玉米種子鹽溶蛋白聚丙烯酰胺凝膠電泳試劑配制_第1頁
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文檔簡介

種子生產(chǎn)與經(jīng)營專業(yè)玉米種子鹽溶蛋白聚丙烯酰胺凝膠電泳試劑配制一、試劑

丙烯酰胺、N、N-亞甲基雙丙烯酰胺、乳酸、乳酸鈉、甘氨酸、抗壞血酸、硫酸亞鐵、氯化鈉、蔗糖、甲基綠、三氯乙酸、過氧化氫、考馬斯亮蘭R-250、無水乙醇、正丁醇等（所用試劑均為分析純，所用水均為去離子水）。一、試劑一、試劑一、試劑一、試劑二、試劑配制1、玉米鹽溶蛋白提取液稱取氯化鈉5.8g，蔗糖200g，甲基綠0.15g，到入1000ml燒杯中，加去離子水約800ml溶解，加熱至微沸、放冷，用新煮過的去離子水定容至1000ml。放冰箱中保存。提取液二、試劑配制2、分離膠緩沖液

取1.43ml乳酸鈉于1000ml燒杯中，加水約980ml，用乳酸調(diào)至PH3.0，定容至100ml，貯于棕色瓶中，低溫保存。3、分離膠溶液

稱取丙烯酰胺112.5g，N.N-亞甲基雙丙烯酰胺3.75g，抗壞血酸0.250g，硫酸亞鐵8.0mg，用分離膠緩沖液溶解，定容至1000ml。過濾于棕色瓶中，低溫保存（不超過兩周）。二、試劑配制4、濃縮膠緩沖液

取0.30ml乳酸鈉于200ml燒杯中，加水約90ml，用乳酸調(diào)至PH5.2，定容至100ml，貯于棕色瓶中，低溫保存。5、濃縮膠溶液

稱取丙烯酰胺6.0g，N、N-亞甲基雙丙烯酰胺1.00g，抗壞血酸0.030g，硫酸亞鐵0.8mg，用濃縮膠緩沖液溶解，定容至100ml。貯于棕色瓶中，低溫保存（不超過一周）。二、試劑配制

6、3%過氧化氫

取30%的過氧化氫1ml，加9ml去離子水。貯于棕色瓶中，低溫保存。3%過氧化氫二、試劑配制7、電極緩沖液

稱取甘氨酸6.0g，到入200ml燒杯中，加入約1800ml去離子水（或蒸餾水）溶解，用2.0ml乳酸調(diào)至PH3.3，加水定容至2000ml，混勻。二、試劑配制8、染色液

稱取考馬斯亮蘭R2502.0g倒入研缽中，用100ml無水乙醇多次研磨溶解，用漏斗過濾于棕色瓶中。取10ml該溶液，加入到200ml10%(m/v)的三氯乙酸溶液中，混勻。根據(jù)

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