玻璃器皿的清洗包扎和高壓蒸汽滅菌專家講座

玻璃器皿清洗包扎及高壓蒸汽滅菌組員：孫中濤17徐州18孫洋20劉彩云19戚望平21

玻璃器皿的清洗包扎和高壓蒸汽滅菌專家講座第1頁一、試驗(yàn)?zāi)繕?biāo)1.掌握玻璃器皿清洗與包扎技術(shù)。2.學(xué)習(xí)并掌握高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌基本原理和操作方法。玻璃器皿的清洗包扎和高壓蒸汽滅菌專家講座第2頁二、試驗(yàn)原理（1）滅菌是指殺死或毀滅一定環(huán)境中全部微生物，滅菌方法分物理和化學(xué)滅菌法兩大類。本試驗(yàn)主要介紹物理方法一個(gè)，即加熱滅菌。

加熱滅菌包含濕熱和干熱滅菌兩種。經(jīng)過加熱使菌體內(nèi)

蛋白質(zhì)凝固變性，從而到達(dá)殺菌目標(biāo)。蛋白質(zhì)凝固變性與其本身含水量相關(guān)，含水量越高，其凝固所需要溫度越低。在同一溫度下，濕熱殺菌效力比干熱大，因?yàn)樵跐駸崆闆r下菌體吸收水分，使蛋白質(zhì)易于凝固；同時(shí)濕熱穿透力強(qiáng)，可增加滅菌效力。玻璃器皿的清洗包扎和高壓蒸汽滅菌專家講座第3頁（2）高壓蒸汽滅菌法：高壓蒸汽滅菌用途廣，效率高，是微生物學(xué)試驗(yàn)中最慣用滅菌方法。這種滅菌方法是基于水沸點(diǎn)伴隨蒸汽壓力升高而升高原理設(shè)計(jì)。當(dāng)蒸汽壓力到達(dá)1.05kg/cm2時(shí)，水蒸氣溫度升高到121℃，經(jīng)15～30min，可全部殺死鍋內(nèi)物品上各種微生物和它們孢子或芽孢。普通培養(yǎng)基、玻璃器皿以及傳染性標(biāo)本和工作服等都可應(yīng)用此法滅菌。玻璃器皿的清洗包扎和高壓蒸汽滅菌專家講座第4頁（3）干熱滅菌法：經(jīng)過使用干熱空氣殺滅微生物方法叫干熱滅菌。普通是把待滅菌物品包裝就緒后，放入電烘箱中烘烤，即加熱至160～170℃維持1～2h。（4）火焰滅菌：直接用火焰灼燒滅菌，快速徹底。對(duì)于接種環(huán)，接種針或其它金屬用具，可直接在酒精燈火焰上燒至紅熱進(jìn)行滅菌。另外，在接種過程中，試管或三角瓶口，也采取經(jīng)過火焰而到達(dá)滅菌目標(biāo)。玻璃器皿的清洗包扎和高壓蒸汽滅菌專家講座第5頁三、試驗(yàn)器材器皿：平皿（10個(gè)/組），1ml吸管（9支/組），試管18×180（10支/組），試管（15×150）（12/組），三角錐瓶500ml（3個(gè)/組）、三角錐瓶500ml（內(nèi)裝蒸餾水250ml），10ml吸管其它：牛皮紙或報(bào)紙，酒精燈，棉花，高壓蒸汽菌鍋，電烘箱，線繩,毛刷等玻璃器皿的清洗包扎和高壓蒸汽滅菌專家講座第6頁四、操作方法玻璃器皿在滅菌前必須經(jīng)正確包裹和加塞，以確保玻璃器皿于滅菌后不被外界雜菌所污染。1.將平皿用紙包扎好，以5～8個(gè)為一包；（一）、玻璃器皿清洗包扎玻璃器皿的清洗包扎和高壓蒸汽滅菌專家講座第7頁玻璃器皿的清洗包扎和高壓蒸汽滅菌專家講座第8頁2、吸管應(yīng)在管口約0.5厘米以下地方塞入少許長約1.5厘米棉花，以拉直曲別針一端放在棉花中心，輕輕捅入管口，松緊必須適中，松緊程度以吹氣時(shí)通氣順暢而不致下滑為準(zhǔn)，管口外露棉花纖維統(tǒng)一經(jīng)過火焰燒去。然后，將吸管尖端放在4-5厘米寬長條紙一端約與紙條成45°角，折疊紙條，包住吸管尖端，然后將吸管卷入紙條內(nèi)，末端剩下紙條折疊打結(jié)，待滅菌。玻璃器皿的清洗包扎和高壓蒸汽滅菌專家講座第9頁玻璃器皿的清洗包扎和高壓蒸汽滅菌專家講座第10頁包扎試管玻璃器皿的清洗包扎和高壓蒸汽滅菌專家講座第11頁包扎完成玻璃器皿的清洗包扎和高壓蒸汽滅菌專家講座第12頁3、三角瓶在棉塞與瓶口外再包以厚紙，用棉繩以活結(jié)扎緊，以防滅菌后瓶口被外部雜菌所污染；4、試管塞上棉花塞，多支扎成一捆外用牛皮紙或兩層舊報(bào)紙與細(xì)線包。高壓蒸汽滅菌鍋玻璃器皿的清洗包扎和高壓蒸汽滅菌專家講座第13頁（二）、干熱滅菌將包扎好試管、平皿、三角錐瓶放入干燥烘箱內(nèi)，注意不要擺放太密，以免妨礙空氣流通；不得使器皿與烘箱內(nèi)層底板直接接觸。將烘箱溫度升至160～170℃并恒溫1～2h，注意勿使溫度過高，超出170℃，器皿外包裹紙張、棉花會(huì)被烤焦燃燒。假如是為了烤干玻璃器皿，溫度為120℃連續(xù)30分鐘即可。溫度降至60～70℃時(shí)方可打開箱門，取出物品，不然玻璃器皿會(huì)因驟冷而爆裂。玻璃器皿的清洗包扎和高壓蒸汽滅菌專家講座第14頁（三）、高壓蒸汽滅菌

加水：打開滅菌鍋蓋，向鍋內(nèi)加水到水位線。立式消毒鍋?zhàn)詈糜靡阎箝_過水，方便降低水垢在鍋內(nèi)積存。注意水要加夠，預(yù)防滅菌過程中干鍋。裝料、加蓋：將待滅菌物品放好后，關(guān)閉滅菌器蓋，采取對(duì)角式均勻擰緊鍋蓋上螺旋，使蒸汽鍋密閉，勿使漏氣。排氣：打開排氣口(也叫放氣閥)。用電爐加熱，待水煮沸后，水蒸氣和空氣一起從排氣孔排出，當(dāng)有大量蒸汽排出時(shí)，維持5min，使鍋內(nèi)冷空氣完全排凈。升壓、保壓和降壓：當(dāng)鍋內(nèi)冷空氣排凈時(shí)，即可關(guān)閉排氣閥，壓力開始上升。當(dāng)壓力上升至所需壓力時(shí)，控制電壓以維持恒溫，并開始計(jì)算滅菌時(shí)間，待時(shí)間到達(dá)要求（普通培養(yǎng)基和器皿滅菌控制在121℃，20min）后，停頓加熱，待壓力降至靠近“0”時(shí)，打開放氣閥。注意不能過早過急地排氣，不然會(huì)因?yàn)槠績(jī)?nèi)壓力下降速度比鍋內(nèi)慢而造成瓶?jī)?nèi)液體沖出容器之外。玻璃器皿的清洗包扎和高壓蒸汽滅菌專家講座第15頁五、思索題

（1）吸管在滅菌前應(yīng)怎樣處理？

答：吸管應(yīng)在管口約0.5厘米以下地方塞入少許長約1.5厘米

棉花，以拉直曲別針一端放在棉花中心，輕輕捅入管口，松緊必須適中，松緊程度以吹氣時(shí)通氣順暢而不致下滑為準(zhǔn)，管口外露棉花纖維統(tǒng)一經(jīng)過火焰燒去。然后，將吸管尖端放在4-5厘米寬長條紙一端約與紙條成45°角，折疊紙條，包住吸管尖端，然后將吸管卷入紙條內(nèi)，末端剩下紙條折疊打結(jié)，待滅菌。玻璃器皿的清洗包扎和高壓蒸汽滅菌專家講座第16頁（2）高壓