免疫組化應用

關于免疫組化應用第1頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月免疫組化介紹

免疫組化原理Enlivision染色方法免疫組化的使用范圍各系統(tǒng)腫瘤的抗體表達第2頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月免疫組化的原理根據抗原和抗體特異性反應的免疫學原理，應用標記抗體檢測組織中未知抗原的方法?？乖?抗體（標記）→抗原抗體復合物通過抗原和抗體的特異性結合檢測組織中的化學成分（蛋白—抗原）顯示系統(tǒng)：抗原抗體復合物+檢測系統(tǒng)將二抗和酶通過一個多聚葡聚糖骨架聯(lián)接成一個多聚體（即EnVision）第3頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月PrimaryAntibodyPolymercomplexSubstrate-chromogensolutiontissue第4頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月Enlivision染色方法(1)、將切片撈至APES膠片上，放入60℃溫箱中烘烤1小時。(2)、經二甲苯脫蠟，梯度酒精脫水后流水沖洗。(3)、過3％H2O2中20min后流水沖洗。(4)、修復高火3min后，低火15min后，自然冷卻至室溫。(5)、取出玻片放至濕盒，PBS沖洗，3minx3。擦干玻片，每張玻片加1滴或50μl的第一抗體40min。(6)、PBS沖洗，3minx3。擦干玻片，每張玻片加1滴或50μl的聚合物增強劑(試劑A），室溫孵育20min。(7)、PBS沖洗，3minx3。擦干玻片，每張玻片加1滴或50μl的酶標鼠/兔聚合物(試劑B），室溫下孵育30min。(8)、PBS沖洗，3minx3。擦干玻片，每張玻片加2滴或100μl的DAB液，顯微鏡下觀察，10min顯色。(9)、流水沖洗，蘇木素復染1-2min，0.1％鹽酸分化，自來水沖洗后返藍。(10)、梯度酒精脫水干燥，二甲苯透明，中性樹膠封片。第5頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月免疫組化的使用范圍組織學標本中的應用細胞塊中的應用第6頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月各系統(tǒng)腫瘤的抗體表達對腫瘤進行來源分類

上皮性腫瘤的標記物CK間葉腫瘤的標記物Vimentin淋巴造血系統(tǒng)腫瘤的標記物LCA神經內分泌腫瘤的標記物Syn、CgA、CD56各系統(tǒng)腫瘤的抗體表達第7頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月上皮性腫瘤中的腺癌第8頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月CK7+CK20-Villin+Villin-可見于：胃腺癌(41.67%)、乳頭狀腎細胞癌(17.39%)、乳腺浸潤性導管癌(5.36%)、卵巢漿液性腺癌(3.7%)少見于：肺鱗癌、肺腺癌、肺小細胞癌、腎透明細胞癌、嫌色細胞癌、前列腺癌、直腸腺癌、乳腺浸潤性小葉癌、卵巢粘液性癌?？梢娪冢喝橄俳櫺托∪~癌(100%）、肺腺癌(95.83%）、乳腺浸潤型導管癌(78.57%)、卵巢漿液性腺癌(70.37%）、嫌色細胞癌(66.67%）、卵巢粘液性腺癌(37.5%）、肺鱗癌(11.43%）、前列腺癌(9.09%）、直腸腺癌(2.78%）、胃腺癌(2.78%）、腎透明細胞癌(2.33%）。少見于：肺小細胞癌、乳頭狀腎細胞癌。第9頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月CK7+CK20+Villin+Villin-可見于：胃腺癌(13.89%）、卵巢粘液性腺癌(12.5%）、直腸腺癌(5.56%），乳頭狀腎細胞癌(4.35%）少見于：肺鱗癌、肺腺癌、肺小細胞癌、腎透明細胞癌、腎嫌色細胞癌、乳腺癌、卵巢漿液性癌。可見于：卵巢粘液性腺癌(12.5%）乳腺浸潤性導管癌(3.57%）、胃腺癌(2.78%）、直腸腺癌(2.78%）。少見于：肺鱗癌、肺腺癌、肺小細胞癌、腎透明細胞癌、乳頭狀腎細胞癌、嫌色細胞癌、前列腺癌、乳腺浸潤性小葉癌、卵巢漿液性癌。第10頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月CK7-CK20-Villin+Villin-可見于：乳頭狀腎細胞癌(43.47%）、胃腺癌(18.06%）、直腸腺癌(16.67%）、卵巢粘液腺癌(12.5%）、嫌色細胞癌(11.11%）、前列腺癌(4.54%）。少見于：肺鱗癌、肺腺癌、肺小細胞癌、腎透明細胞癌、乳腺浸潤型導管癌、乳腺浸潤性小葉癌、卵巢漿液性癌。可見于：肺小細胞癌(100%）、腎透明細胞癌(42/43，97.67%）肺鱗癌(88.57%）、前列腺癌(86.36%）、乳頭狀腎細胞癌(34.78%）、嫌色細胞癌(22.22%）、卵巢漿液腺癌(18.52%）、乳腺浸潤型導管癌(16.07%）、胃腺癌(13.89%）、直腸腺癌(5.56%）、肺腺癌(4.17%）。少見于：乳腺浸潤性小葉腺癌、卵巢粘液腺癌。第11頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月CK7-CK20+Villin+Villin-可見于：直腸腺癌(52.78%)、卵巢粘液性腺癌(25%)、胃腺癌(6.94%)、卵巢漿液性癌(3.7%）。少見于：肺鱗癌、肺腺癌、肺小細胞癌、腎透明細胞癌、乳頭狀腎細胞癌、嫌色細胞癌、前列腺癌、乳腺浸潤性導管癌、乳腺浸潤性小葉癌?？梢娪冢褐蹦c腺癌(13.89%）、卵巢漿液性腺癌(3.7%）。少見于：肺鱗癌、肺腺癌、肺小細胞癌、腎透明細胞癌、乳頭狀腎細胞癌、嫌色細胞癌、前列腺癌、乳腺浸潤性導管癌、乳腺浸潤性小葉癌、卵巢粘液性癌、胃腺癌第12頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月1、軟組織第13頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月小圓細胞腫瘤

CKVimEMALCANSECgADesS-100小細胞未分化癌+-+-----神經內分泌癌+-+-++--神經母細胞瘤-+--++-+/-尤文肉瘤/PNET-+--++-+/-胚胎性橫紋肌肉瘤-+----+-惡性淋巴瘤---+----惡性黑色素瘤-+---/+--+(HMB45+)CK、Vim、NSE、CgA、Des、HMB45胞漿

EMA胞膜/胞漿LCA胞膜S-100胞核/漿第14頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月間皮：EMA、Calretinin陽性橫紋?。篋esmin(+)Actin、MyoD1（弱+）Myglobin血管：CD31、CD34陽性顆粒細胞瘤：S-100、NSE第15頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月CD34Bcl-2S-100神經纖維瘤+++孤立性纖維性腫瘤++-滑膜肉瘤-+-孤立性纖維性腫瘤CD99+滑膜肉瘤CK、Vimentin雙陽第16頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月2、乳腺

P63CK5/6E-cad34βE12導管原位癌+-+-浸潤性導管癌--+-浸潤性小葉癌---+P63胞核CK5/6胞漿E-cad胞漿、胞膜34βE12胞漿

第17頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月乳腺病理ER、PR顯示腫瘤的內分泌表達，與腫瘤的內分泌治療反應率相關CerbB-2腫瘤相關因子，靶向治療KI-67顯示細胞增殖指數ER、PR胞核CerbB-2胞膜KI-67胞核第18頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月

中間型上皮成熟型

CK5/6+,CK8/18+CK5/6-,CK8/18+干細胞CK5/6+,CK8/18-SMA-,P63-中間型肌上皮成熟型

CK5/6+,SMA+,P63+CK5/6-,SMA+,P63+CK5/6,CK8/18，SMA胞漿P63胞核第19頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月CerbB-2的染色意義陽性強度的判斷：強的著色是指4x或10x物鏡下易于觀察到，弱的強的著色是指需要用40x物鏡觀察。第20頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月CerbB-2與治療及預后的關系不僅與浸潤型乳腺癌的不良預后有關，并能預測多種化療藥機內分泌治療的敏感性。靶向藥物赫賽汀第21頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月CerbB-2的染色意義0+浸潤性腫瘤細胞無著色1+任何比例的浸潤性腫瘤細胞呈弱而不完整的包膜著色或＜10%的腫瘤細胞呈弱且完整著色2+≥10%的腫瘤細胞呈現(xiàn)弱或不一致的、完整的包膜著色；或≤30%的腫瘤細胞呈現(xiàn)強且完整的包膜著色3+＞30%的浸潤性腫瘤細胞呈強且完整包膜著色第22頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月指導治療ER,PR,CerbB-2,Ki-67ER+PR+:60-70%的內分泌治療反應率ER-PR-:10%的內分泌治療反應率ER+PR-:40%的內分泌治療反應率ER-PR+:46%的內分泌治療反應率陽性分級（或陽性細胞數比例）與治療反應的相關性尚缺乏統(tǒng)一認識第23頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月3、消化CK7-/CK20+胃腸間質瘤CD117，CD34肝TTF-1漿陽、Hep、AFPCDX2主要表達于結腸，胃癌和卵巢粘液性腺癌也有表達CD117胞膜/胞漿，CD34胞膜CDX2胞核CK7，CK20，AFP，Hep胞漿第24頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月4、泌尿第25頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月腎

CK-HCK-LVimentinE-cadCD10EMACD117透明細胞-++-+(膜)+-（乳頭狀癌）嫌色細胞癌++-+-/+（漿）Hale鐵++（嗜酸細胞腺瘤）集合管癌+++-±Villin-CK-H、CK–L、Vimentin胞漿CD10胞膜EMA、CD117、E-cad胞膜/胞漿

第26頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月移行上皮：正常CK7陽性，CK20陽性提示腫瘤第27頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月5、生殖第28頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月卵巢上皮性腫瘤

CK7+/CK20-，CA125卵巢上皮（+）無性細胞瘤（女性）=精原細胞瘤（男性）

Vimentin，PLAP，CD117胚胎性癌

AFP，CD30，PLAP第29頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月子宮

HCGHPL合體滋養(yǎng)葉+++弱+細胞滋養(yǎng)葉--中間滋養(yǎng)葉+/弱++++HCG，HPL胞漿第30頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月

VimentinERCEA子宮內膜樣癌++-宮頸癌--+Vimentin胞漿ER胞核CEA胞膜/胞漿第31頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月前列腺基底細胞陽性標記：高分子量CK（34βE12,CK5/6）P504s腫瘤性腺泡（+），良性腺泡（-）PSA前列腺上皮（+）34βE12，CK5/6，PSA，P504s胞漿第32頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月6、神經內分泌第33頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月甲狀腺TGTTF-1CalcitoninCD56乳頭狀癌++--濾泡癌++-+髓樣癌-+++甲狀腺乳頭狀癌Galectin-3，CK19TG、Calcitonin胞漿TTF-1胞核CD56胞膜第34頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2