堿性蛋白酶(Alkalineprotease,AKP)活性測定試劑盒說明書_第1頁
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第第1頁，共3頁： 樣堿性蛋白酶（ ）活性測定試劑盒說明書微量法注意：正式測定之前選擇 個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。義：是指在堿性條件下催化蛋白質(zhì)肽鍵水解的酶類，屬于絲氨酸蛋白酶。此外，該酶還能夠水解酯鍵、酰胺鍵，具有轉(zhuǎn)酯及轉(zhuǎn)肽的功能。該酶是主要工業(yè)用酶之一，廣泛應(yīng)用于制藥、絲綢、食品、制革等行業(yè)。原理：在堿性條件下， 在 定 算 自備儀器和用品：計皿 可式、水。試劑組成和配制：試劑一：×瓶，℃保存。試劑二：粉劑×瓶，℃保存。臨用前加 水溶解。試劑三：粉劑×瓶，℃避光保存。臨用前加入 試劑一，沸水中溶解。試劑四：粉劑×瓶，℃保存。臨用前加 水溶解。試劑五：×瓶，℃保存。標(biāo)準(zhǔn)品：×支， μ 標(biāo)準(zhǔn)酪氨酸溶，℃保存。粗酶液提取：組織：按照組織質(zhì)量（）：試劑一積 為： 的比例（建議稱取約 組織，入 試劑一）冰勻漿， ，℃離心 ，取上清，即粗酶。血清或培養(yǎng)：直接測定。細菌、真菌：按照細胞數(shù)量（ 個）：試劑一積（為 ：的比例（建議入 率 聲隔間 ；然后 ，℃，離心 ，取上清置于冰上待測。操作：分光光度計酶標(biāo)儀預(yù)熱，節(jié)波長到，水零。試劑二、試劑三試劑四置于℃水保溫。對照取 加入μ 粗酶，μ試劑二，混勻后置于℃水保溫；加入μ試劑三，混勻后，℃離心；取μ上清，加入新的，再加入μ試劑四，μ試劑五，混勻后置于溫 μ于測定光吸收，記為。：取μ，μ試劑三，混勻后置于℃水保溫；加入μ 后 ，心 取 μ 的入μ 試劑四，μ 試劑五，混勻后置于℃水保溫 ，吸取 μ 于 測定取μ μ μ μ 取μ μ μ 溫μ 公式：（ ×－對照÷－×÷ －－÷（ ×－對照÷－×稀釋倍數(shù)÷× ÷ ÷ ×－對照÷－÷照液體體積升樣（ ×－－÷÷ －－生（ －－×稀釋倍數(shù)÷細胞數(shù)×÷÷ ×－對照÷－空÷細胞數(shù)量μ （÷ ；量；粗液質(zhì)該粗液能直接質(zhì)含另外；μ×；粗液總體積；反應(yīng)時間孔板（ －－×÷ －－÷（ ×－對照÷－×稀釋倍數(shù)÷× ÷ ÷ ×－對照÷－÷照液體體積升樣（ ×－－）÷÷ －－）： 每 生 為（ －－）： μ （÷ ；；：粗酶液蛋白質(zhì)濃度注意該粗酶液不能直接用于蛋白質(zhì)含量測定需要另外測定；建議稱取同樣質(zhì)量的樣加入蒸餾水勻漿提取離心后用本公司蛋

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