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文檔簡介
生物技術(shù)藥物和疫苗第1頁/共20頁生物技術(shù)藥物基因工程藥物酶工程藥物發(fā)酵工程藥物細(xì)胞工程藥物第2頁/共20頁基因工程藥物干擾素的生產(chǎn):
什么是干擾素?
傳統(tǒng)方法:從人血液中的白細(xì)胞內(nèi)提取每300L血液才能提取1mg
基因工程:將干擾素基因轉(zhuǎn)移到大腸桿菌中每千克培養(yǎng)液可提取20-40mg第3頁/共20頁基因工程藥物干擾素生產(chǎn)車間第4頁/共20頁細(xì)胞工程藥物傳統(tǒng)動植物藥物具有高效、低毒、副作用少的特點(diǎn)。植物細(xì)胞(組織)培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)第5頁/共20頁植物細(xì)胞(組織)培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)的人參愈傷組織第6頁/共20頁植物細(xì)胞(組織)培養(yǎng)懸浮細(xì)胞培養(yǎng)藥物制劑脫分化:離體的植物器官、組織或細(xì)胞,在培養(yǎng)了一段時間后,會通過細(xì)胞分裂,形成愈傷組織。愈傷組織的細(xì)胞排列疏松而無規(guī)則,是一種高度分化的呈無定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞。提取純化產(chǎn)物第7頁/共20頁動物細(xì)胞(組織)培養(yǎng)第8頁/共20頁動物細(xì)胞(組織)培養(yǎng)培養(yǎng)基:狀態(tài)液體培養(yǎng)液(動物細(xì)胞生活的液體環(huán)境)成分葡萄糖(滿足能量需求、作為細(xì)胞碳源)
氨基酸(合成蛋白質(zhì))
無機(jī)鹽(重要的細(xì)胞組成物質(zhì))
維生素、動物血清等(生長調(diào)節(jié)作用)條件恒溫(動物細(xì)胞生長溫度)
無菌條件(防止微生物污染)第9頁/共20頁動物細(xì)胞(組織)培養(yǎng)生長特點(diǎn):(1)貼壁生長:培養(yǎng)瓶中的懸浮液細(xì)胞,緊貼培養(yǎng)瓶內(nèi)壁才能生長(2)接觸抑制:當(dāng)培養(yǎng)瓶中內(nèi)壁生長細(xì)胞彼此緊密接觸時,細(xì)胞不再分裂第10頁/共20頁動物細(xì)胞(組織)培養(yǎng)應(yīng)用:(1)生產(chǎn)有重要價值的蛋白質(zhì)產(chǎn)品分泌性的蛋白質(zhì)產(chǎn)品(2)培養(yǎng)皮膚細(xì)胞用于移植形成組織(3)檢測有毒物質(zhì)致癌致畸引起染色體數(shù)目和結(jié)構(gòu)改變
(4)理論研究培養(yǎng)正?;虍惓<?xì)胞用于生理、病理、藥理研究第11頁/共20頁動物細(xì)胞(組織)培養(yǎng)幾個概念:原代培養(yǎng):將動物組織用胰蛋白酶處理成單個細(xì)胞,配制成一定濃度的懸浮液,放入培養(yǎng)瓶中在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)的過程傳代培養(yǎng):培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞越來越多,用胰蛋白酶處理使細(xì)胞從瓶壁上脫離下來,配制成懸浮液,分瓶培養(yǎng)的過程細(xì)胞株:原代培養(yǎng)細(xì)胞傳至10代左右就不容易傳下去,細(xì)胞生長停滯,大部分細(xì)胞衰老死亡,少數(shù)細(xì)胞能存活傳到40~50代,這部分細(xì)胞稱為細(xì)胞株細(xì)胞系:細(xì)胞株傳到50左右不能再繼續(xù)傳代,部分細(xì)胞遺傳物質(zhì)改變,具有癌變細(xì)胞的特點(diǎn),可以在培養(yǎng)條件下無限制的傳代下去,這部分細(xì)胞稱為細(xì)胞系第12頁/共20頁動物細(xì)胞融合回憶植物細(xì)胞融合過程中用了什么方法來促使原生質(zhì)融合?物理法:電刺激,振蕩化學(xué)法:PEG(聚乙二醇)第13頁/共20頁動物細(xì)胞融合動物細(xì)胞的融合還常常用到滅活的病毒作為誘導(dǎo)劑第14頁/共20頁動物細(xì)胞融合第15頁/共20頁動物細(xì)胞融合
動物細(xì)胞培養(yǎng)植物細(xì)胞培養(yǎng)原理細(xì)胞的增殖細(xì)胞的全能性細(xì)胞來源胚胎或幼齡動物組織或器官離體植物器官、組織或細(xì)胞培養(yǎng)基狀態(tài)液體固體成分天然培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基組成葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素、動物血清礦質(zhì)元素、蔗糖、維生素、植物激素、有機(jī)添加物器皿培養(yǎng)瓶錐形瓶過程原代生長,傳代生長更換培養(yǎng)基,細(xì)胞增值分化生長特點(diǎn)貼壁生長,細(xì)胞增值不分化誘導(dǎo)形成愈傷組織,細(xì)胞增值分化細(xì)胞進(jìn)行異養(yǎng)需氧代謝培養(yǎng)條件恒溫、無菌、無需光照常溫、無菌、光照條件培養(yǎng)結(jié)果細(xì)胞株→細(xì)胞系愈傷組織→植株第16頁/共20頁練習(xí):現(xiàn)有甲乙兩個煙草品種(2n=48),基因型分別為aaBB和AAbb,這兩對基因位于非同源染色體上,且在光照強(qiáng)度大于800勒克司時,都不能生長,這是由于它們中的一對隱性純合基因(aa或bb)作用的結(jié)果。取甲乙兩品種的花粉分別培養(yǎng)成植株,將它們的葉肉細(xì)胞制成原生質(zhì)體,并將兩者相混,使之融合,誘導(dǎo)產(chǎn)生細(xì)胞團(tuán)。然后,放到大于800勒克司光照下培養(yǎng),結(jié)果有的細(xì)胞團(tuán)不能分化,有的能分化發(fā)育成植株。請回答下列問題:(1)甲乙兩組煙草品種花粉的基因型分別為
和
。(2)將葉肉細(xì)胞制成原生質(zhì)體時,使用
去除細(xì)胞壁。(3)在細(xì)胞融合技術(shù)中,常用的促融劑是
。(4)細(xì)胞融合后誘導(dǎo)產(chǎn)生的細(xì)胞團(tuán)叫
。(5)在大于800勒克司光照下培養(yǎng),有
種細(xì)胞團(tuán)不能分化;能分化的細(xì)胞團(tuán)是由___________的原生質(zhì)體融合來的(這里只考慮2個原生質(zhì)體的相互融合)。由該細(xì)胞團(tuán)分化發(fā)育成的植株,其染色體數(shù)是
,基因型是
。該植株自交后代中,在大于800勒克司光照下,出現(xiàn)不能生長的植株的概率是
。第17頁/共20頁練習(xí):答案:根據(jù)題目中所給的信息分析得知:甲乙兩煙草品種aaBB和AAbb的花粉是減數(shù)分裂產(chǎn)生的配子,基因型分別為aB和Ab。將兩者相混合,細(xì)胞融合是隨機(jī)的,有可能是兩個aB細(xì)胞融合形成aaBB;也有可能是兩個Ab細(xì)胞融合形成AAbb;只有AaBb放在大于800勒克司光照下能夠分化發(fā)育成植株,該植株自交后代中,在大于800勒克司光照下,出現(xiàn)不能生長的植株指的是aaBB、aaBb、AAbb、Aabb、aabb,所占的比例為7/16(1/4+1/4-1/4*1/4)。答案:(1)aBAb(2)纖維素酶(答果膠
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