微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)

試驗(yàn)一細(xì)菌形態(tài)觀察

目標(biāo)要求：見試驗(yàn)教程P.16試驗(yàn)二-1基本原理：見試驗(yàn)教程P.16試驗(yàn)二-1微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)第1頁試驗(yàn)內(nèi)容1.試驗(yàn)室環(huán)境及體表微生物檢驗(yàn)(檢驗(yàn)手指、頭發(fā)、錢幣等攜帶微生物情況4人一個(gè)培養(yǎng)皿)2.統(tǒng)計(jì)三種細(xì)菌菌落特征3.繪制三種細(xì)菌個(gè)體形態(tài)圖，并對(duì)革藍(lán)氏染色結(jié)果小結(jié)4．思索題：試驗(yàn)2-(一)、（二）題微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)第2頁三種細(xì)菌菌落特征微生物名稱大小形狀含水程度顏色與培養(yǎng)基結(jié)合程度嗅味枯草芽孢桿菌金黃色葡萄球菌大腸桿菌微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)第3頁繪制三種細(xì)菌個(gè)體形態(tài)圖，并對(duì)革藍(lán)氏染色結(jié)果小結(jié)

微生物名稱

革藍(lán)氏染色總結(jié)枯草芽孢桿菌

金黃色葡萄球菌

大腸桿菌

微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)第4頁試驗(yàn)二放線菌形態(tài)觀察

目標(biāo)要求：見試驗(yàn)教程P.24試驗(yàn)二-3

基本原理：見試驗(yàn)教程P.24試驗(yàn)二-3微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)第5頁試驗(yàn)內(nèi)容

1.統(tǒng)計(jì)三種放線菌菌落特征

2.統(tǒng)計(jì)并繪制三種放線菌個(gè)體形態(tài)及生殖方式圖

3.思索題：在平板上怎樣識(shí)別細(xì)菌和放線菌菌落？

微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)第6頁三種放線菌菌落特征

微生物名稱

大小

含水程度

菌落顏色

與培養(yǎng)基結(jié)合程度

嗅味

灰色鏈霉菌

正面后面淡紫灰鏈霉菌

正面后面地中海諾卡氏菌

正面后面微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)第7頁繪制三種放線菌個(gè)體形態(tài)及生殖方式圖

微生物名稱

制片法

生殖方式觀察

灰色鏈霉菌

印片法或直接觀察法

示氣生菌絲、孢子絲(直)及孢子(球形)淡紫灰鏈霉菌

印片法或直接觀察法

示氣生菌絲、孢子絲(螺旋狀)及孢子(橢圓形)地中海諾卡氏菌

印片法或直接觀察法

示菌絲斷裂、柱形或球形孢子

微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)第8頁試驗(yàn)三酵母菌形態(tài)觀察及細(xì)胞計(jì)數(shù)

目標(biāo)要求：觀察并掌握酵母菌菌落特征、個(gè)體形態(tài)及生殖方式?；驹恚阂娫囼?yàn)教程P.26試驗(yàn)3-1,P.97試驗(yàn)8-1微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)第9頁試驗(yàn)內(nèi)容1.統(tǒng)計(jì)兩種酵母菌菌落特征2.統(tǒng)計(jì)并繪制二種酵母菌個(gè)體形態(tài)及生殖方式圖3.

(1)用血球計(jì)數(shù)板計(jì)算酵母菌懸液細(xì)胞數(shù)(2)用顯微鏡測(cè)微尺測(cè)量酵母菌細(xì)胞大小4.思索題：在同一平板上怎樣識(shí)別細(xì)菌和酵母菌菌落？微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)第10頁兩種酵母菌菌落特征微生物名稱大小

含水程度菌落顏色與培養(yǎng)基結(jié)合程度嗅味釀酒酵母紅酵母微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)第11頁二種酵母菌個(gè)體形態(tài)及生殖方式圖

微生物名稱

制片法

生殖方式觀察

釀酒酵母水浸法制片示芽殖熱帶假絲酵母壓片法制片示假菌絲微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)第12頁試驗(yàn)四

霉菌形態(tài)觀察

目標(biāo)要求：1.觀察霉菌菌落特征。2.掌握霉菌制片方法，觀察霉菌個(gè)體形態(tài)及各種無性和有性孢子?；驹恚阂娫囼?yàn)教程P.29,試驗(yàn)三-2微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)第13頁試驗(yàn)內(nèi)容

1.統(tǒng)計(jì)三種霉菌菌落特征

2.對(duì)三種霉菌制片、觀察、統(tǒng)計(jì)并繪制三張霉菌個(gè)體形態(tài)及生殖方式圖3.四大類微生物形態(tài)特征總結(jié)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)第14頁三種霉菌菌落特征

微生物名稱

大小

表面形狀

顏色

與培養(yǎng)基結(jié)合程度

嗅味

黑根霉(產(chǎn)糖化酶,釀酒)

上部(孢子)下部(菌絲)產(chǎn)黃青霉(產(chǎn)青霉素)

中心(孢子頭)邊緣(菌絲)黃曲霉(產(chǎn)蛋白酶,制醬油)中心(孢子頭)邊緣(菌絲)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)第15頁三種霉菌個(gè)體形態(tài)及生殖方式微生物名稱菌絲結(jié)構(gòu)(分化結(jié)構(gòu))孢子

黑根霉示無隔菌絲、假根、匍匐枝、孢子囊梗產(chǎn)黃青霉示有隔菌絲、分生孢子梗、小梗黃曲霉示有隔菌絲、足細(xì)胞、頂囊、小梗微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)第16頁試驗(yàn)考查(1)怎樣從菌落特征上識(shí)別四類菌?

(2)四類菌在制片上有何特點(diǎn)?微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)第17頁試驗(yàn)五

培養(yǎng)基配制與滅菌

目標(biāo)要求：1.

學(xué)習(xí)和掌握分離四類菌慣用培養(yǎng)基配制方法。2.

學(xué)會(huì)四類菌稀釋分離和計(jì)數(shù)時(shí)所用物品滅菌前后準(zhǔn)備工作。3.

了解試驗(yàn)室慣用消毒滅菌方法，掌握高壓蒸汽滅菌技術(shù)。

基本原理：見試驗(yàn)5-1、5-2、5-3、5-5及附錄三

微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)第18頁試驗(yàn)內(nèi)容

配制四類菌分離用培養(yǎng)基(注意調(diào)pH)、分裝。(按卡片每三人一組配制其中一個(gè)培養(yǎng)基，但要求四種都會(huì)配)2.

準(zhǔn)備大小槍頭、小離心管、玻璃刮刀、無菌水等，培養(yǎng)基配制量及分裝方法見試驗(yàn)臺(tái)上卡片。3.

高壓蒸汽滅菌，滅菌后擺放斜面。先檢驗(yàn)高壓鍋內(nèi)水量，關(guān)閉高壓鍋蓋時(shí)用力要均勻，放氣2-3分鐘后關(guān)閉放氣閥，待壓力靠近0.1Mpa時(shí)調(diào)整成小火并計(jì)時(shí),保持20分鐘后關(guān)火,自然冷卻待壓力降為0時(shí)打開放氣閥后再打開高壓鍋。4.

試驗(yàn)室慣用消毒滅菌方法(示范)干熱滅菌、紫外滅菌、過濾除菌、化學(xué)消毒法等。

微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)第19頁試驗(yàn)統(tǒng)計(jì)

1.

統(tǒng)計(jì)你所配培養(yǎng)基名稱、成份、pH及配制分裝方法。

2.注意高壓蒸汽滅菌操作過程及關(guān)鍵

微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)第20頁試驗(yàn)六

土壤中微生物分離與培養(yǎng)

目標(biāo)要求：見P.66試驗(yàn)6-1

基本原理：見P.66試驗(yàn)6-1微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)第21頁試驗(yàn)內(nèi)容

1.先按卡片配制生理生化、噬菌體效價(jià)測(cè)定用培養(yǎng)基，滅菌2．稀釋分離：

3.

劃線分離：取10-2菌懸液做劃線分離（每人做四塊平皿:三種稀釋度各一塊、劃線分離一塊）4．菌落計(jì)數(shù)：（下周做）只數(shù)可認(rèn)定菌落，三人結(jié)果取平均。5.斜面接種及培養(yǎng)：（下周做）每人自不一樣平板上分別各接一支四類菌斜面，培養(yǎng)后檢驗(yàn)接種結(jié)果。6.

菌種保藏(示范)：斜面轉(zhuǎn)接法、低溫保藏法、沙土管保藏法、冷凍干燥保藏法。

微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)第22頁稀釋分離分離對(duì)象取樣稀釋度分離方法細(xì)菌1克土10-4、10-5、10-6

0．2ml菌懸液，傾注法分離放線菌1克土10-2、10-3、10-4

0．2ml菌懸液，傾注法分離酵母菌1克酵母粉10-5、10-6、10-7

0.1ml菌懸液，涂布法分離霉菌5克土10-2、10-3、10-4

0．2ml菌懸液，傾注法分離微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)第23頁注意事項(xiàng)分離放線菌在99ml無菌水中加10滴10%苯酚(抑制細(xì)菌生長)分離霉菌在馬丁培養(yǎng)基熔化冷卻后加入2ml去氧膽酸鈉(2%)和0.4ml鏈霉素(1萬單位/ml)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)第24頁試驗(yàn)統(tǒng)計(jì)

P.73試驗(yàn)6-1表(二)、(三)、(五).思索題：P.74試驗(yàn)6-1（二）、（四）、

(五)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)第25頁試驗(yàn)七幾個(gè)細(xì)菌生理生化反應(yīng)試驗(yàn)

目標(biāo)要求：見試驗(yàn)教程P85,P88基本原理：見試驗(yàn)教程P85,P88微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)第26頁試驗(yàn)內(nèi)容（按下表接種）

試驗(yàn)試驗(yàn)菌種試驗(yàn)菌種試驗(yàn)菌種接種方式

分工

淀粉水解

枯草芽孢桿菌

大腸桿菌

產(chǎn)氣桿菌

平板劃點(diǎn)

每人一皿接兩種菌

油脂水解

金黃色葡萄球菌

大腸桿菌

產(chǎn)氣桿菌

平板劃線

每人一皿接兩種菌

EMB大腸桿菌

產(chǎn)氣桿菌

平板劃線

每人一皿接兩種菌

葡萄糖發(fā)酵

大腸桿菌

產(chǎn)氣桿菌

液體一環(huán)

兩人1組每人1支試管各接一個(gè)菌甘露醇發(fā)酵

金黃色葡萄球菌

產(chǎn)氣桿菌

半固體穿刺

兩人1組每人1支試管各接一個(gè)菌H2S大腸桿菌

變形桿菌

半固體穿刺

兩人1組每人1支試管各接一個(gè)菌檸檬酸鹽

大腸桿菌

產(chǎn)氣桿菌

斜面劃線

兩人1組每人1支試管各接一個(gè)菌M.R大腸桿菌

產(chǎn)氣桿菌

液體一環(huán)

兩人1組每人1支試管各接一個(gè)菌V.P大腸桿菌

產(chǎn)氣桿菌

液體一環(huán)

兩人1組每人1支試管各接一個(gè)菌吲哚

大腸桿菌

產(chǎn)氣桿菌

液體一環(huán)

兩人1組每人1支試管各接一個(gè)菌微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)第27頁生理生化試驗(yàn)結(jié)果觀察

試驗(yàn)名稱反應(yīng)物

代謝產(chǎn)物

枯草金黃大腸產(chǎn)氣變形淀粉水解油脂水解EMB葡萄糖發(fā)酵甘露醇發(fā)酵H2S檸檬酸鹽M.RV.P吲哚微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)第28頁

試驗(yàn)八噬菌體效價(jià)測(cè)定

目標(biāo)要求：見試驗(yàn)教程P36基本原理：見試驗(yàn)教程P36微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)第29頁試驗(yàn)內(nèi)容

培養(yǎng)敏感細(xì)菌T6-13至對(duì)數(shù)生長久熔化下層培養(yǎng)基每人倒三塊平版（約10ml/塊）用蛋白胨水稀釋噬菌體原液（10?6pfa/ml）至10?710?810-9三個(gè)稀釋度備用取0.2ml噬菌體稀釋液于小離心管中加入0.