實(shí)驗(yàn)二酶的底物專一性

實(shí)驗(yàn)二

酶的底物專一性實(shí)驗(yàn)?zāi)康睦斫饷傅膶Ｒ恍哉莆諜z查酶專一性的原理和方法學(xué)會(huì)排除干擾因素，設(shè)計(jì)酶學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容

本實(shí)驗(yàn)以唾液淀粉酶（內(nèi)含淀粉酶及少量麥芽糖酶）、蔗糖酶對(duì)淀粉及蔗糖的催化作用，觀察淀粉酶、蔗糖酶的底物專一性。淀

粉直鏈淀粉:

由200-300個(gè)α-葡萄糖以α-1，4糖苷鍵相連成一直鏈支鏈淀粉:有α-1，4糖苷鍵和α-1，6糖苷鍵，在直鏈淀粉的基礎(chǔ)上形成分支

直鏈淀粉的相對(duì)分子質(zhì)量比支鏈淀粉小，直鏈淀粉的分子是由許多α-D-葡萄糖經(jīng)過α-1，4-苷鍵反復(fù)連接而成的線狀聚合物。直鏈淀粉

直鏈淀粉的形狀并不是伸展?fàn)顟B(tài)的直鏈，而是有規(guī)律的卷曲成螺旋狀，每一螺旋圈約有6個(gè)葡萄糖結(jié)構(gòu)單位。

直鏈淀粉遇碘液顯藍(lán)色，加熱煮沸時(shí)顏色消失，冷卻后又重新顯色。這個(gè)反應(yīng)很靈敏，常用來檢驗(yàn)淀粉或碘的存在。半縮醛羥基在右邊，即與氧環(huán)同側(cè)——α-D-葡萄糖；半縮醛羥基在左邊，即與氧環(huán)異側(cè)——β-D-葡萄糖。

由α-葡萄糖和β-果糖以α-1，2糖苷鍵相連而成的雙糖蔗

糖Benedict反應(yīng)

Benedict試劑是堿性硫酸銅溶液，具有一定的氧化能力，能與還原性糖的半縮醛羥基發(fā)生氧化還原反應(yīng)，生成氧化亞銅（Cu2O）磚紅色沉淀。淀粉和蔗糖都不能反應(yīng)，而它們的水解產(chǎn)物葡萄糖能夠發(fā)生Benedict反應(yīng)，所以，用顏色反應(yīng)來觀察淀粉酶、蔗糖酶對(duì)淀粉及蔗糖的水解作用。試

劑蔗糖酶溶液：干酵母1g置研缽中，加半勺石英沙及蒸餾水少許（約4mL），用力研磨10分鐘，轉(zhuǎn)移到50mL離心管中，另用30mL蒸餾水洗滌研缽，并將洗滌液一起轉(zhuǎn)移到離心管中，搖勻，靜置5分鐘，離心(離心前對(duì)稱放置的兩只離心管要等重配平，精確到0.01g)，小心取出上清液（含蔗糖酶）備用。

（自制）Benedict試劑

在600mL蒸餾水中溶解173g檸檬酸鈉和100g無水碳酸鈉，冷卻后稀釋到850mL。在100mL熱蒸餾水中溶解17.4g無水硫酸銅。冷卻后稀釋到150mL。把硫酸銅溶液緩緩倒入檸檬酸鈉－碳酸鈉溶液中，邊加邊攪拌，如產(chǎn)生沉淀。要過濾，班氏試劑配制后能長(zhǎng)期使用。如存放較久而產(chǎn)生沉淀時(shí)，可取上層清液使用，不必重配。試管1試管2試管30.5%淀粉溶液/mL32%蔗糖溶液/mL3蒸餾水/mL3Benedict試劑/mL222搖勻，沸水煮2分鐘觀察記錄結(jié)果原因?qū)嶒?yàn)步驟---檢查試劑實(shí)驗(yàn)步驟---蔗糖酶的專一性試管7試管8試管9蔗糖酶溶液/mL1110.5%淀粉溶液/mL32%蔗糖溶液/mL3蒸餾水/mL3搖勻，37℃保溫15分鐘Benedict試劑/mL222搖勻，沸水煮2分鐘觀察記錄結(jié)果原因思考題

觀察酶的專一性為什么要設(shè)計(jì)這