消毒與滅菌的效果監(jiān)測

消毒與滅菌的效果監(jiān)測第1頁/共28頁消毒與滅菌的效果監(jiān)測——《醫(yī)療機構(gòu)消毒技術(shù)規(guī)范》解讀第2頁/共28頁醫(yī)療機構(gòu)消毒技術(shù)規(guī)范1.消毒與滅菌的基本原則；2.清洗與清潔，消毒與滅菌方法；3.清潔、消毒與滅菌的效果監(jiān)測。第3頁/共28頁院感相關(guān)標(biāo)本壓力蒸汽滅菌第4頁/共28頁空氣樣本的采集采樣要求提出選擇室內(nèi)消毒后或醫(yī)療活動之間進(jìn)行空氣標(biāo)本的采樣，或懷疑與醫(yī)院感染暴發(fā)有關(guān)時采樣，使用普通營養(yǎng)瓊脂平板采樣。（注意：采樣前，關(guān)閉門、窗，在無人走動的情況下，靜止10min后采樣。）采樣高度（沉降法）平板置距地面垂直高度0.8m～1.5m處。第5頁/共28頁空氣樣本的采集布點方法室內(nèi)面積≥30㎡，設(shè)一條對角線上取3點采樣，即中心一點，兩端各距離墻1m處各取一點；室內(nèi)面積＞30㎡，設(shè)東、南、西、北、中5點采樣，其中東、南、西、北點距離墻1m。采樣方法將直徑9cm普通營養(yǎng)瓊脂平板放置各采樣點，將平皿蓋打開，扣放于平皿旁，暴露5min后蓋上平皿蓋及時送檢。第6頁/共28頁空氣樣本的檢測與報告檢測培養(yǎng)將送檢平皿置36℃±1℃恒溫箱培養(yǎng)48h,計數(shù)菌落數(shù)，若懷疑與醫(yī)院感染暴發(fā)有關(guān)時，進(jìn)行目標(biāo)微生物的鑒定。結(jié)果處理計算所有平板菌落數(shù)，按公式換算結(jié)果。如臨床科室要求培養(yǎng)致病菌，則挑取可疑菌落進(jìn)行鑒定。計算公式：每個房間所有平板菌落總數(shù)/采樣點/（皿．暴露時間）報告:沉降法按平均每皿的菌落數(shù)報告：cfu/（皿．暴露時間）例如：2cfu/(5min·直徑9cm平皿)。第7頁/共28頁空氣樣本的結(jié)果判定

１.潔凈手術(shù)部（室）和其他潔凈場所，空氣中的細(xì)菌菌落總數(shù)要求應(yīng)遵循ＧＢ50333．第8頁/共28頁２.非潔凈手術(shù)部（室）、非潔凈骨髓移植病房、產(chǎn)房、導(dǎo)管室、新生兒室、器官移植病房、燒傷病房、重癥監(jiān)護(hù)病房、血液病病區(qū)空氣中的細(xì)菌菌落總數(shù)≤４cfu／（１５ｍｉｎ·直徑９ｃｍ平皿）。３.兒科病房、母嬰同室、婦產(chǎn)科檢查室、人流室、治療室、注射室、換藥室、輸血科、消毒供應(yīng)中心、血液透析中心（室）、急診室、化驗室、各類普通病室、感染疾病科門診及其病房空氣中的細(xì)菌菌落總數(shù)≤

4cfu/(5min·直徑9cm平皿)。第9頁/共28頁物體表面標(biāo)本的采集采樣時間在消毒處理后或懷疑與醫(yī)院感染暴發(fā)有關(guān)時進(jìn)行采樣。第10頁/共28頁物體表面標(biāo)本的采集采樣方法用5cmx5cm滅菌規(guī)格板放在被檢物體表面，用浸有無菌生理鹽水的棉拭子1支，在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返各涂抹5次，并隨之轉(zhuǎn)動棉拭子，連續(xù)采樣4個規(guī)格板面積，被采表面＜100cm2，取全部表面；被采表面≥100cm2，取100cm2。剪去手接觸部分，將拭子放入裝有10ml物表采樣液試管中送檢。門把手等小型物體則利用棉拭子直接涂抹物體表面采樣。采樣物體表面有消毒劑殘留時，采樣液應(yīng)含相應(yīng)中和劑。第11頁/共28頁物體表面標(biāo)本的檢測與報告檢測方法：充分震蕩采樣管后，取洗脫液1.0ml接種平皿，將冷至40℃-45℃的熔化營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基每皿傾注15ml-20ml，37℃恒溫箱培養(yǎng)48h,計數(shù)菌落數(shù)，懷疑與醫(yī)院感染暴發(fā)有關(guān)時，進(jìn)行目標(biāo)微生物的檢測。計算公式：物體表面細(xì)菌菌落數(shù)總數(shù)（cfu/cm2）=平板上菌落數(shù)×采樣液稀釋倍數(shù)/采樣面積。報告方式：菌落數(shù)cfu/cm2

小型物體表面的結(jié)果用cfu/件表示第12頁/共28頁物體表面標(biāo)本的結(jié)果判定1.潔凈手術(shù)部、其他潔凈場所，非潔凈手術(shù)部（室）、非潔凈骨髓移植病房、產(chǎn)房、導(dǎo)管室、新生兒室、器官移植病房、燒傷病房、重癥監(jiān)護(hù)病房、血液病病區(qū)等；物體表面細(xì)菌菌落總數(shù)≤5cfu/cm2。2.兒科病房、母嬰同室、婦產(chǎn)科檢查室、人流室、治療室、注射室、換藥室、輸血科、消毒供應(yīng)室、血液透析中心（室）、急診室、化驗室、各類普通病室、感染疾病科門診及其病房等，物體表面細(xì)菌菌落總數(shù)≥10cfu/cm2第13頁/共28頁壓力蒸汽滅菌效果的監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn)指示菌株：嗜熱脂肪桿菌芽孢采樣方法：將指示劑放置于標(biāo)準(zhǔn)試驗包中，置于壓力蒸汽滅菌器內(nèi)最難滅菌的位置處，執(zhí)行正常滅菌過程，完畢后將指示劑送檢。第14頁/共28頁壓力蒸汽滅菌效果的監(jiān)測檢測方法：將指示菌片捏碎，放入56℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48h，觀察結(jié)果。如指示菌片顏色為紫色，說明無嗜熱脂肪桿菌生長；如指示劑顏色為黃色則說明有嗜熱脂肪桿菌生長。報告方式：“檢出/未檢出嗜熱脂肪桿菌”。結(jié)果判定：陽性對照組培養(yǎng)陽性，試驗組培養(yǎng)陰性，判定為滅菌合格。陽性對照組培養(yǎng)陽性，試驗組培養(yǎng)陽性，則滅菌不合格；同時應(yīng)進(jìn)一步鑒定試驗組陽性的細(xì)菌是否為指示菌或是污染所致。第15頁/共28頁皮膚表面標(biāo)本的采集采樣時間按照產(chǎn)品使用說明規(guī)定的作用時間，達(dá)到消毒效果后及時采樣。采樣方法同物體表面標(biāo)本，不規(guī)則的皮膚可用棉拭子直接涂擦采樣。第16頁/共28頁醫(yī)護(hù)人員手表面標(biāo)本的采樣采樣時間在接觸病人或從事醫(yī)療活動前進(jìn)行采樣。第17頁/共28頁醫(yī)護(hù)人員手表面標(biāo)本的采樣采樣面積及方法被檢人五指并攏，用浸有無菌生理鹽水的無菌拭子在雙手指曲面從指根到指端來回涂擦各兩次，并隨之轉(zhuǎn)動采樣棉拭子（一只手涂抹面積30cm2），剪去手接觸部位，將拭子放入裝有10ml物表采樣液的試管中送檢。第18頁/共28頁皮膚表面標(biāo)本檢測方法計算公式同物體表面報告方式計算公式：物體表面細(xì)菌菌落數(shù)總數(shù)（cfu/cm2）=平板上菌落數(shù)×采樣液稀釋倍數(shù)/采樣面積。

第19頁/共28頁皮膚表面標(biāo)本的結(jié)果判斷結(jié)果判定：皮膚消毒效果的判定標(biāo)準(zhǔn)遵循WS/T313中外科手消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。a)衛(wèi)生手消毒，監(jiān)測的細(xì)菌菌落總數(shù)應(yīng)≤10cfu/cm2。b)外科手消毒，監(jiān)測的細(xì)菌菌落總數(shù)應(yīng)≤5cfu/cm2。第20頁/共28頁消毒液的送檢采樣要求采集使用中的消毒劑。采集方法用無菌注射器抽取1ml被檢樣液，加入9ml消毒中和液，混勻。第21頁/共28頁消毒液的培養(yǎng)與報告培養(yǎng)方法：同物體表面標(biāo)本計算公式：消毒液染菌量（CFU/mL）=平均每皿菌落數(shù)×10×稀釋倍數(shù)報告方式：菌落數(shù)CFU/mL。結(jié)果判斷：

使用中滅菌用消毒液：無菌生長；

使用中皮膚黏膜消毒液染菌量≤10CFU/mL；

其他使用中消毒液染菌量≤

100CFU/mL。第22頁/共28頁清潔用品的采樣采樣時間

消毒后、使用前進(jìn)行采樣。采樣方法

布巾、地巾等物品可用無菌的方法剪取1cm×3cm，直接投入10ml含相應(yīng)中和劑的無菌生理鹽水中，及時送檢。第23頁/共28頁清潔用品的報告與結(jié)果判斷檢測方法：將采樣管在混勻器上振蕩20s或用力振打80次，取采樣液檢測致病菌。報告方式：檢出/未檢出細(xì)菌或真菌，報告為“檢出××菌”。結(jié)果判定：

未檢出致病菌為消毒合格。第24頁/共28頁其他標(biāo)本內(nèi)鏡樣本的采樣用10ml中和液反復(fù)沖洗鏡后取回收液于試管中送檢。透析液的采樣用滅菌試管無菌操作采集透析液5ml送檢。第25頁/共28頁內(nèi)鏡標(biāo)本的檢測與報告培養(yǎng)方法：同物體表面標(biāo)本，若臨床要求培養(yǎng)致病菌，則收到標(biāo)本后，取0.1ml均勻接種于普通瓊脂培養(yǎng)基表面，放入35