微生物學(xué)實驗一

微生物學(xué)實驗一微生物學(xué)實驗

實驗室須知

1.應(yīng)保持實驗室安靜，切勿高聲喧嘩和隨意走動。2.實驗室內(nèi)禁止飲食、吸煙、及用嘴濕潤鉛筆和標簽等物。3.使用顯微鏡和其它貴重儀器時，應(yīng)在教師同意后方可使用，切勿擅自拆卸，否則因此而損壞儀器，應(yīng)予以賠償。4.遇意外發(fā)生，應(yīng)立即報告教師，不可自己隨意處理。

實驗室注意事項：1.每次實驗前必須認真預(yù)習(xí)，課堂上注意聆聽教師對實驗內(nèi)容的講解，注意觀察教師的示范操作。2.實驗時應(yīng)仔細認真，嚴格按操作規(guī)程進行，注意改變生活中的習(xí)慣動作，以掌握微生物學(xué)實驗的科學(xué)操作方法。3.使用貴重儀器應(yīng)先事先熟知操作規(guī)程，遇儀器故障時請教師幫助解決。4.實驗中如遇菌液外溢、皮膚劃傷或菌液吸入等意外，應(yīng)立即報告老師及時進行處理，不得隱瞞，以免釀成后患。5.注意安全，易燃物品如二甲苯、吸水紙等應(yīng)遠離火源。打火機只能用于點燃酒精燈，酒精燈用完應(yīng)及時蓋上燈帽。6.實驗完畢，必須將儀器放到指定地點，帶菌工具應(yīng)先進行消毒。

實驗室注意事項：7.實驗需進行培養(yǎng)的材料，要標明姓名、組別、日期后，放于教師指定的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。8.未經(jīng)教師同意，實驗室中的任何菌種和物品不得攜帶出室外。9.實驗時應(yīng)認真進行觀察和操作，做好實驗記錄；有疑難問題向教師求教。10.勵行節(jié)約，對水、電、染色液、鏡油、擦鏡紙、吸水紙及其它藥品等均應(yīng)節(jié)約使用。11.實驗后應(yīng)對實驗室整理清掃，洗手后方可離開實驗室，關(guān)窗鎖門。

微生物學(xué)實驗室常用的器皿1.試管2.吸管3.培養(yǎng)皿4.三角燒瓶5.載玻片與凹玻片–普通載玻片用于微生物涂片、染色，作形態(tài)觀察等–凹玻片是在一塊厚玻片的當中有一圓形凹窩，作懸滴觀察活細菌以及微室培養(yǎng)用。6.滴瓶：用來裝各種染料、生理鹽水等7.接種工具：接種環(huán)、接種針等

常用器材酒精燈接種環(huán)試管夾吸耳球計數(shù)器鑷子香柏油擦鏡紙1/人1/人1/人1/2人1/2人1/2人1/2人1/2人

實驗報告格式基本信息的填寫(不能留空)。題目目的原理材料和器皿實驗報告必須以實事求是、嚴肅認真的科學(xué)態(tài)度，按照指導(dǎo)書的要求按時完成。實驗報告應(yīng)該簡明扼要、敘述準確、數(shù)據(jù)完整、繪圖清晰且寫實，應(yīng)有討論、有分析，結(jié)論明確。

方法和步驟實驗結(jié)果–畫圖–文字描述分析和討論思考題

清潔與衛(wèi)生保持實驗臺的清潔與試劑架的整齊潔凈。廢紙、培養(yǎng)基等廢棄物一律丟入垃圾桶內(nèi)，嚴禁放入水槽！培養(yǎng)皿、玻片、試管等玻璃儀

器清洗后一律擱置涼在不朽鋼網(wǎng)框里。玻片上的染液必須徹底清洗干凈(用洗衣粉洗)。培養(yǎng)皿、試管等玻璃儀器上做的標記必須徹底洗凈。最終垃圾由值日生倒入衛(wèi)生間籮框里，濕拖把掛在水槽水龍頭架上滴水涼干。每次值日生4人。

實

驗

內(nèi)

容

實驗一顯微鏡油鏡的使用及細菌的簡單染色法實驗二細菌的革蘭氏染色及芽孢染色法實驗三鞭毛染色法及活細菌運動性的觀察實驗四四大類微生物菌落及個體形態(tài)觀察實驗五微生物大小測定及血球計數(shù)板計數(shù)實驗六培養(yǎng)基配制及滅菌實驗七微生物的分離純化與平板菌落計數(shù)實驗八微生物的生理生化反應(yīng)(一)實驗九微生物的生理生化反應(yīng)(二)

實驗一顯微鏡油鏡的使用及細菌的簡單染色法教學(xué)目標或要求：※掌握顯微鏡油鏡的工作原理及使用方法；※學(xué)習(xí)細菌制片和簡單染色技術(shù)；※觀察細菌的三種基本形態(tài)；※初步建立無菌操作的概念；

普通光學(xué)顯微鏡

普通光學(xué)顯微鏡根據(jù)物鏡與被檢物體之間的介質(zhì)不同，可分為：①干燥系物鏡。以空氣為介質(zhì)，包括低倍物鏡(4*、10*)和高倍物鏡(40*)。②油浸系物鏡。常以香柏油為介質(zhì)，此物鏡又叫油鏡頭(100*),其上?？逃小癏I”(homogeneousimmersion)或“OI”(oilimmersion)字樣，有的還刻有一圈紅線或黑線標記。

油鏡使用的原理油鏡的透鏡很小，光線通過玻

片與油鏡頭之間的空氣時，因介質(zhì)密度不同，發(fā)生折射或全反射，使射入透鏡的光線減少，

物象顯現(xiàn)不清。若在油鏡與載玻片之間加入和玻璃折射率(n=1.52)相近的香柏油(n=1.515),則使進入透鏡的光線增多，視野亮度增強，使物象明亮清晰。

瞳距調(diào)節(jié)

粗調(diào)松緊調(diào)節(jié)旋鈕

聚光鏡中心調(diào)節(jié)②10X物鏡①標本

④聚光鏡升降旋鈕

油鏡觀察操作方法在高倍鏡或低倍鏡下找到要觀察的樣品區(qū)域后，然后將油鏡轉(zhuǎn)到工作位置。在待觀察的樣品區(qū)域滴加香柏油，從側(cè)面注視，用粗調(diào)節(jié)器使油鏡浸在鏡油中并幾乎與標本相接。然后用細調(diào)節(jié)器調(diào)節(jié)，在目鏡下找到

最合適的觀察點。油鏡使用畢后：上升鏡筒，取下載玻片，用擦鏡紙拭去鏡頭上的鏡油，然后用擦鏡紙蘸少許二甲苯(香柏

油溶于二甲苯)擦去鏡頭上殘留的油跡，最后用干凈的擦鏡紙擦去殘留的二甲苯。

普通光學(xué)顯微鏡注意事項1.觀察標本時，兩眼宜同時睜開。減少眼睛疲勞。最好用左眼觀察，右眼配合繪圖和記錄。2.使用油鏡必須按先用低倍鏡和高倍鏡觀察，再用油鏡觀察。3.下降鏡頭時，一定要從側(cè)面注視，切忌用眼睛對著目鏡，邊觀察邊下降鏡頭的錯誤操作，

以免壓碎玻片而損壞鏡頭。4.使用二甲苯擦鏡頭時，注意二甲苯不能過多，以防溶解固定透鏡的樹脂。5.注意保持顯微鏡的潔凈，對金屬部分要用軟布擦拭，擦鏡頭必須用擦鏡紙，切勿用手或用普通布、紙等，以免損壞鏡頭。

顯微結(jié)構(gòu)圖的繪制(1)繪圖要用黑色硬鉛筆，不要用軟鉛筆或有色鉛筆，一般用2H鉛筆為