區(qū)及產(chǎn)品運出疫區(qū);

對交通工具、畜舍及用品、場地進行徹底消毒;

對易感家畜進行疫情監(jiān)測,及時掌握疫情動態(tài);

必要時,可對疫區(qū)內(nèi)所有易感動物進行撲殺和無害化解決。

134、口蹄疫受威脅區(qū)應采用辦法:

(1)最后一次免疫超過一種月所有易感畜,進行一次緊急強化免疫;

(2)加強疫情監(jiān)測,掌握疫情動態(tài)。

135、應用深埋法對口蹄疫病死牲口進行無害化解決詳細辦法:

(1)選址:掩埋地應選取遠離學校、公共場合、居民住宅區(qū)、動物飼養(yǎng)和屠宰場合、村莊、飲用水源地、河流等。避免公共視線。

(2)深度:坑深度應保證動物尸體、產(chǎn)品、飼料、污染物等被掩埋物上層距地表1.5米以上?？游恢煤皖愋蛻兄诜篮椤?/p>

(3)焚燒:掩埋前,要對需掩埋動物尸體、產(chǎn)品、飼料、污染物等實行焚燒解決。

(4)消毒:掩埋坑底鋪2cm厚生石灰;焚燒后動物尸體、產(chǎn)品、飼料、污染物等表面,以及掩埋后地表環(huán)境應使用有效消毒藥物噴灑消毒。

(5)填土:用土掩埋后,應與周邊持平。填土不要太實,以免尸腐產(chǎn)氣導致氣泡冒出和液體滲漏。

(6)掩埋后應設立明顯標記。

136、對患口蹄疫或疑似口蹄疫動物應采用電擊、藥物注射等無出血撲殺辦法進行撲殺。

137、封鎖疫區(qū)解除封鎖條件:

自疫區(qū)內(nèi)最后一頭(只)發(fā)病動物及其同群動物解決完畢起,通過一種潛伏期以上監(jiān)測,未浮現(xiàn)新病例,徹底消毒后,經(jīng)上一級動物防疫監(jiān)督機構(gòu)驗收合格,由原發(fā)布封鎖令例如人民政府宣布解除封鎖,撤銷疫區(qū)。

138、高致病性禽流感疫情診斷4級程序:

專家臨床初步診斷,省級實驗室確認疑似,國家參照實驗室毒型鑒定(確診),農(nóng)業(yè)部最后確認和發(fā)布。

139、當發(fā)生高致病性禽流感疫情時,應撲殺疫點和疫區(qū)內(nèi)所有禽類。

140、發(fā)生高致病性禽流感疫情時疫點、疫區(qū)、受威脅區(qū)劃定:

(1)疫點:患病禽類所在地點。普通是指患病禽類所在禽場(戶)或其她關(guān)于屠宰、經(jīng)營單位;如為農(nóng)村散養(yǎng),應將自然村劃為疫點。

(2)疫區(qū):由疫點邊沿向外延伸3-5公里區(qū)域劃為疫區(qū)。疫區(qū)劃分時,應注意考慮本地飼養(yǎng)環(huán)境和天然屏障(如河流、山脈等)。

(3)受威脅區(qū):由疫區(qū)邊沿向外延伸5-30公里區(qū)域劃為受威脅區(qū)。

141、發(fā)生高致病性禽流感時對疫點應采用應急解決辦法:

(1)撲殺所有禽只,并對所有病死禽、被撲殺禽及其禽類產(chǎn)品按國家規(guī)定原則進行無害化解決。

(2)對禽類排泄物、被污染飼料、墊料、污水等進行無害化解決。

(3)對被污染物品、交通工具、用品、禽舍、場地進行嚴格徹底消毒。

142、發(fā)生高致病性禽流感時對疫區(qū)應采用應急解決辦法:

(1)在疫區(qū)周邊設立警示標志,在出入疫區(qū)交通路口設立動物檢疫消毒站,對出入人員和車輛進行消毒。

(2)按規(guī)定撲殺疫區(qū)內(nèi)所有家禽,并進行無害化解決,同步銷毀相應禽類產(chǎn)品。

(3)關(guān)閉活禽及禽類產(chǎn)品交易市場,禁止易感活禽進出和易感禽類產(chǎn)品運出。

(4)對禽類排泄物、被污染飼料、墊料、污水等按國家規(guī)定原則進行無害化解決;

(5)對所有與禽類接觸過物品、交通工具、用品、禽舍、場地進行徹底消毒。

143、禽場發(fā)生高致病性禽流感疫情時,應采用如下辦法對疫點進行緊急防疫消毒:

(1)對圈舍及場地內(nèi)外采用噴灑消毒液方式進行消毒,消毒后對污物、糞便、飼料等進行清理;清理完畢再用消毒液以噴灑方式進行徹底消毒,消毒完畢后再進行清洗;不易沖洗圈舍清除廢棄物和表土,進行堆積發(fā)酵解決。

(2)對金屬設施設備,可采用火焰、熏蒸等方式消毒;木質(zhì)工具及塑料用品采用用消毒液浸泡消毒;工作服等采用浸泡或高溫高壓消毒。

(3)污水溝、水塘可投放生石灰或漂白粉。

(4)在出入疫點交通路口設立消毒站點,對所有也許被污染運載工具應當嚴格消毒。

(5)對車輛上清理下來廢棄物進行無害化解決。

(6)每天消毒1次持續(xù)1周,1周后來每兩天消毒1次。144、依照《高致病性禽流感防治技術(shù)規(guī)范》,發(fā)生高致病性禽流感疫情后,家禽尸體、產(chǎn)品及污染物應進行無害化解決,解決方式有深埋、發(fā)酵、工業(yè)化解決等。

145、高致病性禽流感病禽及廢棄物深埋無害化解決過程,應做到如下幾點:

(1)選址應當避開公共視線,選取地表水位低、遠離學校、公共場合、居民住宅區(qū)、動物飼養(yǎng)場、屠宰場及交易市場、村莊、飲水水源地、河流等地區(qū)。位置和類型應有助于防洪。

(2)禽類尸體置于坑中后,澆油焚燒,然后用土覆蓋,與周邊持平。填土不要太實,以免尸腐產(chǎn)氣導致氣泡冒出和液體滲漏。

(3)飼料、污染物等置于坑中,噴灑消毒劑后掩埋。

146、發(fā)生高致病性豬藍耳病后,應采用如下幾種辦法:

(1)撲殺所有病豬和同群豬。

(2)對未發(fā)病相對獨立圈舍生豬用高致病性豬藍耳病疫苗進行緊急強化免疫,并加強疫情監(jiān)測。

(3)對病死豬、排泄物、被污染飼料、墊料、污水等進行無害化解決,對被污染物品、交通工具、用品、豬舍、場地等進行徹底消毒。

147、發(fā)生高致病性禽流感疫情時,要對受威脅區(qū)域所有家禽進行一次強化免疫;邊境地區(qū)受到境外疫情威脅時,要對距邊境30公里范疇內(nèi)所有家禽進行一次強化免疫。近來1個月內(nèi)已免疫家禽可以不強化免疫。

148、按照《國家動物疫病監(jiān)測籌劃》規(guī)定,O型口蹄疫滅活疫苗免疫抗體檢測辦法為正向間接血凝實驗(IHA)和液相阻斷ELISA,使用合成肽疫苗,采用VP1構(gòu)造蛋白ELISA進行檢測。

149、家畜群體口蹄疫免疫抗體合格鑒定原則:

家畜免疫21天后,存欄家畜免疫抗體合格率≥70%鑒定為群體免疫合格。

150、按照農(nóng)業(yè)部規(guī)定,家畜個體口蹄疫免疫抗體合格鑒定原則:

亞洲I型口蹄疫:液相阻斷ELISA抗體效價≥26鑒定為合格。

O型口蹄疫:正向間接血凝實驗抗體效價≥25鑒定為合格,液相阻斷ELISA抗體效價≥26鑒定為合格,VP1構(gòu)造蛋白抗體ELISA抗體效價≥25鑒定為合格。

A型口蹄疫:液相阻斷ELISA抗體效價≥26鑒定為合格。

151、防控重大動物疫情24字方針:

加強領(lǐng)導、密切配合、依托科學、依法防治、群防群控、堅決處置。

152、依照《國家動物疫病監(jiān)測籌劃》,高致病性禽流感血清學監(jiān)測實驗辦法和鑒定原則如下:

(1)辦法:血凝抑制實驗(HI)。

(2)鑒定:弱毒疫苗,商品代肉雛雞第二次免疫14天后,雞群免疫抗體轉(zhuǎn)陽≥50%為合格;滅活疫苗,家禽免疫21天后,HI抗體效價≥24為免疫合格。

153、按照《國家動物疫病監(jiān)測籌劃》規(guī)定,高致病性豬藍耳病血清學檢測辦法為ELISA。

154、依照《國家動物疫病監(jiān)測籌劃》,豬瘟免疫抗體監(jiān)測辦法為:抗體阻斷ELISA和豬瘟抗體正向間接血凝。

155、按照《國家動物疫病監(jiān)測籌劃》規(guī)定,活疫苗免疫28天后,高致病性豬藍耳病ELISA免疫抗體IRPC值>20為合格。存欄豬免疫抗體合格率≥70%時為群體免疫合格。

156、按照《國家動物疫病監(jiān)測籌劃》規(guī)定,進行口蹄疫病原學檢測時,食道-咽某些泌物(O-P液)用RT-PCR辦法進行檢測。

157、牲口口蹄疫病原學檢測成果為陽性,應及時采用辦法:

(1)樣品要及時送國家口蹄疫參照實驗室進行病原分離鑒定。

(2)撲殺陽性畜,必要時對同群畜進行撲殺,并作無害化解決。

(3)將陽性狀況按快報規(guī)定報告。

158、按照《國家動物疫病監(jiān)測籌劃》規(guī)定,高致病性禽流感病原學監(jiān)測辦法為RT-PCR或熒光RT-PCR。

159、依照《國家動物疫病監(jiān)測籌劃》,豬瘟病原學檢測辦法采用RT-PCR或熒光PCR辦法、熒光免疫抗體辦法。

160、按照《國家動物疫病強制免疫籌劃》規(guī)定,對高致病性禽流感、高致病性豬藍耳病、口蹄疫、豬瘟等四種動物疫病強制免疫總體規(guī)定是,群體免疫密度常年維持在90％以上,其中應免畜禽免疫密度要達到100％,免疫抗體合格率全年保持在70％以上。

161、《國家動物疫病強制免疫籌劃》規(guī)定規(guī)模養(yǎng)殖家畜和種畜口蹄疫免疫程序為:

仔豬、羔羊:28～35日齡時進行初免。

犢牛:90日齡左右進行初免。

所有新生家畜初免后,間隔1個月后進行一次強化免疫,后來每隔4～6個月免疫一次。162、《國家動物疫病強制免疫籌劃》規(guī)定對所有雞、水禽(鴨、鵝)和人工飼養(yǎng)鵪鶉、鴿子等禽只進行高致病性禽流感強制免疫。

163、散養(yǎng)禽高致病性禽流感免疫程序為:春、秋兩季用H5N1亞型禽流感滅活疫苗各進行一次集中全面免疫,每月定期補免。

164、《國家動物疫病強制免疫籌劃》規(guī)定規(guī)模養(yǎng)豬場豬瘟免疫程序為:

商品豬:25～35日齡初免,60～70日齡加強免疫一次。

種豬:25～35日齡初免,60～70日齡加強免疫一次,后來每4～6個月免疫一次。

165、依照《國家動物疫病強制免疫籌劃》,小反芻獸疫免疫程序為:

新生羔羊1月齡后來免疫一次,對本年未免疫羊和超過3年免疫保護期羊進行免疫。

166、布魯氏菌病穩(wěn)定控制原則,持續(xù)3年以上具備如下3項條件:

(1)羊血清學檢查陽性率在0.1%如下、豬在0.3%如下;牛、鹿0.2%如下。

(2)抽檢羊、牛、豬等動物樣品材料檢不出布魯氏菌。

(3)患病動物所有撲殺,并進行了無害化解決。

167、依照《高致病性禽流感和口蹄疫等重要動物疫病流行病學調(diào)查方案》,如下狀況下需進行緊急流行病學調(diào)查:

(1)懷疑或確認發(fā)生高致病性禽流感等重大動物疫病時。

(2)懷疑或確認發(fā)生瘋牛病等外來動物疫病時。

(3)豬瘟等重要動物疫病流行特性浮現(xiàn)明顯變化時。

168、依照《乳用動物健康原則》,對乳用動物健康狀況,本地動物疫病防止控制機構(gòu)每年至少檢測一次。

169、按照《國家動物疫情測報體系管理規(guī)范》規(guī)定,應對種用、役用動物開展如下疫病監(jiān)測(按照豬、牛、羊、馬屬動物、雞、鴨、鵝等動物種類分別列舉):

豬:口蹄疫、豬水泡病、豬瘟、偽狂犬病、豬繁殖與呼吸綜合癥

牛:口蹄疫、結(jié)核、布魯氏菌病、瘋牛病

羊:口蹄疫、布魯氏菌病、山羊/綿羊痘、癢病

馬屬動物:馬傳貧、馬鼻疽

雞:新城疫、禽流感

鴨、鵝:禽流感獸醫(yī)實驗室人員慣用技術(shù)知識點(二)-03-1214:36:20來源:陽光畜牧網(wǎng)--河北省畜牧獸醫(yī)局瀏覽:114次一、獸醫(yī)免疫學及微生物學基本知識

170、免疫是指動物機體對外源性或內(nèi)源性異物進行辨認、排斥和清除過程,即“辨認異己”和“排斥異己”反映,以維持機體內(nèi)外環(huán)境相對平衡和穩(wěn)定。

171、動物機體免疫有天然、非特異性先天性免疫和后天獲得、具備特異性獲得性免疫兩大類。

172、非特異性免疫,是個體出生后就具備天然免疫力,故又稱先天性免疫。

173、獲得性免疫分為天然自動免疫、天然被動免疫、人工自動免疫、人工被動免疫4個類型。

174、將免疫血清或自然發(fā)病后康復動物血清人工輸入未免疫動物,使其獲得對某種病原微生物抵抗力,稱為人工被動免疫。

175、動物機體免疫系統(tǒng)由免疫器官和免疫活性細胞構(gòu)成。

176、免疫器官分為中樞免疫器官和外周免疫器官兩某些。

177、免疫活性細胞指受到抗原刺激后特異地辨認抗原并發(fā)生免疫反映一類細胞,具備免疫潛能,又稱免疫致敏細胞。涉及T淋巴細胞和B淋巴細胞兩大群。

178、T細胞是具備免疫活性胸腺依賴性淋巴細胞,執(zhí)行細胞免疫。

179、B細胞是在非胸腺依賴區(qū)由多能干細胞分化增殖產(chǎn)生免疫活性細胞,執(zhí)行體液免疫。B細胞受抗原刺激后逐級分化成漿母細胞、漿細胞。漿細胞可以產(chǎn)生特異性抗體即特異性免疫球蛋白(Ig)。

180、免疫球蛋白可分為IgG、IgA、IgM、IgD、IgE五大類。動物體內(nèi)一方面浮現(xiàn)免疫球蛋白是IgM,但消失較快;IgG是哺乳動物血清中占比最大、最重要免疫球蛋白。

181、IgG是唯一可以通過胎盤免疫球蛋白,具備抗菌、抗病毒作用,亦是抗毒素重要免疫球蛋白,能中和毒素使其失去活性。

182、IgG與抗原結(jié)合能浮現(xiàn)沉淀反映、凝集反映補體結(jié)合反映和中和反映。

183、IgG經(jīng)木瓜酶水解斷裂為三個大小相似斷片。其中兩個斷片可與抗原結(jié)合,稱為抗原結(jié)合片斷(Fab段),另一斷片可結(jié)晶,稱為結(jié)晶片斷(Fc段)。

184、抗體初次應答具備特點是抗體含量低、維持時間短。

185、抗體再次應答特性是有短暫陰性期、抗體峰值高且維持時間長。

186、抗原具備免疫原性與反映原性。免疫原性指抗原能刺激機體產(chǎn)生抗體和效應淋巴細胞;反映原性指抗原與相應抗體或致敏淋巴細胞發(fā)生反映特性。

187、補體是正常人和動物血清中一組不耐熱具備酶活性球蛋白。

188、疫苗分類辦法有各種,涉及活苗和滅活苗、聯(lián)苗與多價苗、寄生蟲疫苗、類毒素、亞單位組份苗和基因工程苗等。

189、疫苗佐劑分類及慣用佐劑:

(1)不溶性鋁鹽類佐劑,重要是氫氧化鋁膠,另一方面是明礬及磷酸三鈣等。

(2)油水乳劑佐劑,此類佐劑最知名有弗氏佐劑。

(3)蜂膠佐劑,蜂膠是蜜蜂采自柳樹、楊樹、栗樹和其她植物幼芽分泌樹脂,并混入蜜蜂上顎腺分泌物,以及蜂臘、花粉及其她某些有機與無機物一種天然物質(zhì)。

(4)微生物及其代謝產(chǎn)物佐劑,如結(jié)核桿菌,破傷風類毒素和分枝桿菌細胞壁某些成分等。

(5)人工合成佐劑,如海藻糖合成衍生物等。

(6)其她類型佐劑,如免疫刺激復合物佐劑、細胞因子類佐劑、非離子阻斷共聚物表面活性劑佐劑、核酸及其類似物佐劑和左旋米唑佐劑等。

190、活苗與滅活苗優(yōu)缺陷:

(1)活疫苗長處:

類似自然感染過程,在機體內(nèi)可復制增殖,免疫作用時間長,一次免疫可產(chǎn)生持久免疫;免疫效果牢固,可形成局部和全身免疫;除注射接種外,可采用自然感染途徑(如口服、噴霧等)進行免疫。

(2)活疫苗缺陷:

不穩(wěn)定,不易于保存和運送;易受光和熱影響;疫苗容易受到不利因子污染;受循環(huán)抗體、病毒等因素影響,所有干擾病原微生物在體內(nèi)繁殖因素,都可引起疫苗免疫失敗;在體內(nèi)有毒力返祖或返強潛在危險。

(3)滅活疫苗長處:

穩(wěn)定,易于保存和運送;不受循環(huán)抗體影響;安全性好,能殺滅任何也許污染疫苗生物因子。

(4)滅活疫苗缺陷:

在疫苗滅活過程中也許損害或變化有效抗原決定簇,需多次注射,并要進行加強免疫;產(chǎn)生免疫效果維持時間短,不產(chǎn)生局部抗體;只能通過注射方式(普通為肌內(nèi)注射)接種。

191、疫苗運送和儲存應防止高溫、暴曬和重復凍融。192、疫苗運送與保存應注意事項:

疫苗運送時應注意包裝嚴密,盡量縮短運送時間。疫苗由于種類不同,在運送和保存過程中,對其溫度規(guī)定也不相似。疫苗在運送和保存中應避免強光、曝曬、高溫導致?lián)p壞。應使用正規(guī)疫苗運送工具,或裝入有冰決保溫瓶或桶內(nèi)將疫苗運到目地。途中避免日曬或其她高溫。禽流感、口蹄疫、豬藍耳病滅活疫苗,最適當溫度為:2-15℃,長期保存溫度為2-8℃;豬瘟兔化弱毒凍干苗保存溫度為:-15℃,可保存一年。詳細狀況應仔細閱讀各種疫苗闡明書。瓶口開封后疫苗不能再保存,特別是弱毒疫苗。

193、免疫程序內(nèi)容及要素:

免疫程序內(nèi)容要涉及疫苗接種時間、接種辦法、使用劑量、間隔時間、接種次數(shù)等,根據(jù)動物品種、年齡、疫苗種類等要素進行制定。

194、免疫程序制定根據(jù):

(1)本地疾病流行狀況及其規(guī)律。

(2)依照畜禽種類、用途、飼養(yǎng)管理條件、畜禽及其產(chǎn)品上市旺季。

(3)母源抗體水平。

(4)疫苗種類、性質(zhì)、免疫途徑及免疫期。

195、屬于嚴格細胞內(nèi)寄生微生物是衣原體、支原體、病毒。

196、核酸是微生物遺傳物質(zhì)。

197、菌血癥、敗血癥、膿毒血癥概念:

菌血癥系指細菌侵入到機體血液中但全身無中毒癥狀;敗血癥系指致病菌或條件致病菌侵入血液循環(huán),并在血液中生長繁殖,產(chǎn)生毒素而發(fā)生急性全身性感染;膿毒血癥系指機體發(fā)生敗血癥,并伴有多發(fā)性膿腫且病程較長。

198、細菌基本形態(tài)涉及球狀、桿狀和螺旋狀。

199、革蘭氏染色法通過乙醇脫色、復染環(huán)節(jié)后,革蘭氏陰性菌呈現(xiàn)紅色,革蘭氏陽性菌呈現(xiàn)藍紫色。

200、常用革蘭氏陽性菌有葡萄球菌、鏈球菌、炭疽桿菌、破傷風桿菌、分枝結(jié)核桿菌等。

201、常用革蘭氏陰性菌有大腸桿菌、沙門氏菌、布氏桿菌等。

202、大某些細菌生長最適pH是7.2～7.6。

203、單個細菌是肉眼看不見,但細菌群體(菌落)是肉眼可見。

204、光滑型菌落菌落性狀為光滑、濕潤、邊沿整潔。

205、不是所有細菌都具備致病性。

206、細菌莢膜成分經(jīng)常是構(gòu)成細菌毒力因素之一。

207、細菌芽胞對外界不良理化因素抵抗力較細菌繁殖體強得多。

208、炭疽桿菌為致病菌中最大革蘭氏陽性桿菌,在感染動物體內(nèi)時,形態(tài)上普通是有莢膜、無芽胞。

209、炭疽桿菌在動物體外可形成芽孢,其芽孢抵抗力很強,在動物、尸體及其污染環(huán)境和泥土中存活近年。

210、由于炭疽桿菌能在體外形成芽胞,因此炭疽病死畜普通不能進行剖檢。

211、雞馬立克氏病慣用血清學診斷辦法為瓊脂擴散實驗。

212、酵母為真菌一種,屬于真核微生物。

213、顯微鏡觀測結(jié)核桿菌需用抗酸染色法染色,可用于初步診斷。

214、典型支原體菌落呈荷包蛋樣。

215、大腸桿菌在麥康凱培養(yǎng)基上形成紅色菌落,該培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基。

216、典型大腸桿菌菌落性狀為光滑、濕潤、邊沿整潔。

217、引起斷奶仔豬水腫病病原體是大腸桿菌。

218、引起雞白痢病原體是沙門氏菌。

219、引起禽霍亂病原體是多殺性巴氏桿菌。

220、能引起羊流產(chǎn)流行性病原有布氏桿菌、沙門氏菌、焦蟲等。

221、豬喘氣病病原是豬肺炎支原體。

222、支原體能進行人工培養(yǎng)。

223、動物病原性細菌培養(yǎng)溫度大多數(shù)為37℃。

224、培養(yǎng)基是指由人工辦法配合而成營養(yǎng)基質(zhì),專供微生物培養(yǎng)、分離、鑒別、研究和保存菌種用混合營養(yǎng)制品。

225、制備細菌培養(yǎng)基普通程序:

稱量、加熱、溶解、調(diào)酸堿度、過濾、滅菌、分裝。

226、細菌培養(yǎng)基按照用途可分為基本培養(yǎng)基、營養(yǎng)培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基、選取培養(yǎng)基和厭氧培養(yǎng)基。

227、對懷疑為細菌性傳染病病料進行細菌分離時,采集樣品應分別放入滅菌容器內(nèi)或滅菌塑料袋內(nèi)貼上標簽,及時冷藏運送到實驗室,若不能及時運送可以暫時凍結(jié)解決,以免被雜菌污染,但凍結(jié)時間不適當過長。228、細菌類疾病診斷環(huán)節(jié):

(1)細菌檢查、形態(tài)檢查:

取致死畜禽組織或血液制成血液涂片或組織觸片,經(jīng)染色,然后在顯微鏡下觀測,對于某些具備特性形態(tài)病原體,可鑒別。

復染色法:如革蘭氏染色法。

(2)細菌分離培養(yǎng):

細菌分離:用人工培養(yǎng)辦法將細菌從病料或某一種菌落移植到新培養(yǎng)基中培養(yǎng)分離出來,稱細菌分離。

細菌生長體現(xiàn):在固體培養(yǎng)基上生長成菌落,應觀測其大小、形狀、顏色、透明度、隆起度、濕潤度、光滑度、有無溶血狀況等;細菌在液體培養(yǎng)基內(nèi)呈擴散生長,體現(xiàn)為渾濁、沉淀、形成菌環(huán)、細菌膜等。

(3)細菌生化實驗:通過生物化學辦法細菌代謝產(chǎn)物進行測定,用來區(qū)別和鑒定細菌種類。

(4)動物實驗:將細菌接種于動物,通過動物癥狀、病理變化、染色、細菌培養(yǎng)、生物化學實驗、免疫學技術(shù),用來檢查細菌。

(5)免疫學診斷:凝集實驗,沉淀實驗,補體結(jié)合實驗。

229、炭疽病微生物學診斷辦法:

疑似炭疽死亡動物尸體,應盡快自末梢血管(耳尖、尾尖等)采血,涂片染色鏡檢,取血后應及時用烙鐵將創(chuàng)口烙焦,以止血封口。由于病尸體內(nèi)炭疽桿菌暴露于空氣中,接觸了氧,氣溫又不適當其生長時,就會形成芽孢,因此尸體禁止剖檢。

(1)涂片鏡檢取標本涂片進行革蘭氏染色,發(fā)既有莢膜呈竹節(jié)狀排列革蘭氏陽性大桿菌,結(jié)合臨床癥狀可作出初步診斷。陳舊病料可以看到“菌影”,確診須做分離培養(yǎng)和動物接種。

(2)分離培養(yǎng)取病料接種普通瓊脂或血液瓊脂,37℃培養(yǎng)18-24h,觀測有無典型炭疽桿菌菌落,同步革蘭氏染色鏡檢。

(3)動物實驗將待檢材料或培養(yǎng)物用生理鹽水做恰當稀釋和磨勻后,皮下注射小鼠0、1-0、2ml,如為炭疽,多在18-24h因敗血病死亡。剖檢可見注射部位皮下膠樣水腫,脾臟腫大。取臟器涂片鏡檢,如發(fā)既有莢膜竹節(jié)狀大桿菌,可確診。

(4)血清學實驗慣用炭疽環(huán)狀沉淀實驗(Ascoli氏反映)。辦法是:在一支小玻璃管內(nèi)把疑為炭疽病死亡動物尸體組織浸出液與特異性炭疽沉淀素血清重疊,若二液接觸面產(chǎn)生灰白色沉淀環(huán),即可診斷。

230、病毒是最小微生物,其構(gòu)造簡樸,體現(xiàn)為無完整細胞構(gòu)造,僅有一種核酸(DNA或RNA)作為遺傳物質(zhì)。核酸屬于DNA病毒有偽狂犬病病毒、馬立克氏病病毒、細小病毒、圓環(huán)病毒、產(chǎn)蛋下降綜合征病毒、痘病毒等。核酸屬于RNA病毒有豬瘟病毒、口蹄疫病毒、豬藍耳病病毒、新城疫病毒、禽流感病毒、禽白血病病毒、法氏囊病毒、狂犬病病毒等。

231、病毒只能在活細胞體內(nèi)復制。

232、病毒復制過程普通順序是吸附、侵入、脫殼、生物合成、裝配和釋放。

233、包涵體是某些細胞受病毒感染后浮現(xiàn)特殊斑塊構(gòu)造。

234、病毒培養(yǎng)辦法和特點:

(1)動物接種:病毒經(jīng)注射、口服等途徑進入易感動物體內(nèi)后可大量增殖,并使動物產(chǎn)生特定反映。其長處是操作以便易行,缺陷是受機體免疫力影響,常需要用無菌動物。慣用于分離、增殖病毒,疫苗效力實驗,疫苗和抗血清生產(chǎn)。

(2)雞胚培養(yǎng):普通用9-12日齡雞胚,分別接種于卵黃囊內(nèi),羊膜腔,尿囊腔等部位。病毒生長標志為雞胚死亡、畸型和出血。用于病毒分離與疫苗生產(chǎn)。

(3)組織培養(yǎng):在離體活細胞上培養(yǎng)病毒辦法

(4)組織塊培養(yǎng):取組織片(如一段胎兒氣管或一小塊鼻黏膜)進行培養(yǎng)。

(5)細胞培養(yǎng):病毒感染細胞后,大多數(shù)引起細胞病變,稱為病毒致細胞病變作用。體現(xiàn)為細胞變形,胞漿內(nèi)浮現(xiàn)顆?；?核濃縮、核裂解等。

235、觀測病毒慣用辦法是使用電子顯微鏡觀測。

236、病毒血凝與血凝抑制實驗屬于凝集實驗。

237、無囊膜病毒有口蹄疫病毒、圓環(huán)病毒、細小病毒等。

238、可以引起懷孕豬流產(chǎn)病原有豬繁殖與呼吸綜合癥病毒、圓環(huán)病毒、布氏桿菌等。

239、口蹄疫病毒重要感染偶蹄獸。

240、口蹄疫病毒分型及其對溫度抵抗力特點:

口蹄疫病毒有7個血清型,分別命名為O、A、C、SAT1、SAT2、SAT3以及亞洲1型。各型之間幾乎沒有交叉免疫力,同一型之間又有不同亞型。國內(nèi)流行重要有O、A、C型?？谔阋卟《驹诘蜏啬荛L期保存,但易被熱滅活。241、口蹄疫病毒可感染動物種類多達33種,但以偶蹄動物易感性較高,從易感性高低順序排列為黃牛、牦牛、水牛、綿羊、山羊、駱駝和豬。

242、雞新城疫病毒接種雞胚部位是絨毛尿囊腔。

243、雞傳染性法氏囊炎病毒、雞傳染性貧血病毒能導致感染雞發(fā)生免疫抑制。

244、具備凝集雞紅細胞特性病毒有禽流感病毒、雞新城疫病毒等。

245、瘋牛病(牛海綿狀腦病)病原是朊病毒,它本質(zhì)上不是老式意義病毒,它沒有核酸,是有傳染性蛋白質(zhì)顆粒。

246、機體內(nèi)病毒感染體現(xiàn)形式和成果由病毒、機體和環(huán)境條件三者綜合伙用決定。

247、病毒血凝現(xiàn)象及其在診斷上重要意義:

許多病毒表面有血凝素,能與雞、豚鼠紅細胞表面受體結(jié)合,而浮現(xiàn)紅細胞凝集現(xiàn)象,簡稱病毒血凝現(xiàn)象。當加入與病毒相特異抗體時,則抑制了病毒凝集紅細胞特性。例如:用于診斷雞新城疫、禽流感、流行性乙型腦炎等。

248、病毒鑒定慣用辦法:

中和實驗、補體結(jié)合實驗、病毒紅細胞凝集和紅細胞凝集抑制實驗、熒光抗體實驗、免疫酶標記技術(shù)和免疫擴散實驗、聚合酶鏈式反映(PCR)和基因序列分析。

249、雞新城疫病毒分離鑒定環(huán)節(jié):

(1)病料采集和解決:可采集病雞呼吸道分泌物、脾臟、血液、腦組織,按1:5比例加入滅菌生理鹽水或緩沖液,用研磨器將組織研碎制成20%懸液,重復凍融2-3次,5000r/min離心20分鐘,取上清液,用滅菌濾器過濾除菌或加抗生素殺滅病料中雜菌。

(2)分離培養(yǎng):將解決好病料經(jīng)尿囊腔接種9-11日齡無母源抗體雞胚,37℃孵育,每天照蛋2次,棄除24小時內(nèi)死亡胚,收集24-96小時死亡胚,96小時內(nèi)未死亡胚取出。

(3)收集雞胚尿囊液采用血凝實驗檢查與否有血凝活性,對有血凝活性分離物應用原則抗新城疫病毒,采用血凝抑制血清學實驗對病毒進行鑒定。

擬定為新城疫病毒后對病毒致病性做進一步鑒定----致病性實驗。

250、在一定期間內(nèi)能使特定動物發(fā)生半數(shù)死亡最小微生物量或毒素量,稱為半數(shù)致死量(LD50)。

251、在一定期間內(nèi)能使特定動物在感染后所有死亡最小微生物或毒素量,稱為最小致死量。

252、在一定期間內(nèi)能使特定動物發(fā)生半數(shù)感染最小微生物量或毒素量,稱為半數(shù)感染量。

253、熱空氣滅菌法慣用溫度和維持時間是160℃,2-3小時。

254、干烤滅菌法慣用溫度和維持時間160℃,2-3小時。

255、高壓蒸汽滅菌采用溫度和時間是121℃,15-20分鐘。

256、濕熱穿透力比干熱強,因此濕熱滅菌效果更好。

257、消毒劑對動物機體細胞和微生物均有毒性。

258、巴氏消毒法:

運用高溫殺死物品中病原菌或普通雜菌,同步又不致嚴重損害食品質(zhì)量。加溫61-63℃加熱30min,或71-72℃加熱15-30s,然后迅速冷卻到10℃左右,可將其中非芽孢病原菌殺死。慣用于葡萄酒、啤酒及牛奶等食品消毒。

259、影響血清學實驗因素:

(1)電解質(zhì):為了促使沉淀物或凝集物形成,慣用生理鹽水或各種緩沖液(PBS)作為抗原和抗體稀釋液或反映液。但電解質(zhì)濃度不適當過高,否則會浮現(xiàn)鹽析現(xiàn)象。

(2)溫度:在一定溫度范疇內(nèi),溫度越高,抗原、抗體分子運動速度越快。適當溫度可增長抗原、抗體活性及互相接觸機會,如凝集和沉淀反映普通在37℃水浴感作。

(3)pH:血清學實驗規(guī)定在一定pH下進行,慣用pH值為6～8,過高或過低,均可使已結(jié)合抗原抗體復合物重新解離。若pH降至抗原或抗體等電點時,會發(fā)生非特異性酸凝集,導致假象。

(4)振蕩:恰當機械振蕩能增長分子或顆粒間互相碰撞,加速抗原抗體結(jié)合反映,但強烈振蕩可使抗原抗體復合物解離。

(5)雜質(zhì)和異物:實驗介質(zhì)中如有與反映無關(guān)雜質(zhì)、異物(如蛋白質(zhì)、類脂質(zhì)、多糖等物質(zhì))存在時,會抑制反映進行或引起非特異性反映,故每批血清學實驗都應設陽性對照和陰性對照實驗。

260、免疫血清學檢測技術(shù)涉及免疫非標記技術(shù)和免疫標記技術(shù)。免疫非標記技術(shù)重要涉及凝聚性反映(凝集實驗、沉淀實驗)、補體結(jié)合實驗、中和實驗(病毒中和實驗、毒素中和實驗);免疫標記技術(shù)涉及標記熒光素、酶分子、金屬顆粒、乳膠顆粒、放射性同位素等。

261、凝集實驗是細菌、紅細胞等顆粒性抗原與相應抗體結(jié)合,在有恰當電解質(zhì)存在下,形成肉眼可見凝集團塊實驗,分為直接凝集實驗與間接凝集實驗。參加抗體重要為IgG、IgM。凝集實驗可用于檢測抗原或抗體,長處是操作簡便。262、直接凝集實驗與間接凝集實驗區(qū)別:

(1)直接凝集實驗是顆粒性抗原與凝集素直接結(jié)合并浮現(xiàn)凝集現(xiàn)象實驗。按操作辦法可分玻片法和試管法兩種。

(2)間接凝集實驗是將可溶性抗原(或抗體)吸附在不溶性顆粒載體表面,與相應抗體(或抗原)作用,在電解質(zhì)存在條件下,浮現(xiàn)特異性凝集反映。間接凝集實驗敏感性高,比直接凝集反映敏感2-8倍。

二、動物傳染病及流行病學調(diào)查基本知識

263、傳染病是由病原微生物引起,具備一定潛伏期和臨床癥狀并具備傳染性疾病。

264、傳染病流行過程三個基本環(huán)節(jié)是傳染源、傳播途徑和易感動物。

265、動物傳染病重要發(fā)展階段為潛伏期、前驅(qū)期、明顯期(發(fā)病期)和轉(zhuǎn)歸期。

266、垂直傳播是從親代到其子代之間縱向傳播形式,傳播途徑涉及:胎盤傳播、經(jīng)卵傳播和產(chǎn)道傳播。如:豬瘟、禽白血病、雞白痢等。

267、隱性感染是指動物已經(jīng)感染病原但未有臨床癥狀。

268、外表健康,但通過病原學檢測為陽性動物,該動物是帶毒動物。

269、傳染源是指在體內(nèi)有病原體寄生、生長、繁殖,并能排出體外動物。

270、疫源地是傳染源及其排出病原體存在地區(qū)。

271、SPF動物是指無特定病原體動物。

272、病毒持續(xù)感染是動物長期或終身帶毒、但無明顯臨床癥狀感染。

273、在動物傳染病流行過程中,依照在一定期間內(nèi)發(fā)病率高低和傳播范疇大小(即流行強度),可分為四種體現(xiàn)形式:

(1)散發(fā)性:發(fā)病數(shù)目不多,在一種較長時間里只有個別零星發(fā)生,稱為散發(fā)。

(2)地方流行性:在一定地區(qū)或畜禽群中,發(fā)病動物數(shù)量較多,但傳播范疇不大,帶有局限性傳播特性。

(3)流行性:是指在一定期間內(nèi),一定畜禽群浮現(xiàn)比尋常為多病例,疾病發(fā)生頻率較高一種相對名詞。

(4)大流行性:發(fā)病數(shù)量大,流行范疇可達幾種省甚至或幾種國家。274、死亡率是指某病病死數(shù)占某種動物總頭數(shù)比例。

275、動物防疫工作基本原則是防止為主,防重于治。

276、動物檢疫是對動物及其制品進行疫病檢查。通過動物檢疫,對可疑或已證明疫病對象實行強制隔離,或作出恰當解決,目是防止動物傳染病傳播,保障畜牧業(yè)生產(chǎn)和人民健康。

277、終末消毒是指疫點最后一頭(只)病畜(禽)痊愈或死亡后,在疫區(qū)解除封鎖前,為消滅疫區(qū)內(nèi)也許殘留病原體所進行全面徹底大消毒。

278、馬屬動物不會感染口蹄疫。

279、結(jié)核桿菌病特性是漸進性消瘦和各種組織器官形成特殊結(jié)節(jié)。

280、豬支原體肺炎是由支原體科豬肺炎支原體引起一種接觸性、慢性、消耗性呼吸道傳染病,俗稱豬喘氣病。

281、偽狂犬病其特性為發(fā)熱、奇癢及腦脊髓炎。但是成年豬常為隱性感染,可有流產(chǎn)、死胎及呼吸系統(tǒng)癥狀。

282、禽流感潛伏期從數(shù)小時到數(shù)天,最長可達21天。

283、口蹄疫是由口蹄疫病毒引起偶蹄獸一種急性、熱性、高度接觸性傳染病,該病臨診特性是傳播速度快、流行范疇廣,成年動物口腔黏膜、蹄部和乳房等處皮膚發(fā)生水泡和潰爛,幼齡動物多因心肌炎使其死亡率升高。

284、高致病性豬藍耳病是由豬繁殖與呼吸綜合癥病毒變異株引起豬一種急性高致死性傳染病,仔豬發(fā)病率可達100%、死亡率可達50%以上,母豬流產(chǎn)率可達30%以上,育肥豬可發(fā)病死亡是其特性。

285、新城疫是由新城疫病毒感染家禽引起急性、高度接觸性傳染病,是國內(nèi)規(guī)定一類動物疫病,本病春季多發(fā)。

286、新城疫典型病理變化:

出血和壞死,特別以消化道和呼吸道最為明顯。腺胃乳頭和乳頭間有出血點,或有潰瘍和壞死,肌胃角質(zhì)層下也常用有出血點,氣管、直腸粘膜多見出血。

287、新城疫重要傳染源是病雞和帶毒雞。

288、新城疫自然感染途徑重要經(jīng)呼吸道和消化道,另一方面是眼結(jié)膜,也可經(jīng)外傷及交配傳染。

289、雞新城疫病流行特點:

一年四季均可發(fā)生,特別在春初、秋冬季節(jié)變換時易發(fā)。流行時以雞易感性最高,鴿子、鵪鶉、鸚鵡、火雞、鵝、鴨、鴕鳥等都可感染發(fā)病。其中鴿子和鸚鵡對本病流行起著很核心作用。病死雞是本病重要傳染源。健康雞接觸病雞及其排泄物、分泌物、污染飼料、飲水、墊料等,通過呼吸道、眼結(jié)膜以及消化道感染發(fā)病。290、豬瘟臨床剖檢特性性病理變化:

體表有紫斑或出血點,淋巴結(jié)周邊出血,呈大理石樣變,脾臟出血性梗死,盲腸、回腸、結(jié)腸內(nèi)形成紐扣狀腫脹,腎臟表面有針尖狀出血,嚴重時呈麻雀卵樣變化,膀胱粘膜有針尖狀出血。

291、炭疽特性病變:

天然孔出血,血液凝固不良,敗血癥變化,脾臟明顯腫大和皮下、漿膜下結(jié)締組織出血性膠樣浸潤。

292、禽流感傳播途徑涉及:

病禽和健康禽直接接觸傳播、病毒污染物和健康禽間接接觸傳播兩種。家禽重要通過呼吸道和消化道感染。

禽流感病毒存在于病禽和感染禽消化道、呼吸道和禽體臟器組織中。因而病毒可隨眼、鼻、口腔分泌物及糞便排出體外,含禽病毒分泌物、糞便、死禽尸體污染任何物體都能成為間接接觸傳播媒介,如飼料、飲水、雞舍、空氣、籠具、飼養(yǎng)管理用品、運送車輛、昆蟲以及各種攜帶病毒鳥類等均可機械性傳播。

293、高致病性禽流感流行特點:

高致病性禽流感病毒與普通流感病毒相似,一年四季均可流行,但在冬季和春季容易流行,因而禽流感病毒在低溫條件下抵抗力較強。各品種和不同日齡禽類均可感染高致病性禽流感,發(fā)病急、傳播快,其致死率可達100％。

294、牛結(jié)核病流行特點:

本病奶牛最易感,另一方面為水牛、黃牛、牦牛。人也可被感染。結(jié)核病病牛是本病重要傳染源。牛型結(jié)核分枝桿菌隨鼻汁、痰液、糞便和乳汁等排出體外,健康?？赏ㄟ^被污染空氣、飼料、飲水等經(jīng)呼吸道、消化道等途徑感染。

295、牛結(jié)核病以肺結(jié)核、乳房結(jié)核和腸結(jié)核最為常用。

296、馬傳染性貧血病特性性臨床癥狀:

臨床重復發(fā)作,呈現(xiàn)發(fā)熱并伴有貧血、出血、黃疸、心衰、浮腫和消瘦等癥狀。

297、能引起母豬流產(chǎn)、死胎重要疫病:

豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合癥、細小病毒病、豬偽狂犬病、日本乙型腦炎、布魯氏菌病、豬弓形蟲病等。

298、能引起豬呼吸道疾病重要病原體:

(1)豬肺炎支原體(引起豬喘氣病);

(2)胸膜肺炎放線桿菌(引起