實(shí)驗(yàn)一細(xì)胞凝集反應(yīng) 和細(xì)胞膜的滲透性

實(shí)驗(yàn)一細(xì)胞凝集反應(yīng)和細(xì)胞膜的滲透性第1頁，共15頁，2023年，2月20日，星期六【課前預(yù)習(xí)】1．土豆凝集素的本質(zhì)及其使紅細(xì)胞凝集的原理？2．在等滲溶液中細(xì)胞一定能維持正常形態(tài)嗎？3．預(yù)測紅細(xì)胞在各種溶液中的溶血速度？第2頁，共15頁，2023年，2月20日，星期六一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?了解細(xì)胞膜的表面結(jié)構(gòu)；2了解細(xì)胞糖被的特點(diǎn)和功能，了解植物凝集素的作用3了解細(xì)胞膜的滲透性及各類物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的速度第3頁，共15頁，2023年，2月20日，星期六二、實(shí)驗(yàn)的原理1.細(xì)胞凝集反應(yīng)細(xì)胞膜表面的有分支狀糖外被，細(xì)胞間的聯(lián)系、細(xì)胞的生長和分化、免疫反應(yīng)、腫瘤的發(fā)生等都和細(xì)胞表面的分支狀糖分子有關(guān)。凝集素（lectin）是一類含糖并能與糖分子專一結(jié)合的蛋白質(zhì)，它具有凝集細(xì)胞和刺激細(xì)胞分裂的作用。凝集素使細(xì)胞凝集是由于它與細(xì)胞表面的糖分子連接，在細(xì)胞表面間形成“橋”的結(jié)果，加入與凝集素互補(bǔ)的糖可以抑制細(xì)胞的凝集。第4頁，共15頁，2023年，2月20日，星期六2.細(xì)胞膜的滲透性在低滲液中，紅細(xì)胞很快吸水脹裂，稱為溶血。在等滲液中，由于有些溶質(zhì)會進(jìn)入紅細(xì)胞內(nèi)、引起細(xì)胞滲透壓升高，細(xì)胞也會吸水脹裂，由于各種物質(zhì)透入細(xì)胞的速度不同，溶血的時(shí)間不同第5頁，共15頁，2023年，2月20日，星期六三、實(shí)驗(yàn)用品1.器材:顯微鏡、天平、載玻片、滴管、離心管、燒杯、10ml移液管、試管、試管架2.材料:土豆塊莖3.試劑:２％鴨血紅細(xì)胞、抗凝血劑、PBS、土豆塊莖、0.85％生理鹽水、2％雞紅細(xì)胞、PBS緩沖液、Alsever溶液、0.17M氯化鈉、0.17M氯化銨、0.17M醋酸胺、0.17M硝酸鈉、0.17M草酸銨、0.17M硫酸鈉、0.17M葡萄糖、0.17M甘油、0.17M乙醇、0.17M丙酮第6頁，共15頁，2023年，2月20日，星期六四、實(shí)驗(yàn)步驟第7頁，共15頁，2023年，2月20日，星期六(一)細(xì)胞凝集反應(yīng)1.2％雞血紅細(xì)胞懸液制備新鮮雞血加抗凝劑，生理鹽水洗5次，每次2000r/min，離心5min，按紅細(xì)胞壓積用生理鹽水配成2％雞血紅細(xì)胞懸液。2.土豆凝集素制備土豆2克，加10mlPBS，浸泡2h。3.細(xì)胞凝集反應(yīng)土豆凝集素1滴、2％雞血紅細(xì)胞液1滴。載玻片上混勻，靜置20min。4.對照PBS1滴、2％雞血紅細(xì)胞液1滴。第8頁，共15頁，2023年，2月20日，星期六（二）細(xì)胞膜的滲透性1.低滲溶液試管一支：雞血紅細(xì)胞液1ml；蒸餾水10ml；結(jié)果溶血，溶液變透明。2.等滲溶液0.17M氯化鈉、0.17M氯化銨、0.17M醋酸胺、0.17M硝酸鈉、0.17M草酸銨、0.17M硫酸鈉、0.17M葡萄糖、0.17M甘油、0.17M乙醇、0.17M丙酮第9頁，共15頁，2023年，2月20日，星期六未溶血溶血第10頁，共15頁，2023年，2月20日，星期六

【實(shí)驗(yàn)結(jié)果】

1．土豆凝集素能使雞紅細(xì)胞凝集，PBS對照液中紅細(xì)胞分散均勻第11頁，共15頁，2023年，2月20日，星期六未凝血第12頁，共15頁，2023年，2月20日，星期六凝血第13頁，共15頁，2023年，2月20日，星期六2．細(xì)胞膜滲透性實(shí)驗(yàn)結(jié)果比較和分析第14頁，共15頁，2023年，2月20日，星期六【實(shí)驗(yàn)報(bào)告】1．簡圖表示凝集素使血