血脂和血漿脂蛋白的檢驗

血脂和血漿脂蛋白的檢驗第1頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二第一節(jié)概述第二節(jié)血脂、脂蛋白及載脂蛋白測定本章內(nèi)容概要第2頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二教學(xué)目標和要求1、掌握脂蛋白的分類及其主要功能；高脂血癥的分型及血液生化特點；血脂、脂蛋白和載脂蛋白測定的原理和方法。2、熟悉各種脂蛋白的組成與結(jié)構(gòu)要點；異常脂蛋白血癥的原因；血脂檢查前應(yīng)注意的問題。3、了解載脂蛋白的種類與生理功能；各個檢驗項目的臨床意義和應(yīng)用。第3頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二

第一節(jié)概述

一、血脂及血漿脂蛋白（一）血漿脂蛋白的分類（二）血漿脂蛋白的組成與結(jié)構(gòu)（三）載脂蛋白（四）脂蛋白受體（五）膽固醇酯轉(zhuǎn)運蛋白

(六)血漿脂蛋白代謝

二、脂蛋白代謝紊亂（一）高脂蛋白血癥

(二)低脂蛋白血癥第4頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二一、血脂及血漿脂蛋白血脂：血漿脂類即血脂。包括游離膽固醇(freecholesterol，F(xiàn)C)、膽固醇酯(cholesterolester，CE)、磷脂(phospholipid，PL)、甘油三(triacylglycerol，TG)、糖酯、游離脂肪酸(freefattyacid，F(xiàn)FA)等。定義：脂蛋白：脂類難溶于水，正常血漿脂類物質(zhì)與蛋白質(zhì)結(jié)合成脂蛋白的形式存在。第5頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二（一）血漿脂蛋白的分類超速離心法：CM、

VLDL、

LDL、

HDL電泳法：CM、前

-LP、-LP和-LP第6頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二超速離心法(ultracentrifugationmethod)

亦稱密度梯度法(density-gradient

method)

依據(jù)不同脂蛋白的密度差異，在離心時漂浮速率不同而進行分離。Sf(Svedbergfloatationrate)

第7頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二

電泳法(electrophoresismethod)

依據(jù)血漿脂蛋白分子中蛋白質(zhì)表面電荷多少的不同而分離。

?CM

前

第8頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二第9頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二（二）血漿脂蛋白的組成與結(jié)構(gòu)組成：

蛋白質(zhì)、甘油三酯、磷脂（phospholipid，PL）、游離膽固醇（freecholesterol，F(xiàn)C）及膽固醇酯（cholesterolester，CE）等成分組成。第10頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二結(jié)構(gòu)：

大致為球形顆粒，由兩大部分組成，即疏水性的內(nèi)核和親水性的外殼（圖10-1）。內(nèi)核由不同量的CE與TG組成，表層由載脂蛋白、PL及FC組成，F(xiàn)C及PL的極性基團向外露在血漿中，載脂蛋白是兼性化合物，它的疏水部分掩蔽在脂蛋白中，而親水部分突出于脂蛋白顆粒的表面。第11頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二

１、乳糜微粒（chylomicron,CM）物理性質(zhì)：密度：0.95g/mlSf>400直徑：80~500nm電泳時處于點樣點化學(xué)組成：載脂蛋白1-2％：ApoB48、AⅠ、CⅠ、ＣⅡ、ＣⅢ。脂類98-99％：TG85-95％、磷脂3-8％，ch2-8％合成部位：小腸粘膜細胞（十二指腸、空腸）

功能：運輸外源性TG到全身各組織第12頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二應(yīng)用：CM顆粒大，一般不致動脈粥樣硬化,但易誘發(fā)胰腺炎。近年研究表明,CM殘粒(代謝殘骸)可被巨噬細胞表面受體所識別而攝取,因而可能與AS有關(guān)。第13頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二２、極低密度脂蛋白（verylowdensitylipoprotein,VLDL）物理性質(zhì)：密度0.95~1.006g/mlSf20~400直徑30~80nm

電泳時preβ-LP位

化學(xué)組成：載脂蛋白5-10％:ApoB100、C、E

脂類90-95％（TG50-70％，

CH10-25％

PL15-20％）第14頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二合成部位：肝細胞功能：運輸內(nèi)源性TG的主要形式應(yīng)用：血漿VLDL水平升高已被確認為冠心病的危險因子。第15頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二３、低密度脂蛋白（lowdensitylipoprotein,LDL）物理性質(zhì)：密度1.006~1.063g/ml、Sf0-20電泳時處于β-LP

化學(xué)組成：載脂蛋白20~25％:ApoB100、脂類75-80％（TG5-10%、CH45-50%PL20%）

合成部位：①在血漿中由VLDL經(jīng)過IDL轉(zhuǎn)化而來（主要）

②一部分肝細胞合成（次要）第16頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二功能：攜帶膽固醇由肝臟轉(zhuǎn)運到全身血漿中應(yīng)用：LDL相對較小,易于穿過動脈內(nèi)膜，是首要的致AS性脂蛋白。已證明AS斑塊中的膽固醇主要來自循環(huán)中的LDL。

第17頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二４、高密度脂蛋白（highdensitylipoprotein,HDL）

物理性質(zhì)：

密度1.063-1.21g/ml,Sf0,直徑7-10nm,電泳時處位于α-LP

化學(xué)組成：載脂蛋白45-55％,(ApoAⅠ、AⅡ、D),脂類45-55％（TG2-7％,CH18-25％,PL26-32％）

第18頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二HDL按密度大小可分為HDL1、HDL2和HDL3。HDL1又稱為HDLc，僅在攝取高膽固醇膳食后才在血中出現(xiàn)，健康人血漿中主要含HDL2和HDL3。合成部位：

1.一部分肝細胞合成（主要），小腸也可合成

2.VLDL→HDL功能：

將肝外組織細胞表面的膽固醇攝入并酯化再轉(zhuǎn)運到肝內(nèi)的載體進行代謝。應(yīng)用：HDL有防止動脈粥樣硬化的作用。HDL被認為是一種抗AS的血漿脂蛋白,是冠心病的保護因子。第19頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二第20頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二5、脂蛋白(a)［LP-(a)，Lipoprotein(a)］

1963年被發(fā)現(xiàn)。組成與結(jié)構(gòu)類似于LDL，但分子量、顆粒較大，電泳較慢。

脂類：TG、PL、FC、CE

組成

蛋白質(zhì)：ApoB100、Apo(a)(特色)

結(jié)構(gòu)：類似于LDL

第21頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二臨床意義：血漿LP(a)是導(dǎo)致As的獨立危險因子,因Apo(a)與纖溶酶原具有高度同源性，在纖溶系統(tǒng)多個環(huán)節(jié)發(fā)揮作用，從而影響As的發(fā)生和發(fā)展。第22頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二50~65%8~14%12~16%4~7%6~10%90~95%2~4%2~6%~1%1~2%ApoFCPLCETGVLDLCMApoFCPLCETG~7%10~20%25%~5%~45%5~6%22~26%35~45%6~15%22~25%LDLHDLTG－richLipoproteinCh－richLipoprotein第23頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二CMVLDLLDLHDL密度＜0.950.95~1.0061.006~1.0631.063~1.210組成脂類含TG最多，80~90%含TG50~70%含膽固醇及其酯最多，40~50%含脂類50%蛋白質(zhì)最少,1%5~10%20~25%最多，約50%載脂蛋白組成apoB48、E

AⅠ、AⅡAⅣ、CⅠCⅡ、CⅢapoB100、CⅠ、CⅡCⅢ、EapoB100apoAⅠ、AⅡ血漿脂蛋白的組成特點第24頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二（三）載脂蛋白脂蛋白的蛋白部分稱為載脂蛋白(apolipoprotein，Apo)定義：種類：

按1972年Alaupovic建議的命名方法，用英文字母順序編碼，分為ApoA、B、C、D、E、F、G、H、J等。由于氨基酸組成的差異，每一型又可分若干亞型。第25頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二⑴apoA：目前發(fā)現(xiàn)有四種亞型，即apoAⅠ，apoAⅡ，apoAⅣ，apoAⅤ。apoAⅠ和apoAⅡ主要存在于HDL中。第26頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二⑵apoB：有兩種亞型，即在肝細胞內(nèi)合成的apoB100；小腸粘膜細胞內(nèi)合成的apoB48。apoB100主要存在于LDL中，而apoB48主要存在于CM中。第27頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二⑶apoC：有四種亞型，即apoCⅠ，apoCⅡ，apoCⅢ，apoCⅣ。VLDL主要存在的載脂蛋白是apoB100和apoCⅢ。⑷apoD：只有一種。⑸apoE：有三種亞型，即apoE2，apoE3，apoE4。第28頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二功能：

⑴轉(zhuǎn)運脂類物質(zhì)。⑵作為脂類代謝酶的調(diào)節(jié)劑：LCAT可被apoAⅠ，apoAⅣ，apoCⅠ等激活，也可被apoAⅡ所抑制。LpL（脂蛋白脂肪酶）可被apoCⅡ所激活，apoAⅣ也有輔助激活作用；也可被apoCⅢ所抑制。HL（肝脂酶）可被apoAⅡ激活。

第29頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二⑶作為脂蛋白受體的識別標記：apoB可被細胞膜上的apoB，E受體（LDL受體）所識別；apoE可被細胞膜上的apoB，E受體和apoE受體（LDL受體相關(guān)蛋白，LRP）所識別。apoAⅠ參與HDL受體的識別。第30頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二⑷參與脂質(zhì)交換：膽固醇酯轉(zhuǎn)運蛋白（CETP）可促進膽固醇酯由HDL轉(zhuǎn)移至VLDL和LDL；磷脂轉(zhuǎn)運蛋白（PTP）可促進磷脂由CM和VLDL轉(zhuǎn)移至HDL。⑸作為連接蛋白：apoD可作為LCAT與apoAⅠ之間的連接蛋白，構(gòu)成apoAⅠ-apoD-LCAT復(fù)合物，與膽固醇的酯化與轉(zhuǎn)運有關(guān)。第31頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二人血漿載脂蛋白的結(jié)構(gòu)、功能及含量第32頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二（四）脂蛋白受體定義：

脂蛋白受體是一類位于細胞膜上的糖蛋白。它能以高度的親和方式與相應(yīng)的脂蛋白配體作用，從而介導(dǎo)細胞對脂蛋白的攝取與代謝，進一步調(diào)節(jié)細胞外脂蛋白的水平。第33頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二脂蛋白與脂蛋白受體的作用：

不僅是運送脂蛋白至細胞所必需，也是從血和外周組織中有效清除具有潛在致動脈粥樣硬化的脂蛋白所必需的。種類：

已有很多種，主要有LDL受體、殘粒受體（remnantreceptor）及清道夫受體（scavengerreceptor）。第34頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二LDL受體：不僅能識別ApoB100，也可識別ApoE，在細胞結(jié)合、攝取和降解LDL及其它含ApoB100的脂蛋白過程中起中介作用，對維持細胞和全身膽固醇平衡起重要作用。功能殘粒受體：

能識別ApoE，是清除血液循環(huán)中CM殘粒和β-VLDL殘粒的主要受體，它也能結(jié)合含ApoE的HDL。

清道夫受體：

主要存在于巨噬細胞表面,介導(dǎo)修飾LDL(包括氧化LDL和-VLDL)從血液循環(huán)中清除。

第35頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二（五）膽固醇酯轉(zhuǎn)運蛋白定義：

血漿中脂蛋白部分含有一種特殊的轉(zhuǎn)運蛋白，能促進血漿各脂蛋白間膽固醇酯、甘油三酯和磷脂的單向或雙向轉(zhuǎn)運和交換，這類特殊轉(zhuǎn)運蛋白稱脂質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白（lipidtransferprotein,LTP）。

組成：膽固醇酯轉(zhuǎn)運蛋白（cholesterolestertransferprotein,CETP）磷脂轉(zhuǎn)運蛋白（phospholipidtransferprotein,PTP）甘油三酯轉(zhuǎn)運蛋白（triglyceridetransferprotein,TTP）第36頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二(六)血漿脂蛋白代謝外源性代謝途徑：指食物中攝入的膽固醇和甘油三酯在小腸中合成CM及CM代謝的過程。內(nèi)源性代謝途徑：指肝臟合成VLDL，然后轉(zhuǎn)變?yōu)镮DL和LDL，并被肝臟或其它器官代謝的過程膽固醇的逆向轉(zhuǎn)運：HDL參與將膽固醇從外周組織運輸?shù)礁闻K的過程。第37頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二乳糜微粒的代謝食物脂類消化吸收入小腸粘膜細胞合成TG，與apoB48等組裝形成新生CM經(jīng)胸導(dǎo)管入血成熟CM（含apoCⅡ）HDLapoCsapoE由肝apoE受體識別并攝取降解LPL甘油脂肪酸進入組織細胞氧化供能CM殘體釋出apoCs，apoAs，磷脂，膽固醇等組成新生HDL第38頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二第39頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二將食物中的甘油三酯轉(zhuǎn)運至肝和脂肪組織（轉(zhuǎn)運外源性甘油三酯）。CM的生理功能第40頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二VLDL的代謝肝細胞合成TG與ApoB100，ApoE，磷脂，膽固醇等組裝形成新生VLDL成熟VLDL（含ApoCⅡ）ApoCs膽固醇酯HDL組裝形成新生HDLIDL釋放出ApoCs，磷脂，膽固醇等，LpL脂肪酸甘油進入組織細胞氧化供能肝細胞ApoE受體識別并攝取肝脂酶脂肪酸甘油LDL第41頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二將肝合成的甘油三酯轉(zhuǎn)運至肝外組織（轉(zhuǎn)運內(nèi)源性甘油三酯）。VLDL的生理功能第42頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二第43頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二LDL的代謝LDL（富含膽固醇及其酯）清除細胞攝取清除（30%）由外周組織細胞膜表面LDL受體識別并攝?。?0%）第44頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二攝入組織細胞的膽固醇具有以下功能：①抑制HMG-CoA還原酶的活性，調(diào)節(jié)膽固醇的合成；②抑制LDL受體的合成，調(diào)節(jié)外周組織對膽固醇的攝?。虎奂せ預(yù)CAT，促進組織細胞對膽固醇的酯化。第45頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二將膽固醇由肝轉(zhuǎn)運至肝外組織。LDL的生理功能第46頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二HDL的代謝肝或小腸合成膽固醇，磷脂，apo等組裝新生HDLCM、VLDL降解LCAT膽固醇酯化并內(nèi)移膽固醇肝外組織細胞膜降解或由CM，VLDL轉(zhuǎn)運肝細胞表面HDL受體識別并攝取降解膽固醇酯，ApoCs新生CM，VLDL成熟HDL第47頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二第48頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二將膽固醇由肝外組織轉(zhuǎn)運至肝（膽固醇的逆向轉(zhuǎn)運）。HDL的生理功能第49頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二二、脂蛋白代謝紊亂（一）高脂蛋白血癥定義：

高脂血癥（hyperlipidemia）是指血漿中膽固醇或/和甘油三酯水平升高。血漿脂類以血漿脂蛋白形式存在，因此，高脂血癥一定是高脂蛋白血癥（hyperlipoproteinemia）。近年來，已逐漸認識到血漿中HDL降低也是一種脂代謝紊亂。第50頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二

從原因分類

原發(fā)性高脂蛋白血癥

繼發(fā)性高脂蛋白血癥第51頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二

原發(fā)性高脂蛋白血癥

原發(fā)性高脂蛋白血癥是由遺傳因素造成蛋白質(zhì)缺陷引起的脂蛋白代謝紊亂，包括Apo、酶和受體的缺陷等幾種情況。1967年Fredrickson將原發(fā)性高脂蛋白血癥分為6種表型。第52頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二?型高脂蛋白血癥（家族性高CM血癥）

1.發(fā)病原因：常染色體隱性遺傳（1）LPL遺傳性缺陷（2）ApoCⅡ缺乏

ApoCⅡ缺陷(缺乏或結(jié)構(gòu)異常)LPL活性↓CM中的TG不能被水解CM變成CM殘粒受阻CM在血漿中堆積。2.臨床表現(xiàn)：

常伴有視網(wǎng)膜止血癥、腹痛、胰腺炎、肝脾腫大等，發(fā)病多在兒童期。

第53頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二3.生化特征：（1）血清外觀：乳白色混濁，4℃過夜，血漿上層出現(xiàn)“奶油樣”上層（由CM構(gòu)成），下層為透明至混濁。（2）血脂分析：TG↑↑↑，膽固醇正?；蜉p度增高。（3）電泳圖譜：正常人無CM帶，此時有區(qū)帶深染。（4）脂蛋白分析：CM↑↑

（5）血漿LPL活性降低，肝脂酶正常，毛細血管內(nèi)皮細胞LPL活性因其輔助因子ApoCⅡ缺乏而低下。第54頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二IIa型高脂蛋白血癥(家族性高膽固醇血癥）1.發(fā)病原因：

主要為LDL受體缺陷，常染色體隱性遺傳

(1)LDL受體缺乏或減少

(2)LDL受體活性（與LDL結(jié)合能力）降低

(3)LDL受體入胞（內(nèi)吞）障礙，即

LDL受體可與LDL形成復(fù)合物，但不能被內(nèi)吞。

以上均導(dǎo)致LDL不能以正常速度進入細胞而堆積于血漿中，久之則使LDL-Ch大量沉積在動脈管壁AS。

第55頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二2.臨床表現(xiàn)：

黃色瘤、角膜弓狀云、AS等，純合子患者在青春期即發(fā)生AS和冠心病，可致死。3.生化特征：（1）血清外觀：透明，少有混濁（2）血脂分析：膽固醇↑↑，TG正常。（3）電泳圖譜：?－區(qū)帶深染、增寬（4）脂蛋白分析：LDL↑↑，ApoB↑第56頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二

Ⅱb型高脂蛋白血癥（高β-LP合并高前β-LP血癥，混合型高脂蛋白血癥）

1.發(fā)病原因：

主要因ApoB100過多生成，導(dǎo)致血漿VLDL、LDL過量生成而分解并不加快，從而堆積。常染色體顯性遺傳。

2.臨床表現(xiàn)：

Ⅱb型與Ⅱa的主要區(qū)別是前者LDL受體活性正常，患者多合并肥胖，糖代謝及胰島素分泌異常，易伴發(fā)黃色瘤及動脈粥樣硬化癥。

第57頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二3.生化特征：

(1）血清外觀：少有混濁（2）血脂分析：膽固醇↑↑、TG↑↑

（3）電泳圖譜：?-LP和Pre?-LP區(qū)帶均深染，但兩者并不融合。（4）脂蛋白分析：LDL↑、VLDL↑

第58頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二

Ⅲ型高脂蛋白血癥(高β-VLDL血癥，寬β-脂蛋白血癥)

1.發(fā)病原因：

主要為ApoE異常所致，顯性遺傳

ApoE分為ApoE2、E3、E4等，性質(zhì)上的差異主要在于與ApoE受體(VLDL受體等)的結(jié)合能力不同，E2幾乎不能與VLDL受體結(jié)合。正常人基因型多為ApoE3/E3，其與VLDL受體的結(jié)合力正常，但Ⅲ型患者多為ApoE2/E2型，其與VLDL受體的結(jié)合力大為降低，導(dǎo)致VLDL在血漿中堆積。

第59頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二

2.臨床癥狀—黃色瘤，AS和冠心病等3.生化特征：（1）血清外觀：混濁，表面薄層奶油層（2）血脂分析：TG↑↑，Ch↑↑（3）電泳圖譜：出現(xiàn)?-VLDL；?－LP和Pre?

－LP區(qū)帶連接在一起形成寬而深染的色帶，故稱寬?-病。亦稱高?-VLDL血癥。（4）脂蛋白分析：IDL↑、(?-VLDL↑)

第60頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二Ⅳ型高脂蛋白血癥(家族性高TG血癥或高VLDL血癥)

本癥為高脂蛋白血癥中常見的類型，我國一半以上的高脂蛋白血癥屬于此型。常染色體顯性遺傳。

1.發(fā)病原因：

由于VLDL合成亢進和/或VLDL分解受阻。機制不詳。

第61頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二

2.生化特征：（1）血清外觀：混濁，4℃冰箱過夜無奶油層（2）血脂分析：TG↑↑、Ch正常或輕度升高。（3）電泳圖譜：Pre?

深染，（4）脂蛋白分析：VLDL↑，所以稱高VLDL血癥

3.臨床表現(xiàn)：

多在成年人發(fā)現(xiàn)，青少年少見?；颊吆苌儆悬S色瘤等皮膚特點，易發(fā)生冠心病，但不如Ⅱ、Ⅲ型嚴重。其他的癥狀可有肥胖、胰島素抵抗、高胰島素血癥、葡萄糖耐量異常及高尿酸血癥等。

第62頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二Ⅴ型高脂蛋白血癥(高CM和高前β-LP血癥)

1.發(fā)病原因：

ApoCⅡ↓LPL活性↓

其它原因?qū)е碌腖PL活性↓VLDL中的CM、

TG降解受阻第63頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二2.臨床表現(xiàn)：

常于20歲前發(fā)病，家族史明顯者，丘疹狀黃色瘤的發(fā)病率可高達30％－50％，并伴有胰腺炎、肝脾腫大；葡萄糖耐量異常、尿酸血癥以及缺血性心臟病等。

3.生化特征：（1）血清外觀：上層奶油層、下層混濁。（2）血脂分析：TG↑↑↑Ch正?；颉?）電泳圖譜：可見CM及前?－脂蛋白深染（4）脂蛋白：CM↑、

VLDL↑第64頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二第65頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二第66頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二

繼發(fā)性高脂蛋白血癥(secondaryhyperlipoproteinemia)

繼發(fā)性高脂蛋白血癥(secondaryhyperlipoproteinemias)比原發(fā)性高脂蛋白血癥更為多見，成人的發(fā)病率為3％～5％，常繼發(fā)于糖尿病、肝膽疾病和腎病等。過量攝入糖或飲酒也可引起繼發(fā)性高脂蛋白血癥。（1）糖尿病;（2）甲減;（3）腎病綜合征;（4）急性肝炎;（5）酗酒.第67頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二

(二)低脂蛋白血癥(自學(xué))1．家族性低β-脂蛋白血癥2．β-脂蛋白缺乏血癥3．家族性低α-脂蛋白血癥4．Tangier病第68頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二第二節(jié)血脂、脂蛋白及載脂蛋白測定一、血清（漿）靜置試驗二、血清（漿）總膽固醇測定三、血清（漿）甘油三酯測定四、血清（漿）脂蛋白測定五、血清載脂蛋白測定

第69頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二第二節(jié)血脂、脂蛋白及載脂蛋白測定

目前臨床上開展的血脂測定項目包括TC、TG、HDL及其亞類膽固醇、LDL-C、Lp（a）以及部分載脂蛋白如ApoAI、ApoB等。其中TC、TG、HDL-C、LDL-C測定是血脂測定的四個基本指標。血漿4℃冰箱中過夜觀察其分層現(xiàn)象及清澈度可初步估計各種脂蛋白的變化狀況。血漿脂蛋白電泳結(jié)合TC、TG水平有助于高脂血癥分型。概況：第70頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二血脂測定標準化：血脂分析前變異來源于：①生物因素，如年齡、性別、種族等因素的個體差異。②生活方式，包括飲食習(xí)慣、吸煙、運動及應(yīng)激等。③臨床方面包括疾病或藥物引起的脂代謝改變。④血標本采集與處理方面準確測定應(yīng)從分析前的準備開始，包括受試者的準備，標本采集，合格的試劑、校準物的選用，檢測方法選擇。方法學(xué)上應(yīng)該采用美國疾病控制中心（CDC）或中華醫(yī)學(xué)會檢驗分會推薦的操作方法。第71頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二一、血清（漿）靜置試驗

將患者空腹12h后采集靜脈血分離出血清置4℃冰箱中過夜，然后觀察其分層現(xiàn)象及清澈度。

正?？崭寡鍛?yīng)清澈透明。第72頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二

二、血清（漿）總膽固醇測定化學(xué)法酶法第73頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二（一）化學(xué)測定法由于操作較繁，不適于分析大批量標本，且不適于自動分析，目前臨床少用。第74頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二(二)酶測定法原理：是用膽固醇酯酶(CEH)水解膽固醇酯生成脂肪酸和膽固醇，膽固醇被膽固醇氧化酶(cholesteroloxidase，COD)氧化生成4—膽甾烯酮和H2O2，然后在過氧化物酶(POD)催化下，H2O2與4-氨基安替比林(4—AAP)及酚(三者合稱PAP)結(jié)合，生成紅色醌亞胺。醌亞胺的最大吸收峰在500nm左右，吸光度與標本中的膽固醇含量成正比。反應(yīng)式如下：第75頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二評價：優(yōu)點：特異性好、靈敏度高，線性范圍寬。既可用于手工操作，也可自動化分析；既可作終點法檢測，也可作速率法檢測。缺點：①某些膽固醇酯酶對膽固醇酯的水解不完全，造成結(jié)果偏低；②表面活性劑，如吐溫-40可以干擾膽固醇酯酶的作用，而聚乙烯醇6000可使結(jié)果提高1％-2％；③易受一些還原性物質(zhì)如尿酸、膽紅素、維生素C和谷胱甘肽等的干擾。第76頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二參考值血清參考值：3.0～5.20mmol／L；危險閾值：

5.20～6.20mmol／L；高膽固醇血癥：≥6.20mmol／L第77頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二臨床意義1、生理變化（1）20歲以上，隨年齡增加而升高，20歲至40歲，男性高于女性；50歲以上，女性高于男性。70歲以上，男女均有下降趨勢；（2）城市人群高于農(nóng)村人群，可能與飲食、生活環(huán)境等有關(guān)；（3）長期高脂、高蛋白飲食可使血清膽固醇升高；（4）腦力勞動者高于體力勞動者，精神緊張也可使血清膽固醇升高。第78頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二臨床意義2、病理變化（1）TC增高①腎病綜合征，由于大量蛋白質(zhì)從尿液中丟失，機體代償性合成?-脂蛋白增加的緣故；②糖尿病，由于糖尿病患者體內(nèi)乙酰CoA堆積，促進膽固醇合成增加；③膽道梗阻，造成膽固醇排出減少；④甲狀腺功能減退，膽固醇轉(zhuǎn)變?yōu)槟懼釡p少，血清膽固醇增高。（2）TC降低常見于低脂蛋白血癥、貧血、敗血癥、甲狀腺功能亢進、肝疾病、嚴重感染、營養(yǎng)不良、腸道吸收不良和藥物治療過程中的溶血性黃疸及慢性消耗性疾病，如癌癥晚期等。第79頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二三、血清（漿）甘油三酯測定化學(xué)法酶法第80頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二因操作步驟繁多、不能自動化等不適應(yīng)檢驗工作的發(fā)展而逐漸退出臨床實驗室。

（一）化學(xué)測定法第81頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二(二)酶測定法1、磷酸甘油氧化酶法（GPO-PAP法）原理評價優(yōu)點：酶試劑較穩(wěn)定，靈敏度高，線性范圍較寬。缺點：膽紅素和維生素C可使測定結(jié)果偏低第82頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二2乳酸脫氫酶法原理：評價：優(yōu)點：結(jié)果準確。缺點：靈敏度較低，試劑也不太穩(wěn)定。第83頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二3．甘油氧化酶法

原理：這是一種直接測定甘油的方法，分兩步反應(yīng)。第一步反應(yīng)：第二步反應(yīng)：

評價：靈敏度高，結(jié)果準確。第84頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二參考值正常參考范圍：0.55-1.70mmol/L；臨界閾值：

2.30mmol/L；危險閾值：

4.50mmol/L。第85頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二臨床意義1、血清TG增高：常見于家族性脂類代謝紊亂、腎病綜合征、糖尿病、甲狀腺機能減退、急性胰腺炎、糖原累積病、膽道梗阻、酗酒等。大量前瞻性的研究證實，富含TG的脂蛋白是CHD的獨立的危險因子，TG增加表明患者存在代謝綜合征，需進行治療。2、血清TG降低：比較少見，甲狀腺功能亢進、腎上腺皮質(zhì)功能減退和肝功能嚴重損傷時可以見到甘油三酯降低。第86頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二四、血清(漿)脂蛋白測定(一)高密度脂蛋白測定1磷鎢酸—鎂沉淀法原理：

用磷鎢酸鹽與鎂離子沉淀血清中的LDL、VLDL和Lp(a)后，上清液中只含有HDL，然后用酶法測定其中的膽固醇含量(與酶法測TC相同)。以HDL中的膽固醇含量(即HDL-C)作為HDL的定量依據(jù)。評價：優(yōu)點：標本用量少，操作簡便易行，結(jié)果穩(wěn)定，高TG血清不影響沉淀劑的沉淀效果，沉淀效果好，且不干擾酶法分析。批內(nèi)CV<l.87%，批間CV<2.93%。缺點：對溫度和pH改變很敏感，沉淀離心后放置時間不能過長，應(yīng)于4h內(nèi)立即檢測，若放置過久會使結(jié)果偏高。第87頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二2直接測定法原理：分兩步反應(yīng)，第一試劑用聚陰離子及分散型表面活性劑(即反應(yīng)抑制劑)，后者與LDL、VLDL和CM表面的疏水基團有高度親和力，吸附在這些脂蛋白表面形成掩蔽層，但不發(fā)生沉淀，能抑制這類脂蛋白中的膽固醇與酶試劑起反應(yīng)。第二試劑含膽固醇測定酶及具有對HDL表面的親水基團有親和力的表面活性劑(即反應(yīng)促進劑)，使酶與HDL中的膽固醇起反應(yīng)。評價：可用于自動分析。第88頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二參考值HDL-C合適范圍：≥1.04mmol／L(40mg／d1)；減低：<0.91mmol／L(35mg／d1)。第89頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二臨床意義(1)HDL-C與冠心病發(fā)病呈負相關(guān)，HDL-C低于0.9mmol／L是冠心病危險因素。(2)HDL-C下降還多見于腦血管病、糖尿病、肝炎、肝硬化病人。(3)高TG血癥往往伴以低HDL-C。（4）肥胖者的HDL-C也多偏低。（5）吸煙可使HDL-C下降。（6）適量飲酒、長期體力勞動和運動會使HDL-C升高。第90頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二(二)低密度脂蛋白測定1Friedewald公式法

LDL-C＝TC—HDL-C—TG／2.2(以mmol／L為單位時)評價：Friedewald公式計算法是目前應(yīng)用較廣的估測LDL-C的方法，具有簡便、直接、快速等優(yōu)點。主要是利用血清TC、TG及HDL-C濃度測定結(jié)果，計算LDL-C的濃度。但在血清中存在CM、血清TG>4.52mmol／L(400mg／d1)、血清中存在異常?-脂蛋白、Ⅲ型高脂血癥等脂代謝異常的高脂血癥時不宜采用Friedewald公式法計算。低密度脂蛋白水平通常以LDL-C含量表示，參考方法亦為超速離心法。第91頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二2聚乙烯硫酸鹽沉淀法(PVS沉淀法)原理：空腹血清中主要含有HDL、LDL、VLDL，用聚乙烯硫酸鹽沉淀LDL，上清液中存有VLDL和HDL；同時測定血清和上清液中的膽固醇含量，以總膽固醇減去上清液中的膽固醇含量即為LDL-C的量。膽固醇的測定同前述的酶法測定膽固醇含量。評價：PVS沉淀法是中華醫(yī)學(xué)會推薦的血脂測定方法。該法精密度中等水平，LDL-C的批內(nèi)CV<2.0％，批間CV<3.0％。測定上限值12.9mmol／L。受血清中高TG濃度的影響，TG>4.5mmol／L時，有時會因LDL沉淀不完全而出現(xiàn)結(jié)果偏低。第92頁，共100頁，2023年，2月20日，星期二

3直接測定法—消除法

原理：在第一反應(yīng)中，表面活性劑I—使非LDL脂蛋白結(jié)構(gòu)改變—促進其與CEH和COD反應(yīng)，并保護LDL不反應(yīng)—非LDL脂蛋白被消除；在第二反應(yīng)中，表面活性劑Ⅱ—促進未被消除的LDL-C與CEH和COD反應(yīng)—經(jīng)Trinder反應(yīng)顯色測定。顏色深淺與LDL-C量呈正比。評價：方便、準確，可用于自動分析，目前在臨床上使用最為廣泛第93頁，共100頁，2023年