Eppendorf蛋白質(zhì)核酸自動分析儀操作說明與注意事項

Eppendorf蛋白質(zhì)核酸自動分析儀操作說明與注意事項Eppendorf蛋白質(zhì)核酸自動分析儀操作說明與注意事項操作說明：準備：開始測定前只需開啟儀器背后的電源開關即可開始測定。一、核酸濃度測定（包括dsDNA、ssDNA、RNA、Oligo）1.例如待測定樣品為dsDNA（eg：PCR產(chǎn)物），按下鍵“7/dsDNA”（若待測樣品為ssDNA，eg：反轉(zhuǎn)錄合成的第一鏈cDNA產(chǎn)物，則相應按下鍵“8/ssDNA若待測樣品為RNA，則按下鍵“9/RNA”；若待測樣品為Oligo（寡聚核苷酸），eg：PCR引物，則相應按下鍵“6/Oligo”。）2.若測定樣品需要稀釋后測定，則需先設定樣品的稀釋度：（1）按下鍵“Dilution”；（2）輸入樣品體積和稀釋液體積，按Enter鍵確認。將空白對照置入樣品孔。注意：空白對照是空白液，并非所有情況都是水。（例如用Tris溶液溶解DNA制品，則要用Tris液做空白對照。）3.按下鍵“Blank”；4.儀器記錄空白對照，設置為0.000A；(先不取出對照，按下Sample，看是否調(diào)零成功，若成功則可開始測樣品)5.將第一個樣品置入樣品孔；6.按下“Sample”；7.儀器顯示第一個樣品的相關參數(shù)（記下樣品濃度，OD260，OD280，OD260/OD280）8.直接放入第二個樣品；9.按下“Sample”；10.儀器顯示第二個樣品的吸光度值和濃度值，以及其他相關參考比值；11.依次測定，每個樣品的測定值將自動存儲在機器中，查看測定結果的方法如下：（1）按下鍵“./Function”（2）選擇“DISPLAY-RESULT”,按Enter鍵，查看每個樣品的測定值記錄（本機可存儲100個樣品的測定值）。二、OD600細菌生長密度測定1.按下鍵“5/OD600”；2.將空白對照置入樣品孔；3.按下鍵“Blank”；4.儀器記錄空白對照，設置為0.000A；5.將第一個樣品置入樣品孔；6.按下“Sample”；7.儀器顯示第一個樣品的吸光度值和濃度值；8.依次測定，每個樣品的測定值將自動存儲在機器中，查看測定結果。三、蛋白質(zhì)濃度的直接測定（280nm測定）1.按下鍵“4/Protein”；2.將空白對照置入樣品孔；3.按下鍵“Blank”；4.儀器記錄空白對照，設置為0.000A；5.將第一個樣品置入樣品孔；6.按下“Sample”；7.儀器顯示第一個樣品的吸光度值和濃度值，以及其他相關參考比值；8.依次測定，每個樣品的測定值將自動存儲在機器中，可查看測定結果。四、蛋白質(zhì)濃度顯色法的間接測定（Bradford，Lowry，BCA）1.按下鍵“1/Bradbord”or“2/Lowry”or“BCA”選擇蛋白質(zhì)顯色反應的方法；注：Bradford鍵按兩次，每次顯示不同的測定范圍。2.設置標準曲線的標準樣品數(shù)量、測定次數(shù)和濃度范圍。按下鍵“Parameter”用上下鍵進行選擇和參數(shù)調(diào)整。3.將空白對照置入樣品孔；4.按下鍵“Blank”；5.儀器記錄空白對照，設置為0.000A；6.將第一個標準品或樣品（如需沿用已存儲的標準曲線，可直接測樣品）置入樣品孔；7.按下“Sample”或“Standard”；8.依次測定標準品或樣品，每個樣品的測定值將自動存儲在機器中，查看測定結果。五、注意事項：1為了盡量減少顆粒對測試結果的影響，要求核酸吸光值至少大于0.1A，吸光值最好在0.1－1.5A。在此范圍內(nèi)顆粒的干擾相對較小，結果穩(wěn)定。樣品的濃度不能過低或者過高。2混合要充分，否則吸光值太低，甚至出現(xiàn)負值；3混合液中不能有氣泡，空白液無懸浮物，否則讀數(shù)漂移劇烈；4必須使用相同的比色杯測試空白液和樣品，