第一節(jié)工具酶的發(fā)現(xiàn)和基因工程的誕生

優(yōu)選第一節(jié)工具酶的發(fā)現(xiàn)和基因工程的誕生現(xiàn)在是1頁\一共有19頁\編輯于星期四第一章基因工程廣義的“遺傳工程”包括細(xì)胞水平上的遺傳操作(細(xì)胞工程)和分子水平上的遺傳操作(基因工程)。

基因工程又叫做基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)。通俗的說，就是按照人們的意愿，把一種生物的某種基因提取出來，加以修飾改造，然后放到另一種生物的細(xì)胞里，定向地改造生物的遺傳性狀?，F(xiàn)在是2頁\一共有19頁\編輯于星期四限制性核酸內(nèi)切酶DNA連接酶質(zhì)?！d體主要存在于微生物中，能識別特定的核苷酸序列，并且在特定切點(diǎn)上切割DNA?？梢园褍煞N來源的DNA（用同一種限制酶切割）的黏性末端黏合起來。把外源基因送入受體細(xì)胞的工具。第1節(jié)工具酶的發(fā)現(xiàn)和基因工程的誕生現(xiàn)在是3頁\一共有19頁\編輯于星期四

GAATTCCTTAAGGCTTAA黏性末端：被限制酶切開的DNA兩條單鏈的切口，帶有幾個伸出的核苷酸，它們之間堿基正好互補(bǔ)配對。AATTCG現(xiàn)在是4頁\一共有19頁\編輯于星期四DNA連接酶:作用：可以把兩種來源的DNA（用同一種限制

酶切割）的黏性末端黏合起來?，F(xiàn)在是5頁\一共有19頁\編輯于星期四質(zhì)粒：存在于許多細(xì)菌以及酵母菌等生物中，是細(xì)胞染色體外能自主復(fù)制的很小的環(huán)狀DNA分子。現(xiàn)在是6頁\一共有19頁\編輯于星期四限制性核酸內(nèi)切酶DNA連接酶質(zhì)?！d體基因工程操作的工具現(xiàn)在是7頁\一共有19頁\編輯于星期四現(xiàn)在是8頁\一共有19頁\編輯于星期四剪切拼接導(dǎo)入表達(dá)（一）獲得目的基因（二）形成重組DNA分子（三）將重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞（四）目的基因的檢測和表達(dá)第2節(jié)基因工程的原理和技術(shù)1、篩選含有目的基因的受體細(xì)胞2、目的基因的表達(dá)現(xiàn)在是9頁\一共有19頁\編輯于星期四步驟一獲得目的基因人工合成利用PCR技術(shù)擴(kuò)增已知序列：從基因文庫獲得未知序列：(DNAlibrary)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PolymeraseChainReaction)現(xiàn)在是10頁\一共有19頁\編輯于星期四氫鍵斷裂，形成單鏈DNA。引物與DNA模板結(jié)合，形成局部雙鏈。在酶的作用下，不斷延伸，合成雙鏈DNA。多次循環(huán)，獲得大量雙鏈DNA分子。PCR技術(shù)擴(kuò)增現(xiàn)在是11頁\一共有19頁\編輯于星期四鳥槍法：散彈射擊法供體細(xì)胞DNA限制酶許多DNA片段載入運(yùn)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞擴(kuò)增產(chǎn)生特定性狀分離目的基因從基因文庫獲得現(xiàn)在是12頁\一共有19頁\編輯于星期四目的基因的mRNA逆轉(zhuǎn)錄單鏈DNA合成雙鏈DNA（目的基因）蛋白質(zhì)氨基酸序列推測mRNA的核苷酸序列推測結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列化學(xué)合成目的基因人工合成法逆轉(zhuǎn)錄法根據(jù)已知氨基酸序列直接合成DNA現(xiàn)在是13頁\一共有19頁\編輯于星期四步驟二形成重組DNA分子現(xiàn)在是14頁\一共有19頁\編輯于星期四步驟三將重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞現(xiàn)在是15頁\一共有19頁\編輯于星期四1.基因工程中常用的受體細(xì)胞有哪些？2.導(dǎo)入過程如何？大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農(nóng)桿菌、酵母菌和動植物細(xì)胞借鑒細(xì)菌或病毒侵染細(xì)胞的途徑受體細(xì)胞：細(xì)菌CaCl2細(xì)胞壁的通透性增大重組質(zhì)粒進(jìn)入受體細(xì)胞目的基因隨受體細(xì)胞的繁殖而復(fù)制現(xiàn)在是16頁\一共有19頁\編輯于星期四步驟四目的基因的檢測和表達(dá)1、篩選含有目的基因的受體細(xì)胞2、目的基因的表達(dá)通過檢測標(biāo)記基因的有無，來判斷目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞。目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后，受體細(xì)胞必須表現(xiàn)特定的性狀。現(xiàn)在是17頁\一共有19頁\編輯于星期四練習(xí)1．質(zhì)粒是基因工程最常用的運(yùn)載體，它的主要特點(diǎn)

是：()①能自主復(fù)制②不能自主復(fù)制③結(jié)構(gòu)很小

④蛋白質(zhì)⑤環(huán)狀RNA⑥環(huán)狀DNA

⑦能“友好”地“借居”A．①③⑤⑦B．②④⑥

C．①③⑥⑦D．②③⑥⑦C2．下列不是基因載體必須具備的條件的是()A、能自我復(fù)制B、有多個限制酶切點(diǎn)

C、具有標(biāo)記基因D、它是環(huán)狀DNAD現(xiàn)在是18頁\一共有19頁\編輯于星期四練習(xí)4．有關(guān)基因工程的敘述正確的是()A.限制性內(nèi)切酶只在獲得目的基因時才用

B.重組質(zhì)粒的形成在細(xì)胞內(nèi)完成

C.質(zhì)粒都可以作為運(yùn)載體

D.蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)可為合成目的基因提供資料D3.有關(guān)基因工程的敘述中，錯誤的是（）A、DNA連接酶將黏性末端的