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需求內容-長非編碼RP11-426A6.5與轉錄元件相互作用的檢測與分析一、功能用途主要用于檢測與分析長非編碼RP11-426A6.5與轉錄元件相互作用。二、技術參數(shù)1、實驗材料)細胞SAS/HSC32)構建過表達RP11-426A6.5的過表達質粒及其對照質粒3)訂購RNAPULLDOWN檢測試劑盒(按12T訂購)4)訂購特異性結合RP11-426A6.5的生物素標記探針(正義探針,反義探針,陰性探針)。2、實驗內容培養(yǎng)SAS細胞、HSC3細胞,按要求分為SAS細胞對照組:培養(yǎng)SAS細胞轉染對照質粒SAS細胞過表達組:培養(yǎng)SAS細胞轉染過表達RP11-426A6.5的過表達質粒HSC3細胞對照組:培養(yǎng)SAS細胞轉染對照質粒HSC3細胞過表達組:培養(yǎng)SAS細胞轉染過表達RP11-426A6.5的過表達質粒轉染48h后,收細胞:1)取一部分細胞,提取RNA,qPCR檢測RP11—426A6.5,確定過表達2)剩余細胞,按試劑盒要求裂解,按試劑盒說明要求,采用生物素標記探針進行RNAPULLDOWN檢測,最后帕檢測EZH2的表達。項目技術參數(shù)細胞培養(yǎng)用二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)4瓶細胞,每瓶IO,數(shù)量細胞。細胞轉染Lipo2000轉染轉染效率90%。RNApulldown實驗用RP11-426A6.5探針進行RNApulldow富集相互作用蛋白陰性探針、反義探針、正義探針3組。質粒構建分子克隆pcDNA3.1-NC和pcDNA3.1-RP11-426A6.5QPCR檢測采用QPCR檢測試劑盒使用伯樂IQ5儀器檢測三、配置清單:實驗內容數(shù)量RP11-426A6.5的表達質粒及其對照質粒構建1特異性結合RPH-426A6.5的生物素標記探針(正義探針,反義探針,陰性探針)1RP11-426A6.5引物設計以及驗證1EZH2抗體1細胞培養(yǎng)2細胞轉染4RNA提取4逆轉錄4qPCR8RNAPULLDOWN實驗4WB檢測2四、售后服務.供應商應按照本采購項目特點提供長期良好的售后服務,并在響應文件中提供詳細具體的售后服務承諾條款及保證,在質保期內售后服務所需費用列入報價。.要求供應商必須擁有專業(yè)的售后維護服務團隊,能夠保證本項目正常運行。.投標的產品供應商應提供服務條款說明書,并提供相關服務機構有關資格證明文件及公司(廠家)、地址、聯(lián)系人、聯(lián)系電話。.在質保期內,成交供應商提供7*24小時服務。對于產品在使用過程中出現(xiàn)的問題,在1小時內響應。如遇與所供產品有關的問題無法遠程解決的,在事件確定后2小時內趕到現(xiàn)場提供服務。2小

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