第三節(jié)免疫檢測(cè)技術(shù)的基本原理

現(xiàn)在是1頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)高度的靈敏性高度的特異性現(xiàn)在是2頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四免疫分析技術(shù)的應(yīng)用常用的診斷技術(shù)血凝試驗(yàn)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)?zāi)z體金免疫技術(shù)放射免疫分析技術(shù)現(xiàn)在是3頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四凝集試驗(yàn)概念：顆粒性抗原(細(xì)菌、紅細(xì)胞等)與相應(yīng)抗體結(jié)合，在一定條件下出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的凝集物，稱(chēng)為凝集反應(yīng)。1.直接凝集反應(yīng)抗原與抗體直接混合作用，出現(xiàn)凝集為陽(yáng)性結(jié)果。①玻片直接凝集法：定性試驗(yàn)②試管直接凝集法：半定量試驗(yàn)現(xiàn)在是4頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四試管法半定量試驗(yàn)+

玻片直接凝集試驗(yàn)1/21/41/81/161/321/641/1281/2561/512現(xiàn)在是5頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四2.間接凝集法先將可溶性抗原或抗體吸附在顆粒載體上(如RBC,乳膠顆粒)，再與相應(yīng)抗體或抗原反應(yīng)，出現(xiàn)凝集為陽(yáng)性結(jié)果。臨床常用的有間接血凝試驗(yàn)、乳膠凝集試驗(yàn)等。+→待檢樣品抗原吸附血球或乳膠顆粒反應(yīng)凝集物現(xiàn)在是6頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四3.間接凝集抑制試驗(yàn)先將待檢抗原與已知的抗體反應(yīng)，再加入用已知抗原吸附的載體顆粒，不出現(xiàn)凝集為陽(yáng)性結(jié)果。例：乳膠凝集抑制試驗(yàn)檢測(cè)HCG(妊娠診斷)步驟1：將已知抗體與待檢標(biāo)本混勻＋＋步驟2：加入抗原吸附的乳膠顆?；靹蚩乖饺槟z顆粒結(jié)果判斷：不凝集為陽(yáng)性結(jié)果已知抗體待檢標(biāo)本現(xiàn)在是7頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四凝集反應(yīng)現(xiàn)在是8頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四2.沉淀反應(yīng)

概念：可溶性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合后出現(xiàn)沉淀物稱(chēng)沉淀反應(yīng)。類(lèi)型：★單向免疫擴(kuò)散★免疫比濁法★雙向免疫擴(kuò)散★對(duì)流免疫電泳現(xiàn)在是9頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四

單向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)現(xiàn)在是10頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四雙向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)現(xiàn)在是11頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四

對(duì)流免疫電泳現(xiàn)在是12頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四測(cè)吸光度計(jì)算抗原或抗體的含量抗體抗原免疫復(fù)合物的濃度與透射光的衰減呈正相關(guān)免疫比濁法原理現(xiàn)在是13頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四3.中和反應(yīng)如抗“O”試驗(yàn)4.免疫標(biāo)記技術(shù)概念：用熒光素、酶、同位素等標(biāo)記抗體或抗原用以測(cè)定相應(yīng)抗原或抗體的技術(shù)稱(chēng)為免疫標(biāo)記技術(shù)。常用方法有免疫熒光技術(shù)、酶免疫技術(shù)、放射免疫檢測(cè)技術(shù)等。特點(diǎn)：敏感、特異、快速，能定性、定量、定位?，F(xiàn)在是14頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四免疫標(biāo)記技術(shù)酶免疫標(biāo)記技術(shù)熒光免疫分析技術(shù)放射免疫分析技術(shù)免疫金標(biāo)記技術(shù)現(xiàn)在是15頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)1971年瑞典學(xué)者Engvail和Perlmann,荷蘭學(xué)者VanWeerman和Schuurs分別報(bào)道將免疫技術(shù)發(fā)展為檢測(cè)體液中微量物質(zhì)的固相免疫測(cè)定方法，即酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)現(xiàn)在是16頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四酶及其底物

酶結(jié)合物是酶與抗體或抗原,半抗原在交聯(lián)劑作用下聯(lián)結(jié)的產(chǎn)物。是ELISA成敗的關(guān)鍵試劑，它不僅具有抗體抗原特異的免疫反應(yīng)，還具有酶促反應(yīng)，顯示出生物放大作用，但不同的酶選用不同的底物，將得到不同的顏色反應(yīng).現(xiàn)在是17頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四酶底物顯色反應(yīng)

測(cè)定波長(zhǎng)

辣根過(guò)氧化物酶鄰苯二胺

四甲替聯(lián)苯胺

氨基水楊酸

鄰聯(lián)苯甲胺

2,2‘-連胺基-2(3-乙基-并噻唑啉磺酸-6)銨鹽

橘紅色

黃色

棕色

蘭色

藍(lán)綠色492460449

425

642

堿性磷酸酯酶

4-硝基酚磷酸鹽(PNP)

萘酚-AS-Mx磷酸鹽+重氮鹽黃色

紅色400

500葡萄糖氧化酶

ABTS+HRP+葡萄糖

葡萄糖+甲硫酚嗪+噻唑蘭黃色

深藍(lán)色405420β-Ｄ－半乳糖苷酶

甲基傘酮基半乳糖苷(4MuG)

硝基酚半乳糖苷(ONPG)熒光

黃色

360,450

420

現(xiàn)在是18頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四2、標(biāo)記方法戊二醛交聯(lián)法過(guò)碘酸鹽氧化法現(xiàn)在是19頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四戊二醛交聯(lián)法(一步法）抗體-NH2+COH-（CH2）3-COH+NH2-酶抗體-NH2=CH-（CH2）3-CH=NH2-酶抗體-NH2=CH-（CH2）3-CH=NH2-抗體酶-NH2=CH-（CH2）3-CH=NH2-酶現(xiàn)在是20頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四戊二醛交聯(lián)法（二步法）COH-（CH2）3-COH+NH2-酶抗體-NH2+CHO-（CH2）3-CH=NH2-酶抗體-NH2=CH-（CH2）3-CH=NH2-酶現(xiàn)在是21頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四過(guò)碘酸鹽氧化法OOOOOONaIO4OOOHOOOHOH+NH2抗體OOONN抗體抗體H2ON抗體NaBH4Schiff堿酶-五炭糖環(huán)現(xiàn)在是22頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四標(biāo)記免疫物的分離與鑒定1、分離目的：去除游離酶方法：鹽析、柱層析2、鑒定抗體活性酶活性標(biāo)記物純度現(xiàn)在是23頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四ELISA的種類(lèi)和變化

（一）雙抗體夾心法（二）間接法（三）競(jìng)爭(zhēng)法（四）雙位點(diǎn)一步法（五）捕獲法測(cè)IgM抗體（六）應(yīng)用親和素和生物素的ELISA

現(xiàn)在是24頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四現(xiàn)在是25頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四（一）雙抗體夾心法此法適用于檢驗(yàn)各種蛋白質(zhì)等大分子抗原現(xiàn)在是26頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四獲得待分析物的未標(biāo)定抗體將特異性抗體與固相載體連接形成固相抗體洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)加入封閉蛋白溶液以封閉載體表面殘留的蛋白結(jié)合位點(diǎn)洗滌并除去未結(jié)合的封閉蛋白加受檢標(biāo)本（抗原）形成固相抗體－抗原復(fù)合物洗滌除去其他未結(jié)合的物質(zhì)加酶標(biāo)抗體生成抗體—待測(cè)抗原—酶標(biāo)記抗體的復(fù)合物徹底洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體加底物進(jìn)行酶催化反應(yīng)根據(jù)顏色反應(yīng)的程度進(jìn)行該抗原的定性或定量測(cè)定現(xiàn)在是27頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四

間接法是檢測(cè)抗體最常用的方法，其原理為利用酶標(biāo)記的抗抗體以檢測(cè)已與固相結(jié)合的受檢抗體，故稱(chēng)為間接法。（二）間接法現(xiàn)在是28頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA-間接法)現(xiàn)在是29頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四包被固相載體:用已知抗原包被固相載體加待檢標(biāo)本:使相應(yīng)抗體與固相抗原結(jié)合洗滌，除去無(wú)關(guān)的物質(zhì)加酶標(biāo)抗抗體:與固相載體上抗原抗體復(fù)合物結(jié)合；洗滌，除去未結(jié)合的酶標(biāo)抗抗體加底物顯色根據(jù)顏色反應(yīng)的程度進(jìn)行該抗原的定性或定量測(cè)定現(xiàn)在是30頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四（三）競(jìng)爭(zhēng)法

此法可用于抗原和半抗原的定量測(cè)定，也可用于測(cè)定抗體?，F(xiàn)在是31頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四用已知特異性抗體包被固相載體測(cè)定管加待測(cè)抗原和一定量的酶標(biāo)抗原使二者與固相抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合對(duì)照管只加一定量酶標(biāo)抗原與固相抗體直接結(jié)合分別洗滌除去未結(jié)合的成分加底物顯色分別測(cè)定兩管的吸光度值，根據(jù)對(duì)照管與測(cè)定管吸光度值之比，計(jì)算標(biāo)本中待測(cè)抗原含量現(xiàn)在是32頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四對(duì)照管由于只加酶標(biāo)抗原，與固相抗體充分結(jié)合，故分解底物顯色深；測(cè)定管的顯色程度則隨待測(cè)抗原和酶標(biāo)抗原與固相抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合的結(jié)果而異。如待測(cè)抗原量多，競(jìng)爭(zhēng)性地抑制酶標(biāo)抗原與固相抗體結(jié)合，使固相上結(jié)合的酶標(biāo)抗原量減少。因此，加入底物后顯色反應(yīng)較弱?，F(xiàn)在是33頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四飼料中鹽酸克倫特羅的測(cè)定飼料中毒素的測(cè)定（主要包括黃曲霉毒素，簡(jiǎn)曲霉毒素）飼料中有害微生物的快速篩檢（如沙門(mén)氏菌）甲胺磷殘留分析甲基對(duì)硫磷殘留分析呋喃丹殘留分析ELISA在飼料安全檢測(cè)中的應(yīng)用ELISA用于農(nóng)藥殘留的檢測(cè)現(xiàn)在是34頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四河豚毒素

植物毒素如罌粟鹼、嗎啡、藻類(lèi)毒素苯并芘

主要有除草劑與殺蟲(chóng)劑兩大類(lèi)例如殺暝松（FN）、甲氟磷酸異已酶（SOMAN）、草不綠（Alachor）、西維因（Carbaryl）、多菌靈及克菌丹（Captan）等。農(nóng)藥的檢測(cè)：現(xiàn)在是35頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四食源性病原菌檢測(cè)試劑盒大腸桿菌檢測(cè)沙門(mén)氏菌檢測(cè)單增李斯特菌金黃色葡萄球菌

現(xiàn)在是36頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四轉(zhuǎn)基因成份的檢測(cè)：如轉(zhuǎn)基因玉米中中的cry9e蛋白轉(zhuǎn)基因大豆中的CP4EPSPS蛋白質(zhì)．肉制品的摻假檢測(cè)：以辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記不同動(dòng)物肌肉和血清球蛋A抗血清檢查牛肉、馬肉、豬肉、羊肉和駝肉檢測(cè)14種畜禽熟肉制品，包括牛肉、羊肉、鹿肉和馬肉等，在摻假率為1%時(shí)即可檢出食品其他檢測(cè)：現(xiàn)在是37頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四熒光抗體技術(shù)的原理與方法

用熒光素標(biāo)記抗原或抗體，再與標(biāo)本中抗體或抗原反應(yīng)，然后在熒光顯微鏡下觀察，形成的IC可散發(fā)出熒光，對(duì)標(biāo)本中的抗原或抗體進(jìn)行測(cè)定和定位。常用的熒光素異硫氰酸熒光素(FITC)、藻紅蛋白(PE)等。常用的方法直接熒光法間接熒光法現(xiàn)在是38頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四免疫熒光技術(shù)現(xiàn)在是39頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四免疫熒光技術(shù)——直接法Ag熒光素標(biāo)記的特異性抗體組織切片現(xiàn)在是40頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四免疫熒光技術(shù)——間接法Ag熒光素標(biāo)記的抗抗體組織切片待測(cè)抗體現(xiàn)在是41頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四免疫熒光技術(shù)現(xiàn)在是42頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四熒光顯微鏡現(xiàn)在是43頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四熒光顯微鏡使用原理激發(fā)濾片（BG）吸收濾片（OG）標(biāo)本FITC吸收光峰值：490-495nmFITC發(fā)射光峰值：520-530nmBG：325-500OG：410-650現(xiàn)在是44頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四免疫金標(biāo)記技術(shù)免疫金標(biāo)記技術(shù)(Immunogoldlabellingtechique)

主要利用了金顆粒具有高電子密度的特性，在金標(biāo)蛋白結(jié)合處，在顯微鏡下可見(jiàn)黑褐色顆粒，當(dāng)這些標(biāo)記物在相應(yīng)的配體處大量聚集時(shí)，肉眼可見(jiàn)紅色或粉紅色斑點(diǎn)，因而用于定性或半定量的快速免疫檢測(cè)。這一反應(yīng)也可以通過(guò)銀顆粒的沉積被放大，稱(chēng)之為免疫金銀染色（immunogoldsilverstaining，IGSS）?，F(xiàn)在是45頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四一、膠體金制備

膠體金（colloidalgold）的制備一般采用還原法，常用的還原劑有檸檬酸鈉、鞣酸、抗壞血酸、白磷、硼氫化鈉等。向一定濃度的金溶液內(nèi)加入一定量的還原劑使金離子還原成金原子，形成金顆粒懸液，也稱(chēng)金溶膠（goldsolution）?，F(xiàn)在是46頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四

膠體金的制備及特性膠體金粒徑1%檸檬酸鈉加入量膠體金特性（nm)（ml)*呈色lmax(nm)162.00橙色51824.51.50橙紅色522411.00紅色52571.50.70紫色535*還原100ml0.01%HAuCl4所需量現(xiàn)在是47頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四膠體金（ColloidalGold）

15~60nm優(yōu)質(zhì)劣質(zhì)現(xiàn)在是48頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四膠體金結(jié)合物（Conjugate）現(xiàn)在是49頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四一、免疫滲濾測(cè)定(IFA)現(xiàn)在是50頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四

斑點(diǎn)滲漏法

其原理與層析法相類(lèi)同，中心圓點(diǎn)為一株單抗，邊上小點(diǎn)為抗鼠二抗。先將待測(cè)樣品滴在其中，若有抗原即被結(jié)合在中心圓點(diǎn)，洗去未結(jié)合抗原，再滴加金標(biāo)另一株單抗，若有抗原則形成金-Ab-Ag?薄膜的紅色斑點(diǎn)，而邊上是金-Ab-Ab2?薄膜的質(zhì)控點(diǎn)，是為金標(biāo)二步法。

現(xiàn)在是51頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四IFA——雙抗體夾心法測(cè)抗原AB現(xiàn)在是52頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四IFA——結(jié)果判斷現(xiàn)在是53頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四二、免疫層析測(cè)定（ICA）現(xiàn)在是54頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四層析法將金標(biāo)的一株單抗吸附于下端的玻璃纖維紙上，浸入尿液，此金標(biāo)單抗即被溶解，并隨尿液上行，若尿中有相應(yīng)抗原，既形成Ag-Ab-金復(fù)合物，當(dāng)上行至中段醋酸纖維薄膜，即與下端的另一株單抗結(jié)合并被固定下來(lái)，顯示陽(yáng)性結(jié)果。其上方還有一條抗鼠二抗，待紅色金標(biāo)單抗上行此處即被固定下來(lái)，作為金標(biāo)單抗質(zhì)控的提示。此種方法稱(chēng)金標(biāo)一步法?，F(xiàn)在是55頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四

兔抗鼠IgG鼠抗HCG單抗金標(biāo)鼠抗HCG單抗尿液浸濕標(biāo)志線手持端斑點(diǎn)金免疫層析試驗(yàn)（一）現(xiàn)在是56頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四斑點(diǎn)金免疫層析試驗(yàn)（二）尿樣陽(yáng)性弱陽(yáng)性陰性無(wú)效質(zhì)控線測(cè)試線現(xiàn)在是57頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四

ICA——雙抗體夾心法測(cè)抗原現(xiàn)在是58頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四ICA---競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗原免疫層析試驗(yàn)競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)小分子抗原原理圖現(xiàn)在是59頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四ICA竟?fàn)幏ńY(jié)果觀察

陰性陽(yáng)性無(wú)效現(xiàn)在是60頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四ICA——間接法測(cè)抗體現(xiàn)在是61頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四ICA結(jié)果觀察

陽(yáng)性陰性無(wú)效現(xiàn)在是62頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四IFA與ICA的比較IFAICA試劑形式滲濾裝置及附加試劑試劑條試劑保存4~8℃6個(gè)月室溫一年操作步驟3~51觀察時(shí)間3min3~20min陽(yáng)性反應(yīng)顏色濃度操作結(jié)束顏色不變顏色逐漸加深現(xiàn)在是63頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四IFA穿流（FLOWTHROUGH）ICA橫流（LATERALFLOW）現(xiàn)在是64頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四1、羅立新,繆瓏,潘力,等.快速檢測(cè)產(chǎn)單核李斯特菌免疫膠體金層析法的研究[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2006,16(2):154-156.2、賴衛(wèi)華,熊勇華,陳高明,等.應(yīng)用膠體金試紙條快速檢測(cè)赭曲霉毒素A的研究[J].食品科學(xué),2005,26(5):204-207.現(xiàn)在是65頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四3、諶志強(qiáng),段惠莉,王新為,等.大腸埃希菌O157:H7的膠體金免疫滲濾法檢測(cè)[J].中國(guó)公共衛(wèi)生,2005,21(4):705-706.4、謝昭聰,宋志強(qiáng),呂敬章,等.應(yīng)用膠體金免疫層析法檢測(cè)水產(chǎn)品中霍亂弧菌的研究[J].中國(guó)國(guó)境衛(wèi)生檢疫雜志,2005,28(3):163-165.現(xiàn)在是66頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四5、王中民,李君文,王新為,等.免疫金滲濾試驗(yàn)檢測(cè)食品中沙門(mén)氏菌的研究[J].微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展,2001,29(4):45-47.6、劉永德,汪毅,陳禹雷,免疫金探針快速檢測(cè)禽流感病毒研究[J].上海交通大學(xué)學(xué)報(bào):農(nóng)業(yè)科學(xué)版,2005,23(3):321-324.現(xiàn)在是67頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四斑點(diǎn)金免疫滲濾試驗(yàn)ADCB陰性（未懷孕）陽(yáng)性（懷孕）加尿樣除去濾器加膠體金標(biāo)記抗體加洗滌液結(jié)果判定現(xiàn)在是68頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四免疫印跡法圖解SDS裂解病毒聚丙酰胺凝膠電泳-+95684512KD電轉(zhuǎn)印至NC膜上置待測(cè)血清中，漂洗；加酶標(biāo)抗抗體，漂洗；加底物顯色1204124KD現(xiàn)在是69頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四

第四節(jié)放射性核素標(biāo)記技術(shù)一、常用標(biāo)記方法二、標(biāo)記免疫物的分離與純化現(xiàn)在是70頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四R：放射性核素示蹤高靈敏不直接探測(cè)待測(cè)物，而探測(cè)待測(cè)物上的標(biāo)記信號(hào)(標(biāo)記物的放大效應(yīng))I：免疫學(xué)反應(yīng)高特異廢除以往沿用的無(wú)機(jī)或有機(jī)試劑，代之以抗體為結(jié)合劑現(xiàn)在是71頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四常用標(biāo)記方法1、常用放射性核素2、125I的標(biāo)記方法直接法（氯胺T法）間接法（連接法）現(xiàn)在是72頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四直接法（氯胺T法）OH-NHCHONH-CH2OH-NHCHONH-CH2Na125I4。C125I氯胺T現(xiàn)在是73頁(yè)\一共有84頁(yè)\編輯于星期四間接法（連接法）CH2OHOH-C-C-O-N-C-CH2HOO=C-C-CH2CH2OHOH-C-C-O-N-C-CH2HOO=C-C-CH2+Na125I氯胺T125INSHPP現(xiàn)在是74頁(yè)\一共有84頁(yè)\