亂七八糟09本檢驗開題報告

IL-10作用下MRL小鼠T淋巴細胞活化后的增殖情況的研究

姓名:楊菁華專業(yè):醫(yī)學檢驗指導教師:嚴丹丹刁騁年級班級:09級19班

健康人SLE患者一.研究目的及意義目的：討論IL-10作用下MRL小鼠T淋巴細胞活

化后的增殖情況，為進一步研究IL-10相關(guān)免疫疾病的發(fā)病及進展提供有力支持。意義

IL-10通過與表達在T淋巴細胞表面的受體結(jié)合可以抑制T淋巴細胞的功能，參與對T細胞的免疫調(diào)節(jié)。T淋巴細胞通過增殖分化發(fā)揮作用，增殖情況的異常與SLE的發(fā)病和進展有一定關(guān)系。在MRL小鼠中IL-10R1的改變可能會引起IL-10對T淋巴細胞功能的抑制性調(diào)節(jié)喪失，成為SLE發(fā)病的因素。二、國內(nèi)外研究現(xiàn)狀SLE是典型的自身免疫性疾病，免疫學異常是本病發(fā)生的關(guān)鍵。目前國內(nèi)外對本病中B淋巴細胞的研究比較多，對T淋巴細胞的相關(guān)研究比較少。IL-10

作為抑制性的細胞因子具有多種功能，被發(fā)現(xiàn)與多種自身免疫病發(fā)病及進展相關(guān)，被證實在SLE發(fā)病中起重要作用

。3.IL-10與其特異性受體IL-10R結(jié)合發(fā)揮作用（1）目前IL-10R1的異常引起IL-10生理功能的異常已被重視。

（2）淋巴細胞表面IL-10R1表達情況。

1）人類未活化：表達較高水平IL-10R1

活化后：IL-10R1表達水平有所下調(diào)

2）小鼠：未活化：表面不表達IL-10R1

活化后：IL-10R1短暫表達

活化后C57BL/6小鼠CD4+T淋巴細胞IL-10R1表達情況，來源文獻（刁騁等.2011）anti-CD3和anti-CD28刺激后的CD8+T淋巴細胞的IL-10R1的表達情況,實線為CD8+T淋巴細胞，陰影為對照。來源文獻（ParthaSarathiBiswasetal.2007）3)R1受體在胞漿中呈區(qū)段性分布,MRL小鼠IL-10R1基因在抑制區(qū)段發(fā)生基因突變，導致負調(diào)節(jié)喪失。4.Ｔ淋巴細胞在識別抗原后，經(jīng)過增殖，分化為效應性淋巴細胞發(fā)揮免疫應答作用。據(jù)此我認為有必要對IL-10作用下MRL小鼠T淋巴細胞活化后的增殖情況進行研究。三、研究內(nèi)容和預期目標研究內(nèi)容：

１．闡明C57BL/6小鼠和MRL小鼠中IL-10對活化后T淋巴細胞增殖的影響并比較兩種小鼠T細胞的增殖情況。

２．闡明MRL小鼠中IL-10對活化后T淋巴細胞增殖功能的調(diào)節(jié)能力的喪失與SLE發(fā)病的關(guān)系。

C57BL/6小鼠

MRL小鼠預期目標：MRL小鼠中IL-10對活化后T淋巴細胞增殖功能的調(diào)節(jié)能力喪失，使T細胞介導的免疫應答水平過強，與SLE發(fā)病有密切關(guān)系。四、課題擬采用的研究方法步驟研究方法：MTT法。2.根據(jù)實驗結(jié)果采用統(tǒng)計學軟件對各組結(jié)果進行統(tǒng)計分析。研究步驟：

1.取各組小鼠脾細胞。2.采用尼龍毛法去除B淋巴細胞。3.Anti-CD3和anti-CD28共同刺激下活化T淋巴細胞。