分析化學(xué)試驗(yàn)指導(dǎo)書

本文格式為Word版，下載可任意編輯——分析化學(xué)試驗(yàn)指導(dǎo)書

分析化學(xué)試驗(yàn)

指導(dǎo)書

（供全日制本科中藥學(xué)、藥學(xué)類專業(yè)用）

甘肅中醫(yī)學(xué)院《分析化學(xué)試驗(yàn)》課程組編

（2023年10月）

前言

《分析化學(xué)》是關(guān)于研究物質(zhì)的組成、含量、結(jié)構(gòu)、和形態(tài)等化學(xué)信息的分析方法及理論的一門科學(xué)，即是一門獨(dú)立的化學(xué)信息科學(xué)。分析化學(xué)試驗(yàn)是分析化學(xué)課程的重要組成部分。它是通過試驗(yàn)的方法，使學(xué)生加深理解和穩(wěn)定在分析化學(xué)課堂中所學(xué)的理論知識，并使學(xué)生正確熟練地把握化學(xué)分析和儀器分析的基本操作和技能。通過試驗(yàn)可使學(xué)生學(xué)會正確合理地選擇試驗(yàn)條件和試驗(yàn)儀器，擅長觀測試驗(yàn)現(xiàn)象和進(jìn)行試驗(yàn)記錄，正確處理數(shù)據(jù)和表達(dá)試驗(yàn)結(jié)果；培養(yǎng)學(xué)生良好的試驗(yàn)習(xí)慣、實(shí)事求是的科學(xué)態(tài)度和嚴(yán)謹(jǐn)細(xì)致的工作作風(fēng)，以及獨(dú)立思考、分析問題、解決問題的能力；以使學(xué)生逐步地把握科學(xué)研究的技能和方法，為學(xué)習(xí)后續(xù)課程和將來工作奠定良好的實(shí)踐基礎(chǔ)。

本課程試驗(yàn)內(nèi)容包括分析天平的稱量練習(xí)、重量分析試驗(yàn)、滴定分析試驗(yàn)、電化學(xué)試驗(yàn)、高效液相色譜、氣相色譜、薄層色譜、紫外分光光度法試驗(yàn)，還包括自擬和自選試驗(yàn)。

試驗(yàn)內(nèi)容總表：

一、化學(xué)分析試驗(yàn)：序號試驗(yàn)項(xiàng)目名稱學(xué)時(shí)數(shù)項(xiàng)目類別試驗(yàn)一試驗(yàn)二試驗(yàn)三試驗(yàn)四試驗(yàn)五試驗(yàn)六試驗(yàn)七試驗(yàn)八分析天平的稱量練習(xí)器皿的洗滌，使用，容器的校準(zhǔn)（3學(xué)時(shí)）（6學(xué)時(shí)）基礎(chǔ)基礎(chǔ)基礎(chǔ)基礎(chǔ)基礎(chǔ)基礎(chǔ)基礎(chǔ)基礎(chǔ)項(xiàng)目類型必做選做必做必做選做選做必做必做氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.1mol/L）的配制與標(biāo)定（3學(xué)時(shí)）草酸含量測定混合酸的測定（3學(xué)時(shí)）（3學(xué)時(shí)）EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.05mol/L）的配制與標(biāo)定（3學(xué)時(shí)）水的硬度測定硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制與標(biāo)定、碘標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制與標(biāo)定和維生素C片的含量測定（3學(xué)時(shí)）（6學(xué)時(shí)）試驗(yàn)九試驗(yàn)十0.02mol/LKMnO4標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制與標(biāo)定H2O2含量的測定（3學(xué)時(shí)）（3學(xué)時(shí)）基礎(chǔ)基礎(chǔ)必做必做總學(xué)時(shí)

二、儀器分析試驗(yàn)：

序號選六個(gè)18試驗(yàn)項(xiàng)目名稱學(xué)時(shí)數(shù)項(xiàng)目類別項(xiàng)目類型選做必做試驗(yàn)十一試驗(yàn)十二飲用水中氟含量的測定可見分光光度計(jì)性能檢驗(yàn)藥物中鐵含量的測定（4學(xué)時(shí)）（5學(xué)時(shí)）基礎(chǔ)基礎(chǔ)試驗(yàn)十三雙波長分光光度法測定安鈉咖注射液中的咖啡因（3學(xué)時(shí)）基礎(chǔ)必做試驗(yàn)十四導(dǎo)數(shù)光譜法測定安鈉咖注射液中的咖啡因（3學(xué)時(shí)）基礎(chǔ)選做試驗(yàn)十五維生素B12吸收光譜的繪制及其注射液的鑒別和測定（3學(xué)時(shí)）基礎(chǔ)選做試驗(yàn)十六試驗(yàn)十七試驗(yàn)十八試驗(yàn)十九系數(shù)倍率法測定槐米中蘆丁含量生物堿成分薄層層析菠菜葉色素的分開(綜合性試驗(yàn))熒光分析法測定鄰-羥基苯甲酸和間-羥基苯甲酸（3學(xué)時(shí)）（3學(xué)時(shí)）（3學(xué)時(shí)）（3學(xué)時(shí)）基礎(chǔ)基礎(chǔ)基礎(chǔ)基礎(chǔ)選做必做選做必做試驗(yàn)二十原子吸收法測定感冒沖劑中的銅（3學(xué)時(shí)）（4學(xué)時(shí)）基礎(chǔ)基礎(chǔ)選做必做試驗(yàn)二十一氣相色譜的載氣流速與理論塔板高度的關(guān)系試驗(yàn)二十二苯甲酸、山梨酸的酯化衍生物及高相液相色譜測定總學(xué)時(shí)（4學(xué)時(shí)）基礎(chǔ)必做選30學(xué)時(shí)這些試驗(yàn)的安排為學(xué)生將來參與藥物新品種、新工藝、新技術(shù)的研究與開發(fā)及中藥質(zhì)量控制等打下堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)，為將來從事藥學(xué)研究提供一個(gè)實(shí)踐基礎(chǔ)。

試驗(yàn)時(shí)數(shù)：

按2023年制訂的本科專業(yè)學(xué)分制教學(xué)計(jì)劃要求，規(guī)定中藥學(xué)本科“分析分析試驗(yàn)〞的計(jì)劃學(xué)時(shí)數(shù)為48學(xué)時(shí)，可選做試驗(yàn)?zāi)夸浿械?6個(gè)試驗(yàn)；藥物制劑與中草藥栽培與鑒定本科“分析化學(xué)試驗(yàn)〞的計(jì)劃學(xué)時(shí)數(shù)為66學(xué)時(shí)，可選做試驗(yàn)?zāi)夸浿械?2個(gè)試驗(yàn)。

試驗(yàn)要求：

分析化學(xué)試驗(yàn)是一門實(shí)踐性很強(qiáng)的學(xué)科，試驗(yàn)教學(xué)最重要的任務(wù)是發(fā)展學(xué)生查閱、動手、思維、想象和表達(dá)能力，重點(diǎn)是培養(yǎng)學(xué)生觀測問題、分析問題和解決問題的能力，加強(qiáng)學(xué)生對“量〞的概念的認(rèn)識。是在老師指導(dǎo)下所進(jìn)行的一種特別形式的科學(xué)實(shí)踐活動，是學(xué)生走向社會獨(dú)立進(jìn)行科學(xué)實(shí)踐的預(yù)演。通過分析化學(xué)試驗(yàn)課的學(xué)習(xí)，學(xué)生應(yīng)對具體的試驗(yàn)過程首先應(yīng)當(dāng)有一個(gè)直觀、感性的認(rèn)識，在此基礎(chǔ)上再通過認(rèn)真、嚴(yán)格、細(xì)致的操作練習(xí)，在獲取試驗(yàn)數(shù)據(jù)的過程中培養(yǎng)良好的科學(xué)作風(fēng)和獨(dú)立從事科學(xué)實(shí)踐的能力。具體要求如下：

1.開設(shè)試驗(yàn)課前，由指導(dǎo)老師制定試驗(yàn)教學(xué)進(jìn)度，每個(gè)試驗(yàn)提前一周備課，明確試驗(yàn)的目的、要求和有關(guān)本卷須知，做好記錄。

2.每次試驗(yàn)，指導(dǎo)老師提前10—15分鐘進(jìn)入試驗(yàn)室，檢查試驗(yàn)設(shè)施，熟悉藥品擺放狀況準(zhǔn)備試劑、試樣。

3．試驗(yàn)過程中，教師不得擅自離開試驗(yàn)室。注意巡查觀測，認(rèn)真輔導(dǎo)，隨時(shí)改正個(gè)別學(xué)生不規(guī)范的操作。試驗(yàn)終止后，檢查學(xué)生的數(shù)據(jù)記錄和試驗(yàn)臺衛(wèi)生狀況，提醒學(xué)生檢查水、電、氣、門窗、鑰匙柜是否關(guān)好。然后告知試驗(yàn)室值班人員，經(jīng)檢查合格后方可允許學(xué)生離開。

4.要求學(xué)生課前必需認(rèn)真預(yù)習(xí)。理解試驗(yàn)原理，了解試驗(yàn)步驟，探尋影響試驗(yàn)結(jié)果的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，做好必要的預(yù)習(xí)筆記。未預(yù)習(xí)者不得進(jìn)行試驗(yàn)。

5．教師在試驗(yàn)前先檢查學(xué)生的預(yù)習(xí)報(bào)告，結(jié)合當(dāng)次試驗(yàn)內(nèi)容中涉及的操作要點(diǎn)進(jìn)行簡要講解，然后指導(dǎo)學(xué)生做好試驗(yàn)準(zhǔn)備工作。

6．學(xué)生試驗(yàn)開始后，要求學(xué)生細(xì)心觀測和詳細(xì)、忠實(shí)記錄試驗(yàn)中發(fā)生的各種試驗(yàn)現(xiàn)象，記錄的原始數(shù)據(jù)不能刪改（不能用鉛筆記）。數(shù)據(jù)記錄在專用的、預(yù)先編好頁碼的試驗(yàn)記錄本上。如有疑問可與同組學(xué)生進(jìn)行現(xiàn)場探討，也可與指導(dǎo)老師探討，必要時(shí)可重做試驗(yàn)，最終經(jīng)指導(dǎo)老師認(rèn)可，方能終止試驗(yàn)。

7．認(rèn)真、及時(shí)寫好試驗(yàn)報(bào)告。撰寫試驗(yàn)報(bào)告是儀器分析試驗(yàn)的重要環(huán)節(jié)，試驗(yàn)數(shù)據(jù)的處理與分析都要在報(bào)告中表達(dá)出來。報(bào)告的內(nèi)容除了試驗(yàn)名稱、試驗(yàn)日期、試驗(yàn)儀器型號、試驗(yàn)操作條件等常規(guī)內(nèi)容外，還要包括對該試驗(yàn)的總結(jié)與探討，對少數(shù)試驗(yàn)異?，F(xiàn)象進(jìn)行解釋分析，老師將批改試驗(yàn)報(bào)告并給出報(bào)告成績。

8．所有試驗(yàn)終止后，要以口試、操作技能考核等多種方式進(jìn)行期末考核，考核結(jié)果計(jì)入總成績。

9.要求學(xué)生遵守試驗(yàn)室的各項(xiàng)規(guī)章制度。了解“消防設(shè)施〞和“安全通道〞的位置。樹立環(huán)境保護(hù)意識，盡量降低化學(xué)物質(zhì)（特別是有毒有害試劑以及洗液、洗衣粉等）的消耗。

10.要求學(xué)生保持室內(nèi)恬靜，保持試驗(yàn)臺面清潔整齊。愛護(hù)儀器和公共設(shè)施，樹立良好的公共道德。目錄化學(xué)分析部分

試驗(yàn)1分析天平與稱量

試驗(yàn)2滴定分析器皿及其使用試驗(yàn)3容量器皿的校準(zhǔn)試驗(yàn)40.1mol/L氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制與標(biāo)定試驗(yàn)5草酸含量測定

試驗(yàn)6混合酸（堿）測定方法的設(shè)計(jì)(設(shè)計(jì)性試驗(yàn))試驗(yàn)70.05mol/LEDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制與標(biāo)定試驗(yàn)8水硬度測定

試驗(yàn)9硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制與標(biāo)定、

碘標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制與標(biāo)定和維生素C片的含量測定

試驗(yàn)100.02mol/LKMnO4標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制與標(biāo)定試驗(yàn)11H2O2含量的測定

試驗(yàn)12飲用水中氟含量的測定試驗(yàn)13分光光度計(jì)的性能檢驗(yàn)試驗(yàn)14藥物中微量鐵的測定

試驗(yàn)15吸收曲線的測繪及吸收系數(shù)的測定試驗(yàn)16標(biāo)準(zhǔn)曲線法測定蘆丁含量

試驗(yàn)17維生素B12注射液的定性鑒別、定量分析

試驗(yàn)18雙波長分光光度法測定安鈉咖注射液中咖啡因的含量試驗(yàn)19導(dǎo)數(shù)光譜法測定安鈉咖注射液中咖啡因的含量試驗(yàn)20銀黃口服液中黃芩苷和綠原酸的含量測定試驗(yàn)21原子吸收法測定感冒沖劑中的銅

試驗(yàn)22氣相色譜的載氣流速與理論塔板高度的關(guān)系試驗(yàn)23氣相色譜法測定醇的同系物

試驗(yàn)24苯甲酸、山梨酸的酯化衍生物及高相液相色譜測定試驗(yàn)25熒光分析法測定鄰-羥基苯甲酸和間-羥基苯甲酸

試驗(yàn)26柱色譜法測定氧化鋁活度試驗(yàn)27紙色譜法分開氨基酸試驗(yàn)28薄層色譜法測定甜葉菊苷含量試驗(yàn)29雙波長薄層色譜掃描法測定甲基紅含量試驗(yàn)30菠菜葉色素的分開(綜合性試驗(yàn))

試驗(yàn)31槐花米中蘆丁的色譜分開和鑒定（綜合性試驗(yàn)）試驗(yàn)32金銀花中綠原酸的TLC鑒別(設(shè)計(jì)性試驗(yàn))附錄

試驗(yàn)1分析天平與稱量

一、試驗(yàn)?zāi)康?/p>

1．了解分析天平的結(jié)構(gòu)，熟悉砝碼的組合；

2．學(xué)會正確使用天平；3．把握直接稱量和遞減稱量法。

二、基本原理

分析天平是定量分析中最重要的儀器之一，每一項(xiàng)定量分析工作都直接或間接地需要

使用天平，常用的分析天平有阻尼天平、半自動電光天平、全自動電光天平、單盤電光天平和電子天平等。這些天平的構(gòu)造和使用方法雖有些不同，但基本原理是一致的。(一)分析天平的原理

各類分析天平都是根據(jù)杠桿原理設(shè)計(jì)制造的。下圖為半自動電光分析天平的結(jié)構(gòu)示意圖。

1．天平梁：是天平的主要部件。多用質(zhì)輕穩(wěn)固、膨脹系數(shù)小的鋁銅合金制成，起平衡和承載物體的作用。梁上裝有三個(gè)棱形的瑪瑙刀，其中一個(gè)裝在正中的稱為支點(diǎn)刀，刀口向下；另外兩個(gè)與支點(diǎn)刀等距離的分別安裝在梁的兩端，稱為承重刀，刀口向下。三個(gè)刀口必需完全平行且位于同一水平面上。

2．支柱與水平泡：支柱是金屬做的中空金屬圓柱，下端固定在天平底座中央，支撐著天平梁。在支柱上裝有水平泡，借螺旋墊腳調(diào)理天平放置水平。

3．指針和感量螺絲：指針固定在梁的正中，下端的后面有一塊刻有分度的標(biāo)牌，借以觀測天平梁的傾斜程度。指針上裝有感量螺絲，用來調(diào)理梁的重心，以改變天平的靈敏度。

4．吊耳和稱量盤：吊耳掛在兩個(gè)邊刀上，下面掛有稱量盤。尋常左盤放稱量物，右盤放砝碼。

5．空氣阻尼器：由兩個(gè)特制的金屬圓筒構(gòu)成，外筒固定在支柱上，內(nèi)筒比外筒略小，懸于吊耳鉤下，兩筒間隙均勻，沒有摩擦。當(dāng)梁搖擺時(shí)，左右阻尼器的內(nèi)筒也隨之上下移動，使筒內(nèi)外的空氣壓力一致，便產(chǎn)生抵制膨脹和壓縮的力。這樣利用筒內(nèi)空氣的阻力使之很快停擺達(dá)到平衡，以加快稱量速度。

1—升降旋鈕；2—稱量盤；3—投影屏；4—空氣阻尼器；5—瑪瑙刀；

6—天平梁；7—平衡螺絲；8—機(jī)械加碼器；9—指針；10—立柱；11—金屬拉桿；

6．平衡螺絲：在梁的上部左右兩端各裝有一個(gè)螺絲，用來調(diào)理天平的零點(diǎn)。7．升降樞：

8．天平箱：起保護(hù)天平的作用，在稱量時(shí)，減少外界溫度、空氣滾動、人的呼吸等的影響。

9．砝碼：每臺天平均附有一套砝碼。1g以上的砝碼用銅合金或不銹鋼制成；1g以下的稱為圈碼。

(二)天平的靈敏度

天平的靈敏度是指天平盤上增加1mg所引起的指針在讀數(shù)標(biāo)牌上偏移的格數(shù)，靈敏度(E)的單位為分度/mg，在實(shí)際工作中，常用靈敏度的倒數(shù)來表示天平的靈敏程度，即

S?1(mg/分度)ES稱為天平的分度值，也稱為感量。分度值越小的天平，其靈敏度越高。(三)稱量的一般程序和方法

1．取下天平罩，疊好后放在天平箱后面或天平箱頂上。檢查天平是否處于水平狀態(tài)，盤上有無污垢，用軟毛刷拭去灰塵。

2．檢查、調(diào)整日平的零點(diǎn)：接通電源，漸漸開啟天平，在不載重的狀況下，檢查投影屏

上的標(biāo)尺的位置，若零點(diǎn)與投影屏上的標(biāo)線不重合，可撥動升降旋鈕下的扳手，挪動投影屏的位置，使其重合；若相差較大，可借平衡螺絲調(diào)整使其重合，即為天平的零點(diǎn)。3．在臺秤上粗稱被稱量物的質(zhì)量。

4．將被稱量物放入稱量盤并關(guān)好側(cè)門，在砝碼盤上放置粗稱得到的相應(yīng)質(zhì)量的砝碼，開啟天平，試稱。根據(jù)砝碼與稱量物的質(zhì)量關(guān)系，依照“由大到小，減半?yún)⑴c〞的原則增減砝碼，直至天平平衡。(四)稱量方法

1．固定質(zhì)量稱量法要求試樣本身不吸水并在空氣中性質(zhì)穩(wěn)定。

先稱量容器(如表面皿)的質(zhì)量，并記錄平衡點(diǎn)。再稱試樣，如指定稱取0.3000g時(shí)，在砝碼盤上增加0.3000g砝碼，在稱量盤上參與略少于0.3g的試樣，然后用藥匙輕輕振動，使試樣漸漸落入容器中，直至平衡點(diǎn)與稱量容器時(shí)的平衡點(diǎn)剛好一致。

這種方法的優(yōu)點(diǎn)是稱量計(jì)算簡便，結(jié)果計(jì)算便利。

2．遞減稱量法這種方法稱出的樣品的質(zhì)量不要求固定的數(shù)值，只需在一定范圍內(nèi)即

可。適應(yīng)于易吸水、易氧化或易與CO2反應(yīng)的物質(zhì)。將此類物質(zhì)盛在帶蓋的稱量瓶中進(jìn)行稱量，既可以防止吸潮，又便于稱量操作。

先在稱量瓶中裝入適量的試樣(假使試樣曾經(jīng)烘干，應(yīng)放在枯燥器內(nèi)冷卻到室溫)，用清白的小紙條套在稱量瓶上，先在臺秤上粗稱其質(zhì)量，再將稱量瓶放在分析天平上確切稱出其質(zhì)量，設(shè)為m1g。將稱量瓶取出，用稱量瓶蓋輕輕敲瓶的上部，使試樣漸漸落在容器內(nèi)，然后漸漸將瓶豎起，用瓶蓋敲瓶口上部，使粘在瓶口的試樣落回瓶中，蓋好瓶蓋。再將稱量瓶放回天平盤上稱量，如此重復(fù)操作，直到傾出的試樣質(zhì)量達(dá)到要求為止。設(shè)倒出第一份試樣后稱量瓶與試樣的質(zhì)量為m2g，則第一份試樣的質(zhì)量為(m1?m2)g。同上操作，逐次稱量，即可稱出多份樣品。例如：

稱量瓶＋樣品(1)稱量瓶＋樣品(2)稱量瓶＋樣品(3)(4)稱量瓶＋樣品21.2350g0.2222g21.0128g0.2212g20.7916g20.5701g0.2215g

三、儀器、試劑及其他(一)儀器

分析天平稱量瓶小燒杯(50mL)(二)試劑

氯化鈉

四、試驗(yàn)內(nèi)容

采用遞減稱量法稱取兩份氯化鈉試樣。每份0.2~0.3g。

五、本卷須知

1．旋轉(zhuǎn)升降柄時(shí)必需緩慢，輕開輕關(guān)。取放物體、增減砝碼時(shí)，必需關(guān)閉天平，以免損

壞，瑪瑙刀口。

2．稱量時(shí)，應(yīng)關(guān)好兩個(gè)側(cè)門?；瘜W(xué)試劑和試樣不能直接放在天平盤上稱量，而應(yīng)放在清白的稱量瓶或坩鍋內(nèi)；具有腐蝕性的氣體或吸濕性物質(zhì)，必需放在稱量瓶內(nèi)或其它適當(dāng)?shù)拿荛]的容器內(nèi)稱量；稱量的物體必需與天平箱內(nèi)溫度一致，不得把熱的或冷的物體放進(jìn)天平箱內(nèi)稱量。

3．絕不能使天平載重超過最大負(fù)載。為了減小稱量誤差，在作同一試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)使用同一臺天平和配套的砝碼，并注意一致面值的兩個(gè)砝碼的區(qū)別，確定其中一個(gè)是優(yōu)先使用的。4．天平的各部件盡可能不要用手接觸，如必需接觸時(shí)(調(diào)理調(diào)平螺絲)，必需將手指擦清白，最好是帶手套或手指套。

5．稱量的數(shù)據(jù)應(yīng)及時(shí)寫在筆記本上，不得記錄在紙片上。

6．稱量完畢，取出物體，檢查天平內(nèi)外清潔，關(guān)好天平門，將指數(shù)盤撥回零位，切斷電源，最終，罩上天平罩。

六、思考題

1．為什么不允許在開啟天平的狀態(tài)下增減砝碼或取放稱量物？2．什么是天平的零點(diǎn)和停點(diǎn)？

試驗(yàn)2滴定分析器皿及其使用

一.預(yù)習(xí)。學(xué)習(xí)如何為酸式滴定管的旋塞涂抹凡士林和試漏；學(xué)習(xí)如何為堿式滴定管排氣泡和試漏。學(xué)習(xí)如何用所配的溶液潤洗滴定管和移液管，如何調(diào)零和讀數(shù)。

二．試驗(yàn)?zāi)康囊?/p>

1．滴定操作是容量分析的重要基本功之一。要求把握鄰近終點(diǎn)時(shí)，參與半滴滴定劑即可使指示劑改變顏色，到達(dá)終點(diǎn)。

2．逐個(gè)檢查學(xué)生的預(yù)習(xí)報(bào)告和遲到狀況。三．本次試驗(yàn)的內(nèi)容：

1．總結(jié)上一次試驗(yàn)的狀況（包括紀(jì)律、衛(wèi)生等）。再次強(qiáng)調(diào)天平的操作規(guī)程和操作中出現(xiàn)的問題。

2．介紹化學(xué)試劑級別和中英文縮寫名。3．提問式演示講解滴定分析操作的以下環(huán)節(jié)：（1）配制0．1mol/LNaOH和0．1mol/LHCl溶液。

告誡：永遠(yuǎn)是將相對較濃的NaOH和HCl溶液倒入水中，特別不能將水倒入酸中！NaOH和HCl溶液稀釋后一定要搖勻；試劑瓶磨口處不能沾有濃溶液！

（2）演示如何用所配的溶液倒入、潤洗滴定管和移液管的方法（不允許學(xué)生通過燒杯二次轉(zhuǎn)移倒入）；如何調(diào)零和讀數(shù)（要讀準(zhǔn)0。01ml的方法）。每次潤洗滴定管的溶液體積應(yīng)在10mL左右。

（3）滴定神態(tài)要站正。

（4）左手五個(gè)手指把握酸式滴定管、堿式滴定管的方法。（5）搖瓶操作和邊滴邊搖操作。（6）酸、堿管氣泡排除的方法。

（7）滴定速度的控制和“見滴成線〞的滴定方法。（8）半滴的控制和吹洗的方法。

（9）終點(diǎn)顏色變化的觀測，主要對甲基橙的“紅—橙—黃〞顏色要很明白的能夠區(qū)別。（10）交待用移液管移取溶液的操作，潤洗移液管的溶液，每次為3mL左右。移液管取放溶液時(shí)，注意尖部緊貼盛放溶液的器皿壁，且呈一定角度。溶液放完后，等候15秒方可取

出移液管。若用濾紙片擦去移液管外壁的溶液，則必需先擦，再調(diào)零。

（11）要求每位學(xué)生獨(dú)立完成0．1mol/LHC1溶液的配制（根據(jù)稀釋前后物質(zhì)的量相等的原則：C1V1=C2V2）；0．1mol/LNaOH溶液的配制（按公式m=CVM計(jì)算應(yīng)取的NaOH質(zhì)量）。并用酸滴堿或堿滴酸各做三份。

（12）滴定過程中，注意逐個(gè)檢查滴定操作的把握狀況，有無錯(cuò)誤操作、滴定記錄中有效數(shù)字的表達(dá)以及相對標(biāo)準(zhǔn)偏差的計(jì)算等。

（13）試驗(yàn)完成后，教師應(yīng)全面檢查試驗(yàn)室衛(wèi)生，包括窗臺、試驗(yàn)臺、清掃擦洗地面，檢查開關(guān)、水、電、門窗是否關(guān)好。分析天平應(yīng)逐臺檢查，毛刷、手套、記錄本有無丟失，應(yīng)對試驗(yàn)室安全進(jìn)行檢查。最終須經(jīng)老師允許后方能離開。

滴定操作是容量分析的重要基本功之一。要求同學(xué)們利用一切可能的機(jī)遇練習(xí)滴定操作。（14）按要求正確填寫滴定記錄表格。

試驗(yàn)3容量儀器的校準(zhǔn)

一．預(yù)習(xí)相關(guān)資料。二．試驗(yàn)?zāi)康囊?/p>

學(xué)習(xí)了解試驗(yàn)儀器校準(zhǔn)的意義、容量儀器校準(zhǔn)的方法，初步把握滴定管的校準(zhǔn)、容量瓶的校準(zhǔn)及移液管和容量瓶的相對校準(zhǔn)。

三．本次試驗(yàn)的內(nèi)容：

1．本次試驗(yàn)因時(shí)間關(guān)系，只對25mL移液管做絕對校準(zhǔn)以及25mL移液管與100m量瓶之間的相對校準(zhǔn)（不必做標(biāo)記）。

2．提醒學(xué)生首先檢查100mL容量瓶是否枯燥，否則用4－5ml乙醇潤洗后，晾干。3．稱量校準(zhǔn)時(shí)應(yīng)使用萬分之一分析天平，可連續(xù)稱量兩次25mL。注意磨口處如不慎沾水，一定要用濾紙擦干，且根據(jù)具體狀況考慮是否重新移取溶液。

問題：具塞磨口錐形瓶是否要枯燥？為什么具塞磨口錐形瓶必需蓋蓋兒，才能稱量？在移液管的校準(zhǔn)中，需要測量水溫。這一過程是在試驗(yàn)室進(jìn)行，還是在天平室進(jìn)行？

注：尋常試驗(yàn)1.2與試驗(yàn)1.3節(jié)合為一個(gè)試驗(yàn)。滴定練習(xí)的“體積比〞數(shù)據(jù)通過后，進(jìn)行玻璃儀器的校準(zhǔn)。請教師安排好時(shí)間。

提醒：此后次試驗(yàn)開始，每次試驗(yàn)終止前，將稱量瓶和100mL燒杯及表皿洗清白、晾干（稱量瓶開蓋放在培養(yǎng)皿中晾干），為下次試驗(yàn)做準(zhǔn)備。

試驗(yàn)40.1mol/L氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制與標(biāo)定

一、試驗(yàn)?zāi)康?/p>

1．學(xué)會配制標(biāo)準(zhǔn)溶液和基準(zhǔn)物質(zhì)標(biāo)定標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度的方法。

2．基本把握滴定操作和滴定終點(diǎn)的判斷。

二、試驗(yàn)原理

氫氧化鈉簡單吸收空氣中的CO2而使配得的溶液中含有少量碳酸鈉，經(jīng)過標(biāo)

定的含碳酸鹽的標(biāo)準(zhǔn)堿溶液用來測定酸含量時(shí)，若使用與標(biāo)定時(shí)一致的指示劑，則對測量結(jié)果無影響；若標(biāo)定與測定不是用一致的指示劑，則將發(fā)生一定的誤差。因此，應(yīng)配制不含碳酸鹽的標(biāo)準(zhǔn)堿溶液進(jìn)行滴定。

配制不含碳酸鈉的標(biāo)準(zhǔn)氫氧化鈉溶液的方法好多，最常見的是用氫氧化鈉飽和水溶液（120：100）配制。碳酸鈉在飽和氫氧化鈉溶液中不溶解，待碳酸鈉沉淀后，量取上層澄清液，再稀釋至所需濃度，即得到不含碳酸鈉的氫氧化鈉溶液。

飽和氫氧化鈉溶液含量約為52%（g/g），比重約為1.56。用來配制氫氧化鈉溶液的水應(yīng)加熱煮沸，放冷除取其中的CO2。

標(biāo)定堿溶液用的基準(zhǔn)物質(zhì)好多，如：草酸、苯甲酸、氨基磺酸、鄰苯二甲酸氫鉀等，目前常用的是鄰苯二甲酸氫鉀，其滴定反應(yīng)如下：

COOHCOOK+COONaNaOHCOOK+H2O

計(jì)量點(diǎn)時(shí)由于弱酸鹽的水解，溶液呈微堿性，應(yīng)用酚酞為指示劑。

三、試劑

氫氧化鈉：A.R.或C.P.；鄰苯二甲酸氫鉀：基準(zhǔn)試劑，于105～110℃枯燥至恒重；

酚酞指示劑：1%

四、試驗(yàn)內(nèi)容

(一)氫氧化鈉溶液的配制量取氫氧化鈉飽和溶液5.6ml，加新煮沸過的冷蒸餾水至1000ml，搖勻，即得0.1M氫氧化鈉溶液。

(二)0.1M氫氧化鈉溶液的標(biāo)定縝密稱取枯燥至恒重的基準(zhǔn)鄰苯二甲酸氫鉀4.5～5.0g，置小燒杯中溶解后定量轉(zhuǎn)移至250ml容量瓶，稀釋至刻度?？b密量取25ml溶液，置250ml容量瓶中，加25ml水，酚酞1滴，用0.1M氫氧化鈉溶液滴定至溶液呈淡粉紅色保持30s不褪即為終點(diǎn)。記錄所耗用的氫氧化鈉溶液的體積，作三次平行測定。

c鄰?W鄰?1000M鄰?250.0M鄰=204.2

c氫氧化鈉?c鄰?V鄰V氫氧化鈉

五、思考題

1．本試驗(yàn)中，氫氧化鈉和鄰苯二甲酸氫鉀兩種標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制方法有何不同？為什么？

2．本試驗(yàn)中哪些數(shù)據(jù)需要確切測定？各用什么儀器？

試驗(yàn)5草酸含量測定

一、試驗(yàn)?zāi)康?/p>

1．把握用中和法測定草酸含量的原理和操作。

2．把握指示劑的滴定終點(diǎn)。

二、試驗(yàn)原理

草酸是無色透明的白色粉末，由水中結(jié)晶獲得的試劑含2分子結(jié)晶水。草酸易溶于水，

在水中可解離出H，其離解常數(shù)為Ka1=5.4×10,Ka2=5.4×10,因此，可用標(biāo)準(zhǔn)堿溶液直接滴定。由于Ka1和Ka2比較接近，引而并不出現(xiàn)兩個(gè)突躍而被一次滴定。

+

－2

－5

H2C2O4+NaOHNa2C2O4+H2O

計(jì)量點(diǎn)時(shí)由于弱酸鹽的水解，溶液呈微堿性，應(yīng)用酚酞為指示劑。

三、試劑

0.1mol/LNaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液0.2%酚酞乙醇溶液四、試驗(yàn)內(nèi)容

縝密稱取草酸樣品0.15g，置于250mL錐形瓶中，加50mL水使完全溶解，加酚酞指示

液3滴，用0.1mol/L的NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至溶液呈淡粉紅色，經(jīng)振蕩不再消失即為終點(diǎn)。作三次平行測定。五、思考題

1．為什么草酸可用NaOH直接滴定？

2．操作步驟中，每份樣品中約0.15g是怎樣求得的？

試驗(yàn)6混合酸（堿）測定方法的設(shè)計(jì)

試驗(yàn)設(shè)計(jì)是一項(xiàng)帶創(chuàng)造性的工作，需以有關(guān)的基礎(chǔ)理論知識為指導(dǎo)，并再通過試驗(yàn)來

驗(yàn)證理論。試驗(yàn)方案的設(shè)計(jì)，為今后開展科學(xué)研究和從事實(shí)際工作打下良好的基礎(chǔ)。在設(shè)計(jì)試驗(yàn)時(shí)，可能會遇到大量問題，其中有些問題是可以通過查閱文獻(xiàn)資料解決的，

有些則需要在實(shí)踐中摸索。我們介紹的混合酸（堿）測定方法的設(shè)計(jì)，為學(xué)生獨(dú)立地完成混合物分析的試驗(yàn)設(shè)計(jì)提供了一些思路。

一、摘要

給出了若干種混合酸（堿）體系，讓學(xué)生選擇其中一種，進(jìn)行滴定分析。要求學(xué)生自己獨(dú)立完成從設(shè)計(jì)分析方案，到通過實(shí)際測定給出定量分析結(jié)果的全過程。

二、討論

在實(shí)際工作中，往往會遇到混合酸（堿）體系的測定問題。如何才能設(shè)計(jì)出一個(gè)既確鑿又簡便的分析方案來呢？

例如，要用滴定分析的方法，測定磷酸二氫鈉和磷酸氫二鈉混合體系中各組分的含量，涉及分析方案時(shí)要如何入手？要考慮些什么問題呢？

首先，必需判斷各組分能否用酸（或堿）標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行滴定。根據(jù)磷酸的離解平衡，查出三級離解平衡酸（或堿）常數(shù)（pKa1=2.12，pKa2=7.20，pKa3=12.36；pKb1=1.64，pKb2=6.80，pKb3=11.88）。應(yīng)用弱酸、弱堿能否被確鑿滴定的判式：cK≥10判斷。顯然，磷酸二氫鈉可用氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液直接滴定到HPO4。而HPO4繼續(xù)用氫氧化鈉滴定則不可能，但是可用鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液來直接滴定它；也可以先參與適量氯化鈣固體，定量置換出氫離子，再用氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定：

2Na2HPO4+3CaCl2===Ca3(PO4)2↓+4NaCl+2HCl

假使要采用直接滴定的方式，滴定的方法也不是唯一的。例如，可用上述方法，在同一份試液中分別用NaOH和HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行兩次滴定；也可以取兩分等量的試液，分別用NaOH和HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行滴定。

至于指示劑，一般是根據(jù)滴定反應(yīng)達(dá)計(jì)量點(diǎn)時(shí)產(chǎn)物溶液的pH值來選擇的。假使等量點(diǎn)時(shí)產(chǎn)物為HPO4，其溶液的pH=9.7，則可選用酚酞（變色范圍為pH=8.2～10.0）或百里酚酞（變色范圍為pH=9.4～10.6）為指示劑；當(dāng)產(chǎn)物為H2PO4時(shí)，其溶液的pH=4.7，則可選用甲基紅（變色范圍為pH=4.2～6.2）或溴甲酚綠（變色范圍為pH=3.8～5.4）為指示劑。

總之，設(shè)計(jì)混合酸（堿）組分的測定方法時(shí)，應(yīng)本著求實(shí)的精神，去比較、研究試驗(yàn)中的問題。例如，所選用的方法有什么優(yōu)點(diǎn)？滴定的誤差是多少？哪種指示劑較好？等等。下面給出設(shè)計(jì)時(shí)主要應(yīng)考慮的幾個(gè)問題：1）各組分能否被確鑿滴定？

2）設(shè)計(jì)方法的原理是什么？可用哪幾種方法進(jìn)行測定？3）采用什么滴定劑？如何配制和標(biāo)定？

-2－

2-2--8

4）等量點(diǎn)時(shí)產(chǎn)物是什么？這時(shí)溶液的pH值是多少？可供選擇的指示劑有哪些？哪種最

好？

5）滴定終點(diǎn)一般采用指示劑法檢測。不過在滴定較弱的酸（堿）組分時(shí)，用電位法指示滴

定終點(diǎn)則較為確鑿。理論證明，當(dāng)兩組分終點(diǎn)的?pH≤3時(shí)，用電位法指示終點(diǎn)尤為重要，例如對HAc—NaHSO4體系滴定終點(diǎn)的測定。

6）酸堿滴定中，滴定劑和被滴物質(zhì)的濃度一般設(shè)計(jì)為0.1mol/L，據(jù)此可確定各有關(guān)組分的

取用量。

7）被測組分和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)之間的計(jì)量關(guān)系如何表述？各組分含量的計(jì)算公式是什么？含量

以什么單位表示？計(jì)算用的有關(guān)常數(shù)是否齊備？

在酸堿滴定法理論課學(xué)完后，下面體系例如可讓學(xué)生選擇進(jìn)行設(shè)計(jì)，并測定各組分含量：磷酸氫二鉀--磷酸二氫鉀混合液；硫酸--磷酸混合液；鹽酸--氯化銨混合液（氯化銨可用甲醛加強(qiáng)）；氨水--氯化銨混合液；鹽酸—硼酸混合液（硼酸可用甘油或甘露醇加強(qiáng)）；氫氧化鈉--磷酸鈉混合液；醋酸--硫酸混合液；混合堿固體試樣。

本試驗(yàn)要求學(xué)生按給定的酸（堿）混合樣先自行查閱有關(guān)資料，并設(shè)計(jì)好試驗(yàn)程序，經(jīng)試驗(yàn)指導(dǎo)老師審閱后再進(jìn)行試驗(yàn)。

一、試驗(yàn)設(shè)計(jì)的主要內(nèi)容

1）試驗(yàn)原理。應(yīng)將方法、原理和有關(guān)計(jì)算公式詳細(xì)寫出。2）試驗(yàn)用品。

3）試驗(yàn)步驟。包括溶液的標(biāo)定和各組分含量測定的步驟。

4）試驗(yàn)結(jié)果。包括測得的數(shù)據(jù)及數(shù)據(jù)處理結(jié)果（分析結(jié)果和偏差）的表格。5）問題探討。包括分析誤差和總結(jié)心得體會等。

二、問題與探討

1）對于有色溶液的酸堿滴定，應(yīng)選用何種方法指示等量點(diǎn)？

2）對磷酸氫二鉀--磷酸二氫鉀混合體系，可看作是混合堿，又可看作混合酸，還可看作是

酸、堿混合物，為什么？

試驗(yàn)70.05mol/LEDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制與標(biāo)定

一、試驗(yàn)?zāi)康?/p>

1．把握EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液配制和標(biāo)定的方法；

2．了解金屬指示劑變色原理及使用本卷須知。

二、試驗(yàn)原理

EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液常用乙二酸四乙酸二鈉(EDTA－2Na·2H2O)配制。EDTA－2Na·2H2O為白

色結(jié)晶粉末，因不易制得純品，標(biāo)準(zhǔn)溶液常用間接法配制，以ZnO為基準(zhǔn)物質(zhì)標(biāo)定其濃度。滴定條件：pH＝10，以鉻黑T為指示劑，終點(diǎn)由紫紅色變?yōu)榧兯{(lán)色。滴定過程中的反應(yīng)為：滴定前：Zn終點(diǎn)時(shí)：

2++HIn2?ZnHIn2?+2?H+

2?ZnHIn+H2YZnY+HIn+H+

純藍(lán)色

三、試劑

EDTA－2Na·2H2O：A.R.

ZnO：基準(zhǔn)試劑

鉻黑T指示劑：鉻黑T0.1g與研細(xì)的NaCl10g混勻

氨－氯化銨緩沖溶液(pH＝10)：取20gNH4Cl溶于少量水中，參與100mL濃氨水，用水稀釋至1000mL。

氨試液：取濃氨水400mL，加水使成1000mL。

四、試驗(yàn)內(nèi)容

(一)0.05mol/LEDTA溶液的配制取EDTA－2Na·2H2O9.5g，加100mL蒸餾水溫?zé)崾谷?/p>

液，稀釋至500mL，搖勻，貯存于聚乙烯瓶中。

(二)0.05mol/LEDTA溶液的標(biāo)定縝密稱取已在800℃灼燒至恒重的基準(zhǔn)ZnO約0.12g，加稀HCl3mL使之溶解，加蒸餾水25mL，甲基紅指示劑的乙醇溶液溶液(0.025→100)1滴，滴加氨試液至溶液呈微黃色。再加蒸餾水25mL，氨－氯化銨緩沖溶液10mL，鉻黑T指示劑適量，用EDTA溶液滴定至溶液由紫紅色變?yōu)榧兯{(lán)色即為滴定終點(diǎn)。作三次平行測定。

五、本卷須知

1．甲基紅的乙醇溶液只需加1滴，如多加了幾滴，在滴加氨試液后溶液呈較深的黃色，

致使終點(diǎn)顏色發(fā)綠。

2．滴加氨試液至溶液呈微黃色，應(yīng)邊加邊搖，若出現(xiàn)Zn(OH)2↓。遇此狀況，可用稀HCl調(diào)回，使沉淀溶解。

3．配位反應(yīng)為分子反應(yīng)，反應(yīng)速度不如離子反應(yīng)快，近終點(diǎn)時(shí)，滴定速度不宜太快。

六、思考題

1．酸度對配位反應(yīng)有何影響？為什么要加氨－氯化銨緩沖溶液？

2．選擇金屬指示劑的原則是什么？

試驗(yàn)8水硬度的測定

一、試驗(yàn)?zāi)康?/p>

1．了解配位滴定法測定水硬度的原理和方法。

2．把握水硬度的計(jì)算。

二、試驗(yàn)原理

常水中較多的鈣鹽和鎂鹽，所以稱為硬水，其中鈣、鎂離子含量用硬度表示。水的硬度包括永久硬度和暫時(shí)硬度。在水中以碳酸氫鹽存在的鈣、鎂鹽，加熱后被分解，析出沉淀而除去。這類鹽形成的硬度成為暫時(shí)硬度。

Ca(HCO3)2加熱CaCO3+H2O+CO2

而鈣鎂的硫酸鹽或氯化物等所形成的硬度稱為永久硬度。

常水用作鍋爐用水，經(jīng)常要進(jìn)行硬度分析，測定水的總度就是測定水中鈣鎂的總量。在pH=10時(shí)，以鉻黑T為指示劑，用0.01mol/L的EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液直接滴定水中的Ca、Mg。

2+

2+

Ca滴定前

2+Mg終點(diǎn)時(shí)+HIn2+CaInMgIn2?+2?H+

MgIn+H2YMgY+HIn2?+H+

表示硬度常用兩種方法：

(1)將測得的Ca、Mg以每升溶液中含CaO的毫克數(shù)表示硬度，1mgCaO/L可寫作1ppm。(2)將測得的Ca、Mg折算為CaO的質(zhì)量。以每升水中含10mgCaO為1?(德國度)表示

2+

2+

2+

2+

硬度。

三、試劑

0.05mol/LEDTA溶液的配制：縝密移取0.05mol/LEDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液20mL，稀釋至100mL

容量瓶中，搖勻。

鉻黑T指示劑氨－氯化銨緩沖溶液

四、試驗(yàn)內(nèi)容

量取水樣100mL于錐形瓶中，加氨－氯化銨緩沖溶液5mL，鉻黑T指示劑少許(約0.1g)，

用0.01mol/LEDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至溶液由紫紅色變?yōu)榧兯{(lán)色，即為終點(diǎn)。作為三次平行測定。

五、本卷須知

滴定時(shí)，因反應(yīng)速度較慢，在接近終點(diǎn)時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)溶液漸漸參與，并充分搖動。六、思考題

1．什么叫水的硬度？硬度有哪幾種表示方法？

2．為什么測定水的硬度時(shí)，要用0.01mol/L的EDTA溶液？

試驗(yàn)9硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制與標(biāo)定、碘標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制與標(biāo)定和維生素C片的含量測定

一、試驗(yàn)?zāi)康模孩侔盐罩苯拥饬糠y定維生素C的原理和方法；②把握Na2S2O3

標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制和標(biāo)定方法；③把握I2標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制和標(biāo)定方法④熟悉淀粉指示劑的應(yīng)用和終點(diǎn)判斷。

二、內(nèi)容提要：在酸性條件下，維生素C被碘氧化。一分子的維生素C與一分

子的I2相當(dāng)，一個(gè)I2分子得到兩個(gè)電子，所以一個(gè)維生素C相當(dāng)于失去兩個(gè)電子。用基準(zhǔn)物質(zhì)重鉻酸鉀標(biāo)定硫代硫酸鈉，用標(biāo)定的硫代硫酸鈉標(biāo)定碘。以此測定維生素C的含量。

三、試驗(yàn)關(guān)鍵：①注意防止I2揮發(fā)損失和I—被空氣氧化；②控制滴定速度，

把握參與淀粉指示劑的時(shí)間。

四、思考題：

①標(biāo)定碘溶液時(shí)可以用硫代硫酸鈉，標(biāo)定硫代硫酸鈉溶液時(shí)是否可以用碘液，指示劑應(yīng)何時(shí)參與？為什么？

②測定維生素C含量時(shí)，維生素C本身就是一個(gè)酸，為什么測定時(shí)還要加酸？③配制碘液時(shí)為什么要加KI和少量的水充分?jǐn)嚢瑁?/p>

請認(rèn)真閱讀試驗(yàn)教材的預(yù)備知識、測定原理和試驗(yàn)步驟，作好預(yù)習(xí)報(bào)告。

試驗(yàn)100.02mol/LKMnO4標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制與標(biāo)定

一、試驗(yàn)?zāi)康?/p>

1．把握KMnO4標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制方法和保存方法。

2．把握用Na2C2O4標(biāo)定KMnO4標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度的方法和本卷須知。

二、試驗(yàn)原理

KMnO4是一強(qiáng)氧化劑，在酸性溶液中半電池反應(yīng)為：

MnO4?8H+?5eMn2+?4H2O

尋常滴定溶液的酸度要保持在1～2mol/L。

市售KMnO4中常含少量MnO2雜質(zhì)，在配成溶液后，有MnO2混在里面起催化劑作用，使KMnO4逐漸分解，所以必需過濾除去。配制溶液的水，也不應(yīng)含有有機(jī)還原劑。

光照促使KMnO4逐漸分解。在空氣中KMnO4簡單還原，故配好的溶液應(yīng)放在棕色玻璃瓶中，密閉保存。

Na2C2O4與KMnO4反應(yīng)方程式為：

2?+?5MnO4C2O4?16H2Mn2+?10CO2?8H2O

由于Na2C2O4與KMnO4的反應(yīng)較慢，開始滴定時(shí)參與的KMnO4不會馬上褪色，但一經(jīng)反應(yīng)生成Mn后，Mn對反應(yīng)有催化作用，反應(yīng)速度加快，在滴定時(shí)加熱溶液也可以加快反應(yīng)速度。

2＋

2＋

三、試劑

KMnO4：AR

Na2C2O4：基準(zhǔn)試劑濃硫酸

四、試驗(yàn)內(nèi)容

(一)0.02mol/LKMnO4標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制稱取KMnO41.6～1.9g，溶于500mL新煮沸并放冷的蒸餾水中，混勻，置于棕色玻璃瓶中，于暗處放置7～10天，用玻璃垂熔漏斗過濾，存于另一棕色玻璃瓶中，密塞。

(二)0.02mol/LKMnO4標(biāo)準(zhǔn)溶液的標(biāo)定縝密稱取于105℃枯燥至恒重的Na2C2O4基準(zhǔn)試劑0.18～0.2g，置于錐形瓶中，加新蒸餾水100mL、濃H2SO43～5mL，攪拌使溶解。迅速自滴定

管中參與0.02mol/LKMnO4標(biāo)準(zhǔn)溶液20mL待褪色后，加熱至65℃繼續(xù)滴定至溶液呈淡粉紅色并保持30s不褪即為滴定終點(diǎn)。平行測定三次。

五、本卷須知

1．當(dāng)?shù)味ㄍ瓿蓵r(shí)，溶液的溫度不低于55℃。

2．加熱可以使反應(yīng)速度加快，但不能加熱至沸騰，否則可能引起部分H2C2O4分解。

六、思考題

1．為什么用硫酸使溶液呈酸性？能不能用鹽酸或硝酸？

2．用KMnO4滴定時(shí)滴定速度應(yīng)如何控制？為什么？

試驗(yàn)11H2O2含量的測定

一、試驗(yàn)?zāi)康?/p>

1．把握KMnO4法測定H2O2含量的方法。

2．進(jìn)一步把握KMnO4法的操作。

二、試驗(yàn)原理

在酸性溶液中H2O2遇到氧化性更強(qiáng)的KMnO4，發(fā)生如下反應(yīng)：

2MnO4?5H2O2?6H+2＋

2Mn2+?5O2?8H2O

滴定開始時(shí)反應(yīng)較慢，一經(jīng)反應(yīng)生成Mn后，反應(yīng)速度加快。

三、試劑

3%(V/V)H2O2樣品溶液

1mol/L的H2SO4溶液

四、試驗(yàn)內(nèi)容

縝密量取3%(V/V)H2O2樣品1mL于錐形瓶中，置于貯有20mL蒸餾水的錐形瓶中，加

1mol/L的H2SO4溶液20mL，用0.02mol/LKMnO4標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至溶液呈淡粉紅色30s不褪，即為終點(diǎn)。作為三次平行測定。

五、思考題

除KMnO4法外，還有什么方法能測定H2O2含量？應(yīng)注意哪些事項(xiàng)？

試驗(yàn)12飲用水中氟含量的測定

一．試驗(yàn)?zāi)康暮鸵螅?/p>

1．把握直接電位法測定離子活度的原理與方法，學(xué)會正確使用數(shù)字式離子計(jì)。2．測定氟離子選擇電極的檢測下限和實(shí)際斜率，了解氟離子選擇電極的性能。

二．試驗(yàn)原理：

飲用水中氟含量的高低，對人體健康有一定影響，含量太低時(shí)易得齲齒病，含量高時(shí)又產(chǎn)生氟中毒現(xiàn)象，一般比較適合的含量為0.5~1mg/ml，離子選擇電極電位法測定氟含量操作簡便，干擾少，不必進(jìn)行預(yù)處理，故而已成為氟的常規(guī)分析方法。

氟離子選擇電極是一種均相晶體膜電極，當(dāng)它與甘汞參比電極組成電池：

HgHgCl2,KCl(飽和)LaF3單晶膜NaF,NaCl,AgClAg試液氟電極甘汞電極時(shí)整個(gè)電池的電動勢為：E電池=EFˉE參(1)

甘汞電極電位在測定中保持不變，氟離子選擇電極在測定中要隨氟離子活度的變化而變化，參與TISAB后：

EFˉ=φ-(2.303RT/F)㏑aFˉ（2）將（2）代入(1)，并將常數(shù)項(xiàng)合并，可得：

E電池=EFˉE參=K-(2.303RT/F)㏑aFˉ（K為常數(shù)）（3）

由（3）可見，在一定條件下，電池電動勢與試液中的氟離子活度的對數(shù)呈線性關(guān)系。氟離子選擇電極可測定溶液中1~10mol/L的F。

測定氟含量時(shí)，溫度、pH值、離子強(qiáng)度、共存離子均要影響測定的確鑿度。因此，需向標(biāo)準(zhǔn)溶液和待測試樣中參與TISAB。其中含檸檬酸/檸檬酸鈉鹽離子強(qiáng)度以緩沖pH值于6.5。檸檬酸鹽還可以消除等對F干擾。KNO3保持離子強(qiáng)度不變。本試驗(yàn)采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法。

--6

-

三，儀器與試劑：

PXJ-2離子計(jì)、氟離子選擇電極、甘汞電極、電磁攪拌器、容量瓶、移液管、吸耳球、小燒杯

氟化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液：0.1000mol/L；TISAB：即總離子強(qiáng)度調(diào)理緩沖溶液（溶解58.8g檸檬酸鈉和20.2gKNO3于少量水中，加水800mL，用HCl或NaOH調(diào)理pH值至6.5，稀釋至1L。）；自來水樣。

四、試驗(yàn)內(nèi)容與步驟：

1.氟離子選擇電極的準(zhǔn)備：氟離子選擇電極在使用前于10mol/L的NaF溶液中浸泡活化1

—2小時(shí)，用蒸餾水清洗電極（其在蒸餾水中的電位值約-300mV）。2.預(yù)熱儀器20分鐘，置離子計(jì)于mV檔，接入氟離子選擇電極與參比電極。

-3

3.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：由10mol/L標(biāo)準(zhǔn)NaF溶液配制一系列NaF標(biāo)準(zhǔn)溶液各25mL，其中各

含12.5mLTISAB溶液和10mol/L；10mol/L；10mol/L；10mol/L；10mol/L；10mol/L的F；將上述溶液分別倒入一個(gè)50mL的燒杯中，放入清白的攪拌子，插入事先擦干的電極，在離子計(jì)上按由稀到濃的順序依次測定其電位值，記錄下來讀數(shù)（每次先攪拌2分鐘，再靜置2分鐘，待讀數(shù)穩(wěn)定后記錄）。一測得的電位值為縱坐標(biāo)，以F濃度為橫坐標(biāo)作標(biāo)準(zhǔn)曲線。

4.自來水中F活度的測定：于清白的燒杯中確鑿移取12.5mL自來水樣，參與12.5mLTISAB

溶液，在離子計(jì)上測定其電位值，重復(fù)三次。

5.清洗電極：測定終止后，用蒸餾水清洗電極屢屢，收入電極盒保存。五，數(shù)據(jù)處理：

1.在標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性區(qū)間，計(jì)算其斜率k,截距b,相關(guān)系數(shù)r。2.計(jì)算自來水中F活度的平均值xmol/L，及標(biāo)準(zhǔn)偏差。

3.常可利用氟離子選擇電極測定不含F(xiàn)溶液中的La、Al的濃度，試分析其原因，并導(dǎo)出

電極對La的電位響應(yīng)公式。

試驗(yàn)

一、目的要求

1．把握分光光度計(jì)的重現(xiàn)性、波長精度檢查等性能檢驗(yàn)方法。2．熟悉分光光度計(jì)的使用方法。二、試驗(yàn)原理

1．分光光度計(jì)的性能好壞，直接影響到測定結(jié)果的確鑿性，因此新購儀器及使用一定時(shí)間后，均需進(jìn)行檢驗(yàn)調(diào)整。

2．利用鐠釹濾光片的特征吸收峰值檢驗(yàn)波長精度。

3．同種厚度的吸收池，由于材料及工藝等原因，往往造成透光率的不一致，從而影響測定結(jié)果，故在使用時(shí)需加以選擇配對。

三、儀器與試劑

1．儀器：紫外-可見分光光度計(jì)（配鐠釹濾光片）2.試劑：K2Cr2O7

3．試液：0.02mol/LK2Cr2O7溶液。四、試驗(yàn)內(nèi)容與步驟

1．吸收池的配對性同種厚度的吸收池之間，透光率誤差應(yīng)小于0.5﹪。檢查方法如

3+

-3+

3+

1

-2

-3

-4

-5

-6

-3

13分光光度計(jì)的性能檢驗(yàn)

下：將蒸餾水分別注入厚度一致的幾個(gè)吸收池中。以其中任一個(gè)吸收池的溶液做空白，在440nm波優(yōu)點(diǎn)分別測定其它各吸收池中溶液的透光率，然后選擇相差小于0.5﹪的吸收池使用。

2．重現(xiàn)性儀器在同一工作條件下，用同種溶液連續(xù)測定7次，其透光率最大讀數(shù)與最小讀數(shù)之差（極差）應(yīng)小于0.5﹪。檢查方法如下：以蒸餾水的透光率為100﹪，用同一K2Cr2O7溶液連續(xù)測定7次，求出極差，如小于0.5﹪，則符合要求。

3．波長精度的檢查為了檢查分光系統(tǒng)的質(zhì)量，可用儀器自帶的鐠釹濾光片在529nm和808nm處測定其特征吸收峰。檢查方法如下：在透光率狀態(tài)下，將鐠釹濾光片（吸收池盒中，藍(lán)色）放置在吸收池架中，移入光路，將波長調(diào)至約500nm（或780nm）處，一邊緩緩轉(zhuǎn)動波長旋鈕，一邊觀測數(shù)字顯示器，當(dāng)顯示讀數(shù)為最小值時(shí)，即為鐠釹濾光片的吸收峰，此時(shí)讀出波長值，波長值應(yīng)等于529±2nm（或808±2nm），說明該儀器符合使用要求。

五、本卷須知

1．儀器預(yù)熱時(shí)必需開啟樣品室蓋，因樣品室蓋是光閘門的開關(guān)，開啟時(shí)，光閘門處于關(guān)的位置，可避免光電倍增管照光，延長光電倍增管的使用壽命。

2．假使大幅度改變測試波長時(shí)，需要等數(shù)分鐘后，才能正常工作。（因波長大幅移動時(shí)，光能量變化急劇，光電管受光后響應(yīng)緩慢，需一移光響應(yīng)平衡時(shí)間。）

3．每臺儀器所配套的吸收池不能與其它儀器上的吸收池單個(gè)調(diào)換。

4．儀器使用完畢后，用隨機(jī)提供的塑料套罩住，在套子內(nèi)應(yīng)放數(shù)袋硅膠，以免燈室受潮。反射鏡發(fā)霉或玷污會影響儀器能量。

5．吸收池每次使用完畢后，應(yīng)馬上用蒸餾水洗凈，用吸水紙揩干，存于吸收池的盒內(nèi)。6．儀器工作一月左右或搬動后，要重新進(jìn)行波長確切性等方面的檢查，以確保儀器的使用和測定的確切。

六、數(shù)據(jù)處理

1.根據(jù)測得的透光率計(jì)算極差，判斷儀器的重現(xiàn)性是否符合要求。

2.根據(jù)測得的透光率畫出吸收曲線，找出特征吸收峰，判斷儀器是否符合使用要求。七、思考題

1．同種吸收池透光度的差異對測定有何影響？

2．檢查分光光度計(jì)的波長精度及重現(xiàn)性對測定有什么實(shí)際意義？3．使用紫外-可見分光光度計(jì)時(shí)，應(yīng)注意哪些問題？

試驗(yàn)14藥物中微量鐵的測定

一、目的要求

1.把握紫外-可見分光光度計(jì)的使用。

2．了解分光光度法測定藥物及水中鐵含量的操作方法及原理。二、基本原理

鐵是藥物和水中常見的一種雜質(zhì)，含量大時(shí)易產(chǎn)生特別氣味，因此對藥物和飲水中的鐵要進(jìn)行檢查和測定。亞鐵離子與鄰二氮菲生成穩(wěn)定的橙紅色協(xié)同物。應(yīng)用此反應(yīng)可測定鐵，當(dāng)鐵以Fe離子形式存在于溶液中時(shí)，可預(yù)先用還原劑（鹽酸羥胺或?qū)Ρ蕉拥龋⑵溥€原為Fe離子。顯色時(shí)溶液pH值應(yīng)為2～9，若酸度過高（pH＜2）顯色緩慢而色淺；若酸度過低，二價(jià)鐵離子易水解。最大吸收波長為508nm，ε＝11000。

三、儀器及試劑

1.儀器：紫外-可見分光光度計(jì)石英吸收池量瓶：50ml、100ml移液管：5ml、2ml量筒

2.試劑與試液：學(xué)生自擬四、試驗(yàn)內(nèi)容與步驟1.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備。2.水樣測定。五、本卷須知

1.吸收池應(yīng)配對校正。

2.吸收池內(nèi)外應(yīng)清潔透明，如有氣泡或顆粒，應(yīng)重新裝液。3.吸收池用畢應(yīng)充分洗凈保存，關(guān)閉儀器，檢查枯燥劑及防塵措施。六、數(shù)據(jù)處理

根據(jù)測得數(shù)據(jù)計(jì)算水中鐵含量。七、思考題

1.標(biāo)準(zhǔn)曲線和標(biāo)準(zhǔn)對照法分別適用于何種狀況？

2.顯色反應(yīng)操作中，參與的各標(biāo)準(zhǔn)溶液與樣品液的含酸量不同，對顯色反應(yīng)有無影響？

2＋

3＋

試驗(yàn)15吸收曲線的測繪及吸收系數(shù)的測定

一、目的要求

1．把握測定及繪制藥物吸收曲線的方法。2．了解吸收系數(shù)的測定。二、試驗(yàn)原理

在紫外-可見光區(qū)，物質(zhì)對光的吸收主要是分子中電子能級躍遷所致，同時(shí)伴隨著分子的轉(zhuǎn)動和振動能級的變化，因此電子吸收光譜一般比較簡單、平緩。

紫外吸收光譜能表征化合物的顯色基團(tuán)和顯色分子母核，作為化合物的定性依據(jù)，一致的化合物其紫外吸收光譜一定一致。

試驗(yàn)證明，若溶劑固定不變，化合物吸收曲線所出現(xiàn)的λ它們的數(shù)目也一定，從而為鑒別化合物提供了有力的依據(jù)。

根據(jù)藥典規(guī)定，吸收系數(shù)是指當(dāng)溶液濃度為1％，液層厚度為1cm時(shí)，指定波長的吸收度。

化合物對光的選擇吸收的波長以及相應(yīng)的吸收系數(shù)，是該化合物的物理常數(shù)，當(dāng)已知某純化合物在一定條件下的吸收系數(shù)后，即可由上式計(jì)算出該化合物的含量。

三、儀器及試劑

1．儀器：紫外-可見分光光度計(jì)量瓶：100ml，10ml吸量管：5ml，1ml

2．試劑：丹皮酚、乙醇（分析純）3．試液：95％乙醇四、試驗(yàn)內(nèi)容與步驟

取丹皮酚純品0.1g，縝密稱定至100.0ml量瓶，加95％乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻?？b密吸取5.00ml于100ml量瓶中，加95%乙醇稀釋至刻度，制成丹皮酚儲存液備用。

1．吸收曲線的繪制吸取丹皮酚儲存液1.00ml于10ml量瓶內(nèi)，加95％乙醇稀釋至刻度。將此溶液與空白溶液（95％乙醇）分別用兩個(gè)一致的吸收池盛裝后，放置在儀器的比色架上，按儀器使用方法進(jìn)行操作。從儀器波長范圍的上限（或下限）開始，每隔10nm測量一次，在吸收峰和吸收谷處，每隔1nm測量一次，每次測量均需用空白調(diào)理100％透光率，

max

、λ

min

或λ

sh

為一定值，且

然后讀取測定溶液的透光率（或吸收度），記錄不同波優(yōu)點(diǎn)的測得值。

2．吸收系數(shù)的測定利用上述溶液，在274nm波優(yōu)點(diǎn)測定其吸收度。五、本卷須知

1.嚴(yán)格按儀器的操作要求進(jìn)行。

2.每調(diào)整一次波長均需用空白重新調(diào)理100％透光率。

六、數(shù)據(jù)處理

1．以波長為橫坐標(biāo)，以吸收度為縱坐標(biāo)繪制吸收曲線。2．依照公式E1cm?七、思考題

1．單色光不純對于測得的吸收曲線有什么影響？

2．利用測定的百分吸收系數(shù)與藥典比較，探討產(chǎn)生誤差的原因？

1%A，計(jì)算百分吸收系數(shù)。C?b試驗(yàn)16標(biāo)準(zhǔn)曲線法測定蘆丁含量

一、目的要求

1．把握標(biāo)準(zhǔn)曲線制備的方法。

2．把握標(biāo)準(zhǔn)曲線法測定中藥有效成分的方法。二、試驗(yàn)原理

顯色反應(yīng)需要具備良好的重現(xiàn)性與靈敏性,因此必需控制反應(yīng)的條件,主要是溶劑種類、試劑用量、溶液酸堿度、反應(yīng)時(shí)間和顯色時(shí)間等。蘆丁為黃酮苷,能與Al生成黃色協(xié)同物,在NaNO2的堿性溶液中呈紅色,在510nm波優(yōu)點(diǎn)有最大吸收。據(jù)此顯色反應(yīng)用光度法測定蘆丁,應(yīng)注意控制反應(yīng)時(shí)間、顯色時(shí)間以及試劑用量。

3＋

OHHOOOHOgluOrha2+

OAl

O

顯色法的定量方法可采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法。三、儀器與試劑

1．儀器：紫外-可見分光光度計(jì)量瓶：100ml、50ml、10ml移液管：10ml吸量管：1ml、5ml2．試劑：

亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉、乙醇（均為分析純），蘆丁3．試液：

5%亞硝酸鈉溶液，10%硝酸鋁溶液，1mol/L氫氧化鈉溶液，30%乙醇溶液，0.1mg/ml蘆丁對照品，蘆丁樣品。

四、試驗(yàn)內(nèi)容與步驟

1．對照品溶液的制備縝密稱取在120℃減壓枯燥至恒重的蘆丁對照品100mg，置100ml量瓶中，加甲醇70ml，置水浴上微熱使溶解，放冷，加甲醇至刻度，搖勻?？b密吸取10ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，即得（每1ml中含無水蘆丁0.1mg）。

2．標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備縝密量取對照品溶液（0.1mg/ml）0.0ml、1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml，分別置于10ml量瓶中，各加30﹪乙醇使成5.0ml，各縝密參與5﹪亞硝酸鈉溶液0.3ml，充分搖勻，放置6min。各縝密參與10﹪硝酸鋁溶液0.3ml，充分搖勻，放置6min。各加1mol/L氫氧化鈉溶液4.0ml，用蒸餾水稀釋至刻度，充分搖勻，放置15min，于分光光度計(jì)上，在510nm波長下測定吸收度。以吸收度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

3．樣品測定縝密量取蘆丁樣品液（0.1mg/ml）3.0ml，置10ml量瓶中，按標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下自“各加30﹪乙醇使成5.0ml，??〞起依法操作直至測定出樣品的吸收度。

五、本卷須知

1．參與各種試劑的順序應(yīng)按操作方法進(jìn)行。

2．本顯色反應(yīng)為配位反應(yīng)，反應(yīng)速度較慢，故每參與一種試劑后應(yīng)充分振搖，以利反應(yīng)完全。

六、數(shù)據(jù)處理

1．根據(jù)測得的對照品的數(shù)據(jù)，繪制A～C標(biāo)準(zhǔn)曲線或計(jì)算回歸方程。

2．根據(jù)測得的樣品的數(shù)據(jù)，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出或由回歸方程計(jì)算出樣品溶液中蘆丁的

重量(mg)，按下式計(jì)算：

無水蘆丁（﹪）＝七、思考題

1．試述標(biāo)準(zhǔn)曲線法的優(yōu)點(diǎn)。2．影響顯色反應(yīng)有哪些因素？

標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出的濃度(mg/ml)?10ml?100%

取樣量(ml)?樣品的標(biāo)示濃度（mg/ml）試驗(yàn)17維生素B12注射液的定性鑒別、定量分析

一、目的要求

1．熟悉紫外分光光度計(jì)的操作方法

2．把握定性鑒別的方法和吸收系數(shù)法的定量方法。3．了解含量測定、標(biāo)示量的百分含量及稀釋度等計(jì)算方法。二、試驗(yàn)原理

維生素B12是一類含鈷的卟啉類化合物，具有很強(qiáng)的生理作用，可用于治療惡性貧血等疾病。維生素B12不是單一的一種化合物，共有七種。尋常所說的維生素B12是指其中的氰鈷素，為深紅色吸濕性結(jié)晶，制成注射液的標(biāo)示含量有每毫升含維生素B1250、100或500?g等規(guī)格。

維生素B12的水溶液在278±1nm、361±1nm與550±1nm三波優(yōu)點(diǎn)有最大吸收。藥典規(guī)定在361nm波優(yōu)點(diǎn)的吸收度與550nm波優(yōu)點(diǎn)的吸收度比值在3.15～3.45范圍內(nèi)為定性鑒別

1%的依據(jù)。361nm處的吸收峰干擾因素少，藥典規(guī)定以361±1nm處吸收峰的百分吸收系數(shù)E1cm值（207）為測定注射液實(shí)際含量的依據(jù)。

三、儀器與試劑

1．儀器：紫外-可見分光光度計(jì)石英吸收池吸量管：5ml量瓶：10ml

2．試劑：維生素B12注射液

3．試液：100?g/ml維生素B12注射液四、試驗(yàn)內(nèi)容與步驟

1．維生素B12注射液供試品溶液制備縝密吸取維生素B12注射液樣品（100?g/ml）3.0ml，置于10ml量瓶中，加蒸餾水至刻度，搖勻，得供試品溶液。

2．測定將樣品稀釋液裝入1cm石英吸收池中，以蒸餾水為空白，在361nm波優(yōu)點(diǎn)與550nm波優(yōu)點(diǎn)分別測定吸收度。

五、本卷須知

1.在使用紫外-可見分光光度計(jì)前，應(yīng)熟悉本儀器的結(jié)構(gòu)、功能和操作本卷須知。2.吸收池的光學(xué)面，必需清潔清白，不準(zhǔn)用手觸摸，只可用擦鏡紙擦拭。六、數(shù)據(jù)處理

1.定性鑒別根據(jù)測得的361nm波優(yōu)點(diǎn)的吸收度與550nm波優(yōu)點(diǎn)的吸收度數(shù)據(jù)，計(jì)算該兩波優(yōu)點(diǎn)的吸收度比值，并與標(biāo)準(zhǔn)值3.15～3.45相比較，進(jìn)行維生素B12的鑒別。

2．吸收系數(shù)法將361nm波優(yōu)點(diǎn)測得的吸收度A值與48.31相乘，即得樣品稀釋液中每毫升含維生素B12的μg數(shù)。

依照百分吸收系數(shù)的定義，每100ml含1g維生素B12的溶液（1﹪）在361nm處的吸收度應(yīng)為207。即：

á1cm（361nm）＝207（100ml/g﹒cm）＝207×10(ml/μg﹒cm)

－4

%C樣＝A樣/b﹒E11cm＝A樣×48.31(μg/ml)

維生素B12標(biāo)示量（％）＝七、思考題

C樣(?g/ml)?樣品稀釋倍數(shù)標(biāo)示量(100?g/ml)×100％

試比較用標(biāo)準(zhǔn)曲線法及吸收系數(shù)法定量的優(yōu)缺點(diǎn)。

試驗(yàn)18雙波長分光光度法測定安鈉咖注射液中

咖啡因的含量

一、目的要求

1．把握雙波長分光光度法測定二元混合物中待測組分含量的原理和方法。2．把握選擇測定波長（λ1）和參比波長（λ2）的方法。3．把握在單波長分光光度計(jì)上進(jìn)行雙波長法的測定。二、試驗(yàn)原理

安鈉咖注射液由無水咖啡因和苯甲酸鈉組成，其紫外吸收光譜如下：

吸收光譜說明咖啡因的吸收峰在272nm處，苯甲酸鈉的吸收峰在230nm處。若測定咖啡因，從光譜上可知干擾組分苯甲酸鈉272nm和253nm處的吸收度相等，則

咖?苯咖?苯△A＝A272?Anm253nm

咖苯咖苯＝A272nm?A272nm?A253nm?A253nm

咖咖苯苯＝A272nm?A253nm(?A272nm?A253nm)咖咖＝E272nmC咖b?E253nmC咖b

咖咖＝(E272nm?E253nm)C咖b

＝?E咖C咖b

式中：ΔA：混合物在272nm和253nm波優(yōu)點(diǎn)的吸收度之差。272nm和253nm為干擾組分苯甲酸鈉的等吸收波長。

咖咖。E272nm、E253nm為被測組分在272nm和253nm波優(yōu)點(diǎn)的吸收系數(shù)（用標(biāo)準(zhǔn)品測得）

C咖為被測組分的濃度；b為吸收池厚度。

ΔA僅與咖啡因濃度成正比,而與苯甲酸鈉濃度無關(guān)，從而測得咖啡因的濃度。三、儀器與試劑

1．儀器：紫外-可見分光光度計(jì)石英吸收池量瓶：100ml吸量管：10ml、1ml

2．試劑：咖啡因、苯甲酸鈉、安鈉咖

3．試液：安鈉咖注射液（每1ml中含無水咖啡因0.12g、苯甲酸鈉0.13g）四、試驗(yàn)內(nèi)容與步驟

1．標(biāo)準(zhǔn)貯備液的制備：縝密稱取咖啡因和苯甲酸鈉各0.1g，分別用蒸餾水溶解，定量轉(zhuǎn)移至100ml量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，即得濃度為1.0mg/ml的貯備液，置于冰箱中保存。

2．咖啡因標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備：縝密量取咖啡因貯備液1.0ml，置于100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。

3．苯甲酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備：縝密量取苯甲酸鈉貯備液1.0ml，置于100ml量瓶中，加水稀釋至刻度。

4．供試品溶液的制備：縝密量取安鈉咖注射液（濃度為每1ml中含無水咖啡因0.012g，苯甲酸鈉0.013g）1.0ml，置于100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。從中縝密量取10.0ml，置于100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。

5．咖啡因和苯甲酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液紫外吸收光譜的測定：在紫外-可見分光光度計(jì)上，分別取咖啡因和苯甲酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液于1cm石英吸收池中，以蒸餾水為空白，在200～400nm范圍內(nèi)，掃描出紫外吸收光譜。

6．干擾組分等吸收波長的選擇：從苯甲酸鈉吸收光譜圖上找出等吸收波長λ其中λ1盡量與咖啡因的最大吸收波長一致。

7．咖啡因標(biāo)準(zhǔn)溶液的△A值測定：在紫外-可見分光光度計(jì)上，取咖啡因標(biāo)準(zhǔn)溶液于1cm石英吸收池中，以蒸餾水為空白，在λ1和λ2處分別測其吸收度。

8．安鈉咖樣品液的△A值測定：在紫外-可見分光光度計(jì)上，取安鈉咖樣品液于1cm石英吸收池中，以蒸餾水為空白，在λ1和λ2處分別測其吸收度。

五、本卷須知

1.在使用紫外-可見分光光度計(jì)前，應(yīng)熟悉本儀器的結(jié)構(gòu)、功能和操作本卷須知。2.在儀器掃描過程中，不要按動任何鍵，不要任意開啟樣品室蓋子。六、數(shù)據(jù)處理

ΔA＝?ECb

1

和λ2，

?A樣?A標(biāo)??EC樣b?EC標(biāo)b?C樣C標(biāo)

咖啡因標(biāo)示量%＝

C樣?稀釋倍數(shù)標(biāo)示量?100%

咖啡因標(biāo)示量%應(yīng)在95%~105%之間。七、思考題

1．為什么雙波長分光光度法可以不經(jīng)分開直接測定二元混合物中待測組分的含量？2．選擇等吸收波長的原則是什么？怎樣從吸收光譜圖上選擇等吸收波長？

試驗(yàn)19導(dǎo)數(shù)光譜法測定安鈉咖注射液中咖啡因的含量

一、目的

1．學(xué)習(xí)導(dǎo)數(shù)吸收光譜的繪制。

2．利用導(dǎo)數(shù)光譜法直接測定二元混合物中組分的含量。

二、提要

1．一階導(dǎo)數(shù)光譜是?A????圖譜，??一般在1～4nm之間。

2．當(dāng)二元組分各自零階光譜完全重迭時(shí)，可選擇一組分的一階導(dǎo)數(shù)等于0處波長作為另一組分的測定波長，因?qū)?shù)具加和性，故在此波長下測定混合物的導(dǎo)數(shù)值?A??，即為另一組分的導(dǎo)數(shù)值。

3．導(dǎo)數(shù)值與濃度成正比

??????c?L????三、儀器與試劑

1．可見—紫外分光光度計(jì)：

2．容量瓶：100ml3個(gè)、250mL1個(gè)、50ml6個(gè)、500ml1個(gè)；3．刻度吸管；10ml3支；

4．咖啡因標(biāo)準(zhǔn)液：縝密稱取咖啡因標(biāo)準(zhǔn)品0.1g，置于100ml容量瓶中用蒸餾水稀釋至刻度，再量取此液10ml于100ml容量瓶中用水稀釋至刻度；

苯甲酸鈉標(biāo)準(zhǔn)液：縝密稱取苯甲酸鈉0.1g,置于100ml容量瓶中，用水稀釋至刻度，再縝密量取此液5mI于50ml容量瓶中，加水稀釋至刻度；

安鈉咖注射液樣品：每1ml中含無水咖啡因0.12g、苯甲酸鈉0.13g,藥典規(guī)定均應(yīng)為標(biāo)示量的93～107.0%。

四、步驟

(一)樣品液的制備縝密量取安鈉咖注射液2.5ml于250ml容量瓶中，加水稀釋至

刻度，縝密量取此液5ml于50m1容量瓶中，加水至刻度。(二)測定

1．苯甲酸鈉一階導(dǎo)數(shù)吸收光譜的繪制：取苯甲酸鈉待測液于1cm石英吸收池中，以水為空白，在250—320nm波長范圍內(nèi)，每隔2nm測定一次吸光度，以相鄰波長△A對波長平均值作圖，得一階導(dǎo)數(shù)光譜，求出?A???0對應(yīng)的波長。

2．咖啡因一階導(dǎo)數(shù)工作曲線的繪制：縝密量取待測溶液3、4、5、6、7ml分別置于50ml容量瓶中，加水稀釋至刻度，以1cm石英吸收池，用水作為空白，在苯甲酸鈉?A制?A?????0波優(yōu)點(diǎn)，分別測定各溶液的導(dǎo)數(shù)值?A?c工作曲線。

??(以??＝2nm為單位)，并繪

3．樣品安鈉咖注射液中咖啡因測定：將上述配制的安鈉咖待測液，以1cm石英吸收池用水為空白，在上述波長下測定導(dǎo)數(shù)值?A工作曲線上求出待測液中咖啡因的濃度。

??(以??＝2nm為單位)，然后從

五、思考題

應(yīng)用導(dǎo)數(shù)光譜進(jìn)行定量測定的特點(diǎn)是什么?

試驗(yàn)20銀黃口服液中黃芩苷和綠原酸的含量測定

一、目的要求

1．把握紫外-可見分光光度計(jì)的定量操作方法。

2．把握銀黃口服液中黃芩苷和綠原酸含量測定的基本原理和定量計(jì)算方法。二、試驗(yàn)原理

本品為金銀花提取物與黃芩提取物制成的口服液，規(guī)格為每支10ml。按我國藥典(2000版一部)規(guī)定，該口服液每支含金銀花提取物以綠原酸計(jì)不得少于0.108g，含黃芩提取物以黃芩苷計(jì)不得少于0.216g。

三、儀器及試劑

1．儀器：紫外-可見分光光度計(jì)量瓶：100ml移液管：2ml，1ml吸耳球

2．試劑：銀黃口服液HCl（分析純）

3．試液：0.2mol/mlHCl溶液四、試驗(yàn)內(nèi)容與步驟

縝密量取本品1ml置50ml量瓶中，加0.2mol/mlHCl溶液稀釋至刻度，搖勻。縝密量取稀釋液1ml，置于50ml量瓶中，加上述HCl溶液稀釋至刻度，用1.0cm的石英吸收池，在278±2nm與318±2nm波優(yōu)點(diǎn)分別測定吸收度。

五、本卷須知1．取樣要確鑿。

2．儀器操作時(shí)應(yīng)嚴(yán)格依照操作規(guī)程進(jìn)行。六、數(shù)據(jù)處理

根據(jù)測得的數(shù)據(jù)計(jì)算口服液中綠原酸和黃芩苷的含量

綠綠綠原酸E318＝515.2，E278＝222.7

黃黃黃芩苷E318＝369.5，E278＝631.2

按下式計(jì)算供試液中綠原酸和黃芩苷的濃度（mg/100ml）

C綠＝2.599A324－1.522A276C黃＝2.121A276－0.9169A324

七、思考題

1．銀黃口服液的質(zhì)量控制都可以采用哪些方法？各有何特點(diǎn)？2．欲將吸收系數(shù)作定量依據(jù)，需要哪些試驗(yàn)條件？

試驗(yàn)21原子吸收法測定感冒沖劑中的銅

一、

目的要求

1．學(xué)習(xí)原子吸收光譜法的基本原理。

2．了解原子吸收光譜儀的基本結(jié)構(gòu)及其使用方法。3．把握以標(biāo)準(zhǔn)曲線法測定感冒沖劑中的銅元素的方法。二、

試驗(yàn)原理

原子吸收光譜法是基于被測元素的基態(tài)原子在蒸氣狀態(tài)下對特征電磁輻射吸收進(jìn)行元素定量分析的方法。當(dāng)光源發(fā)射的某一特征波長的光穿過一定厚度的原子蒸氣時(shí)，被測元素