衣原體醫(yī)學知識講座專家講座

衣原體Chlamydiae第二十七章衣原體醫(yī)學知識講座第1頁第一節(jié)概述定義：

一類嚴格真核細胞內寄生，含有獨特發(fā)育周期，并能經(jīng)過細菌濾器原核細胞型微生物，歸屬于細菌學范圍。衣原體醫(yī)學知識講座第2頁

共同特征

有細胞壁，G－，呈圓形或橢圓形，含有獨特發(fā)育周期，類似細菌二分裂方式繁殖。

有DNA和RNA兩種核酸，含核糖體；含有嚴格細胞內寄生性，對各種抗生素敏感。衣原體醫(yī)學知識講座第3頁衣原體科衣原體屬(3個種)沙眼衣原體鼠衣原體豬衣原體嗜衣原體屬(6個種)肺炎嗜衣原體鸚鵡熱嗜衣原體獸類嗜衣原體流產嗜衣原體貓嗜性衣原體豚鼠嗜性衣原體衣原體分類衣原體醫(yī)學知識講座第4頁四種衣原體性狀比較衣原體醫(yī)學知識講座第5頁（一）發(fā)育周期與形態(tài)染色

包含原體和網(wǎng)狀體

原體（Elementarybody,EB）：呈球形、橢圓形或梨形，直徑0.2～0.4

μm，是發(fā)育成熟衣原體。含有強感染性，在宿主細胞外較穩(wěn)定，無繁殖能力。當進入宿主易感細胞后，宿主細胞膜圍于原體外形成空泡，原體在空泡中逐步發(fā)育，增殖成為網(wǎng)狀體。Giemsa染色呈紫色，Macchiavello染色呈紅色。一、生物學性狀衣原體醫(yī)學知識講座第6頁

網(wǎng)狀體，亦稱始體（Initialbody）：體積較大，直徑0.5～1.0μm，圓形或橢圓形，電子致密度較低，無胞壁，代謝活躍，以二分裂方式繁殖，在空泡內增殖成許多子代原體。成熟子代原體從被破壞感染細胞中釋放，再感染新易感細胞，開始新發(fā)育周期，每個發(fā)育周期約48～72h。網(wǎng)狀體是衣原體發(fā)育周期中繁殖型，不具感染性，Macchivello染色呈藍色。衣原體醫(yī)學知識講座第7頁衣原體發(fā)育周期衣原體醫(yī)學知識講座第8頁原體和始體比較性狀原體始體大?。é蘭）0.2～0.40.5～1.0細胞壁＋-代謝活性-＋胞外穩(wěn)定性強弱感染性強無繁殖能力無強RNA:DNA比1:13:1衣原體醫(yī)學知識講座第9頁（二）培養(yǎng)特征

雞胚接種：6～8日齡雞胚卵黃囊中繁殖，感染后3～6天致雞胚死亡，并可在卵黃囊膜中找到包涵體、原體和始體顆粒。

組織細胞培養(yǎng)：可在HeLa、McCoy或HL等細胞中生長良好，可將接種有標本細胞培養(yǎng)管離心沉淀以促使衣原體穿入細胞，在細胞培養(yǎng)管中加入代謝抑制物。衣原體醫(yī)學知識講座第10頁（三）抗原結構屬特異性抗原：位于胞壁共同抗原為脂多糖，類似于G－菌脂蛋白-脂多糖復合物，可用補體結合試驗檢測。種特異性抗原：大多數(shù)衣原體種特異性抗原位于主要外膜蛋白（majoroutermembraneprotein,MOMP）上，可用補體結合試驗和中和試驗檢測判別不一樣種衣原體。型特異性抗原：依據(jù)MOMP可變區(qū)氨基酸序列不一樣，可將每種衣原體分為不一樣血清型或生物型（biovar）。衣原體醫(yī)學知識講座第11頁（四）抵抗力衣原體耐冷不耐熱，60℃僅能存活5～10

min；在-60℃感染性可保持5年，液氮內可保留10年以上，冷凍干燥保留30年以上仍可復蘇。對慣用消毒劑敏感，紫外線照射可快速滅活。四環(huán)素、氯霉素、強力霉素和紅霉素等抗生素有抑制衣原體繁殖作用。衣原體醫(yī)學知識講座第12頁（一）致病性能產生類似G－菌內毒素毒性物質，能抑制宿主細胞代謝，直接破壞宿主細胞。

MOMP能阻止吞噬體與溶酶體融合，表位易變異，在體內可逃避特異性抗體中和作用而繼續(xù)感染細胞。熱休克蛋白（HSP）能刺激機體巨噬細胞產生TNF-α、IL-1、IL-6等炎癥性細胞因子。二、致病性與免疫性衣原體醫(yī)學知識講座第13頁二、致病性與免疫性（二）免疫性

產生特異性細胞免疫和體液免疫，以細胞免疫為主。衣原體醫(yī)學知識講座第14頁第二節(jié)沙眼衣原體衣原體醫(yī)學知識講座第15頁衣原體發(fā)覺

1956年湯飛凡等首次分離培養(yǎng)出沙眼衣原體，無可爭辯地結束了半個多世紀關于沙眼病原爭論。他是世界上發(fā)覺主要病原體第一個中國人。生物分型沙眼生物型（Biovartrachoma）性病淋巴肉芽腫生物型（biovarlymphogramulomavenereum,LGV）衣原體醫(yī)學知識講座第16頁一、生物學性狀衣原體醫(yī)學知識講座第17頁（一）形態(tài)染色原體為圓形或橢圓形，Giemsa染色呈紫紅色。原體能合成糖原，故被碘溶液染成棕褐色。網(wǎng)狀體核質分散，Giemsa染色為深藍或暗紫色。碘染色沙眼衣原體始體鏡下形態(tài)（Giemsa染色）衣原體醫(yī)學知識講座第18頁（二）血清學分型依據(jù)MOMP表位氨基酸序列差異，將沙眼衣原體分為19個血清型，其中沙眼生物型包含15個血清型；LGV生物型包含L1、L2、L2a和L3共4個血清型。衣原體醫(yī)學知識講座第19頁二、致病性與免疫性衣原體醫(yī)學知識講座第20頁所致疾病

1.沙眼經(jīng)過眼-手-眼路徑直接或間接親密接觸傳輸。由A、B、Ba和C血清型引發(fā)。早期流淚，后期結膜瘢痕、瞼內翻、倒睫及角膜血管翳引發(fā)角膜損害，影響視力或致盲。衣原體醫(yī)學知識講座第21頁2.包涵體結膜炎嬰兒結膜炎，引發(fā)急性化膿性結膜炎（包涵體膿漏眼），不侵犯角膜，能自愈；成人結膜炎可經(jīng)兩性接觸、經(jīng)手至眼或污染游泳池水感染，引發(fā)濾泡性結膜炎，又稱游泳池結膜炎，普通經(jīng)數(shù)周或數(shù)月痊愈，無后遺癥。衣原體醫(yī)學知識講座第22頁3.泌尿生殖道感染沙眼生物型D～K血清型引發(fā)，男性多表現(xiàn)為非淋菌性尿道炎，并可合并附睪炎、前列腺炎、直腸炎等；女性表現(xiàn)為尿道炎、宮頸炎、輸卵管炎與盆腔炎等。4.嬰幼兒肺炎5.性病淋巴肉芽腫侵犯男性腹股溝淋巴結，引發(fā)化膿性淋巴結炎和慢性淋巴肉芽腫，常形成瘺管；亦可侵犯女性會陰、肛門、直腸，引發(fā)會陰-肛門-直腸組織狹窄。衣原體醫(yī)學知識講座第23頁三、微生物學檢驗法衣原體醫(yī)學知識講座第24頁（一）直接涂片鏡檢

取結膜刮片，Giemsa或碘液及熒光抗體染色鏡檢，觀察上皮細胞漿內有沒有包涵體。沙眼衣原體感染宮頸刮取物直接圖片（熒光染色）沙眼衣原體包涵體鏡下形態(tài)（碘染色）衣原體醫(yī)學知識講座第25頁（二）分離培養(yǎng)取感染組織滲出液或刮取物，接種于雞胚卵黃囊或傳代細胞，再用IFA或ELISA檢測培養(yǎng)物中衣原體。（三）衣原體抗原與核酸組分檢測ELISA：檢測沙眼衣原體LPS和MOMP

PCR和LCR（鏈接酶鏈反應）等擴增技術檢測沙眼衣原體DNA衣原體醫(yī)學知識講座第26頁預防重點是注意個人衛(wèi)生，防止直接或間接接觸傳染。治療藥品選取強力霉素、羅紅霉素、阿奇霉素、加替沙星等。當前尚無有效沙眼衣原體疫苗，MOMP是其主要候選抗原。因為MOMP多型性，其疫苗不易對全部型別沙眼衣原體都產生保護性，故增加了MOMP作為疫苗難度。四、防治標準衣原體醫(yī)學知識講座第27頁第三節(jié)肺炎嗜衣原體肺炎嗜衣原體是衣原體屬一個新種。最初分離兩株病原體：1965年自一名臺灣小學生眼結膜中分離得到一株TW-183（Taiwan-183）。1983年自美國西雅圖一位急性呼吸道感染病人咽部分離出另一株AR-39（acuterespiratory-39)，后發(fā)覺這兩株衣原體為同一菌株，乃命名為TWAR。衣原體醫(yī)學知識講座第28頁（一）形態(tài)染色

原體直徑為0.38μm，電鏡下呈經(jīng)典梨形，并有清楚周漿間隙，Giemsa染色呈紫紅色，該法對細胞內包涵體定位比碘染法敏感。一、生物學性狀衣原體醫(yī)學知識講座第29頁一、生物學性狀（二）細胞培養(yǎng)

McCoy和HeLa細胞，但都極難用于連續(xù)傳代。當前慣用HEp-2和HL細胞系，其在培養(yǎng)肺炎嗜衣原體敏感性方面要高于前二者。衣原體醫(yī)學知識講座第30頁所致疾病易引發(fā)肺炎、支氣管炎、咽炎和鼻竇炎等。起病遲緩，臨床癥狀與肺炎支原體相同，表現(xiàn)為咽痛、咳嗽、咳痰、發(fā)燒等，普通癥狀較輕。肺炎嗜衣原體與冠心病、動脈粥樣硬化等慢性病發(fā)生親密相關，但其詳細機制尚待深入研究。二、致病性與免疫性衣原體醫(yī)學知識講座第31頁病原學檢驗

先直接涂片，觀察包涵體；以熒光或酶標識種特異性單克隆抗體直接檢測標本中肺炎嗜衣原體抗原。三、微生物學檢驗法衣原體醫(yī)學知識講座第32頁三、微生物學檢驗法

血清學方法

微量免疫熒光試驗（micro-immunofluorescencetest,MIF）被稱為“金標準”。

凡雙份血清抗體滴度增高4倍或以上，或單份血清IgM抗體滴度≥1:16，或IgG抗體滴度≥1:512，可確定為急性感染，IgG≥1:16表示為既往感染。衣原體醫(yī)學知識講座第33頁第四節(jié)鸚鵡熱嗜衣原體衣原體醫(yī)學知識講座第34頁生物學性狀原體呈球形或卵圓形。網(wǎng)狀體呈球形或不規(guī)則形態(tài)。原體在細胞空泡中增殖，形成結構疏松、不含糖原、碘染色呈陰性包涵體。最少能夠分為6個血清型致病性經(jīng)呼吸道、破損皮膚、粘膜或結膜感染臨床表現(xiàn)多為非經(jīng)典性肺炎衣原體醫(yī)學知識講座第35頁微生物檢驗取患者血、痰標本或咽拭子直接涂片染色觀察包涵體。IFA或EL