白血病淋巴瘤免疫分型

白血病淋巴瘤免疫分型1現(xiàn)在是1頁\一共有33頁\編輯于星期四2流式細胞術的基本概念流式細胞術（FlowCytometry,簡稱FCM）是一種可以快速、準確、客觀，并且同時檢測單個微粒（通常是細胞）的多項特性的技術，同時可以對特定群體加以分選研究對象為生物顆粒，如各種細胞、微生物及人工合成微球等研究的微粒特性包括多種物理及生物學特征，并加以定量現(xiàn)在是2頁\一共有33頁\編輯于星期四3散射光信號和熒光信號前向角散射光（FSC,ForwardScatter） 入射激光的前向散射光信號 細胞相對大小及其表面積側向角散射光（SSC,SideScatter） 入射激光90角的散射光信號 細胞粒度及細胞內相對復雜性熒光素與特異抗體結合，熒光抗體與細胞抗原結合越多，產生的熒光信號越強?，F(xiàn)在是3頁\一共有33頁\編輯于星期四4CD45/SS示意圖現(xiàn)在是4頁\一共有33頁\編輯于星期四5抗原分布

表面,胞漿,核內是共同檢測還是分別檢測?表面胞漿核內CD3,CD4,CD8,tetramercytokinesDNACD3,4,8,tetramer+CytokinesCD3,4,8,tetramer+DNACytokines+DNACD3,4,8,tetramer+Cytokines+DNA現(xiàn)在是5頁\一共有33頁\編輯于星期四6設門08-03307現(xiàn)在是6頁\一共有33頁\編輯于星期四7設門全部細胞門內細胞08-03307現(xiàn)在是7頁\一共有33頁\編輯于星期四8現(xiàn)在是8頁\一共有33頁\編輯于星期四9血液腫瘤分類進程現(xiàn)在是9頁\一共有33頁\編輯于星期四10白血病免疫分型的理論基礎

白血病/淋巴瘤免疫分型采用的抗原標志是表達于正常造血細胞不同分化發(fā)育階段的分化抗原。雖然是惡性腫瘤細胞，但仍能表達正常血細胞所具有的抗原，因而仍可依據其抗原的表達譜對白血病/淋巴瘤進行免疫分型。為了正確分析白血病/淋巴瘤細胞，必須對正常造血細胞分化抗原的表達模式有充分的了解。只有熟悉正常細胞的抗原表達模式，才能辨認白血病/淋巴瘤細胞的存在?，F(xiàn)在是10頁\一共有33頁\編輯于星期四11細胞類型鑒定Borowitzetal(1993)AJCP100:534-40.Steltzeretal(1993)AnnNYAcadSci667:265-280現(xiàn)在是11頁\一共有33頁\編輯于星期四12CD45/SS示意圖正常骨髓細胞血液腫瘤細胞老化粒細胞、噬酸細胞早幼—成熟粒細胞M3、CML單核細胞M4、M5LGL淋巴細胞CLL、ALL、CLD正常前體細胞M0、M1、M2、嗜堿性粒細胞M4、M5、ALL成熟紅細胞、血小板M6、M7、MM細胞碎片Pre-B-ALL

非血液來源細胞現(xiàn)在是12頁\一共有33頁\編輯于星期四13B淋巴細胞分化與抗原表達關系圖WoodandBorowitz(2006)Henry’sLaboratoryMedicine現(xiàn)在是13頁\一共有33頁\編輯于星期四14T淋巴細胞分化與抗原表達關系圖WoodandBorowitz(2006)Henry’sLaboratoryMedicine現(xiàn)在是14頁\一共有33頁\編輯于星期四15粒細胞分化與抗原表達關系圖WoodandBorowitz(2006)Henry’sLaboratoryMedicine現(xiàn)在是15頁\一共有33頁\編輯于星期四16單核細胞分化與抗原表達關系圖WoodandBorowitz(2006)Henry’sLaboratoryMedicine現(xiàn)在是16頁\一共有33頁\編輯于星期四17非腫瘤T淋巴細胞表型現(xiàn)在是17頁\一共有33頁\編輯于星期四18非腫瘤B淋巴細胞表型現(xiàn)在是18頁\一共有33頁\編輯于星期四19非腫瘤粒細胞、單核細胞表型現(xiàn)在是19頁\一共有33頁\編輯于星期四20非腫瘤粒細胞、單核細胞表型現(xiàn)在是20頁\一共有33頁\編輯于星期四21白血病免疫分型根據白血病細胞表達的系列相關抗原，確定其系列來源。如：淋系T/B、粒單系、紅系、巨核系等。根據白血病細胞表達的系列分化其相關抗原進一步分型。如：早前B，前B，普通B…現(xiàn)在是21頁\一共有33頁\編輯于星期四22初治急白分型AcuteLeukemia–BlastsPresent>20%MyeloidLineageCD13+and/orCD117+and/orCD33+CD7+and/orCD2+CD19+T-LineageB-LineageMyeloid,noorminimalmaturationCD34+/-CD117+/-HLADR+CD56+CD15-/+CD11b-,CD14-PromyeloidCD15+/-CD117+/-CD34-HLADR-CD11b-,CD14-CD14+CD4+/-HLADR+CD15+CD11b+Myelomonocytic&Monocytic紅系和巨核系的鑒定需要另外增加二線抗體。如:CD71、GPA、CD41、CD61現(xiàn)在是22頁\一共有33頁\編輯于星期四23AML-M3現(xiàn)在是23頁\一共有33頁\編輯于星期四24AML-M4現(xiàn)在是24頁\一共有33頁\編輯于星期四25AML-M4現(xiàn)在是25頁\一共有33頁\編輯于星期四26初治急淋分型AcuteLeukemia–BlastsPresent>20%CD7+and/orCD2+CD19+T-LineageB-LineageCommonThymocyteMatureThymocyteCD2+CD5+DualCD4+/CD8+sCD3-CD2+CD5+CD4+orCD8+sCD3+CD2-/+CD5-/+sCD3-CD4-CD8-TdT+CD10-clg-sig-Pre-BCD10+cig+TdT+sig-Bsig+CD10+/-clg+/-TdT-CommonTdT+CD10+clg-sig-EarlyThymocyteEarlyB-Precursor現(xiàn)在是26頁\一共有33頁\編輯于星期四27B-ALL現(xiàn)在是27頁\一共有33頁\編輯于星期四28Pre-BALL現(xiàn)在是28頁\一共有33頁\編輯于星期四29

白血病免疫分型的價值確定ALL的細胞類型（B細胞或T細胞）和ALL的分化階段。鑒定AML的特征。對形態(tài)學上未分化的急性白血病有助于鑒定細胞類型。診斷一些少見類型的白血病。如：M6、M7、M0等?，F(xiàn)在是29頁\一共有33頁\編輯于星期四30多發(fā)性骨髓瘤（MM）

多發(fā)性骨髓瘤是漿細胞異常增生性疾病。正常漿細胞為CD38+/CD45dim/-，使用CD38/CD45雙標記檢測外周血和骨髓標本，可以準確劃定漿細胞群。通常使用CD38和CD45，結合輕鏈檢查，對多發(fā)性骨髓瘤細胞進行分析。另外，正常漿細胞的表面標記為CD19+/CD56-，而多發(fā)性骨髓瘤細胞通常為CD19-/CD56+。CD138目前認為是漿細胞最特異的指標。這樣，使用流式細胞儀對外周血或骨髓標本進行多參數分析，并計算異常漿細胞含量，對于多發(fā)性骨髓瘤的診斷和治療評估具有重要意義。

現(xiàn)在是30頁\一共有33頁\編輯于星期四31MM現(xiàn)在是31頁\一共有33頁\編輯于星期四32流式免疫表型診斷血液腫瘤的劣勢1、纖維化、硬化的骨髓可能沒有足夠的細胞分析。2、細胞太多聚集或成團也可能沒有足夠的分析細胞。3、硬化的組織也很難得到足夠的分析細胞。4、組織結構關系、形態(tài)關系丟失。5、比例太低的單克隆B細胞很難檢測到?，F(xiàn)在是32頁\一共有33頁\編輯于星期四33流式免疫表型診斷血液