實驗室作業(yè)指導書資料

實驗室作業(yè)指導書資料第一部分水樣采集、貯存和運輸操作實施細則一．水樣的分類（一）綜合水樣把從不同采樣點同時采集的各個瞬時水樣混合起來所得到的樣品稱為“綜合水樣”。(二)瞬時水樣對于組成較穩(wěn)定的水體或水體的組成在相當長的時間和相當大的空間范圍變化不大，采瞬時樣品具有很好的代表性。(三)混合水樣是指在同一采樣點上于不同時間所采集的瞬時樣的混合樣。(四)平均污水樣對于排放污水的企業(yè)而言，生產(chǎn)的周期性影響著排污的規(guī)律性，在排放流量不穩(wěn)定的情況下，可將一個排污口不同時間的污水樣，依照流量的大小按比例混合。(五)其它水樣例如為監(jiān)測洪水期或退水期的水質(zhì)變化，調(diào)整水污案事故的影響等都須采集相應的水樣，采集這類水樣時，須根據(jù)污染物進入水系的位置和擴散方向布點并采樣，一般采集瞬時水樣。二．地表水和地下水樣的采集（一）水樣的類型（1）表層水在河流、湖泊可以直接汲水的場合，可用適當?shù)娜萜魅缢安蓸樱⒁獠荒芑烊肫∮谒嫔系奈镔|(zhì)。（2）一定深度的水在湖泊、水庫等采集一定深度的水時，可用直立式或有機玻璃采水器。（3）泉水、井水(3)對于自噴的泉水，可在涌口處直接采樣，采集不自噴的泉水時，將停滯在抽水管的水汲出，新水更替之后，再進行采樣。從井水采集水樣，必須在充分抽汲后進行，以保證水樣能代表地下水水源。（4）自來水或抽水設備中的水采集這些水樣時，應先放水數(shù)分鐘，使積留在水管中的雜質(zhì)及陳舊水排出，然后再取樣。采集水樣前，應先用水樣洗滌采樣器容器、盛樣瓶及塞子2-3次（油類除外）。（二）采樣前的準備a．確定采樣負責人主要負責制定采樣計劃并組織實施。b．制定采樣計劃采樣負責人在制定計劃前要充分了解該項監(jiān)測任務的目的和要求；應對要采樣的監(jiān)測斷面周圍情況了解清楚；并熟悉采樣方法、水樣容器的洗滌、樣品的保存技術(shù)。在有現(xiàn)場測定項目和任務時，還應了解有關(guān)現(xiàn)場測定技術(shù)。采樣計劃應包括：確定的采樣垂線和采樣點位、測定項目和數(shù)量、采樣質(zhì)量保證措施，采樣時間和路線、采樣人員和分工、采樣器材和交通工具以及需要進行的現(xiàn)場測定項目和安全保證等。c.采樣器材與現(xiàn)場測定儀器的準備采樣器材主要是采樣器和水樣容器。關(guān)于水樣保存及容器洗滌方法見表1-1。本表所列洗滌方法，系指對已用容器的一般洗滌方法。如新啟用容器，則應事先作更充分的清洗，容器應做到定點、定項。采樣器的材質(zhì)和結(jié)構(gòu)應符合《水質(zhì)采樣器技術(shù)要求》中的規(guī)定。表1-1水樣保存和容器的洗滌項目采樣容器保存劑及用量保存期采樣量/ml容器洗滌濁度*G．P．12h250I色度*G．P．12h250IpH*G．P．12h250I電導*G．P．12h250I懸浮物**G．P．14d500I堿度**G．P．12h500I酸度**G．P．30d500ICODG．加H2SO4，pH≤22d500I高錳酸鹽指數(shù)**G．2d500IDO*溶解氧瓶加入硫酸錳，堿性KI疊氮化鈉溶液，現(xiàn)場固定24h250IBOD**溶解氧瓶12h250ITOCG．加H2SO4，pH≤27d250IF-**P14d250ICl-**G．P．30d250IBr-**G．P．14h250II-G．P．NaOH，pH=1214h250ISO42-**G，P，30d250IPO43-G．P．NaOH,H2SO4調(diào)pH=7，CHCl30.5%7d250IV總磷G．P．HCl,H2SO4，pH≤224h250IV氨氮G．P．H2SO4,pH≤224h250INO2--N**G．P．24h250I項目采樣容器保存劑及用量保存期采樣量/ml容器洗滌NO3--N**G．P．24h250I總氮G．P．H2SO4,pH≤27d250I硫化物G．P．1L水樣加NaOH至pH=9，加入5%抗壞血酸5ml，飽和24h250IEDTA3ml,滴加飽和Zn（AC）2至至膠體產(chǎn)生，常溫蔽光總氮G．P．NaOH，pH≥912h250IBeG．P．HNO3，1L水樣加濃HNO310ml14d250ⅢBPHNO3，1L水樣加濃HNO310ml14d250INaPHNO3，1L水樣加濃HNO310ml14d250IIMgG.P.HNO3，1L水樣加濃HNO310ml14d250IIKP.HNO3，1L水樣加濃HNO310ml14d250IICaG．P．HNO3，1L水樣加濃HNO310ml14d250IICr(VI)G．P．NaOH，Ph≥914d250IIIMnG．P．HNO3，1L水樣加濃HNO310ml14d250IIIFeG．P．HNO3，1L水樣加濃HNO310ml14d250IIINiG．P．HNO3，1L水樣加濃HNO310ml14d250IIICuPHNO3，1L水樣加濃HNO310ml14d250IIIZnPHNO3，1L水樣加濃HNO310ml14d250IIIAsG．P．HNO3，1L水樣加濃HNO310ml，DDTC法，HCl2ml14d250ISeG．P．HCl，1L水樣加濃HCl2ml14d250IIIAgG．P．HNO3，1L水樣加濃HNO32ml14d250IIICdG．P．HNO3，1L水樣加濃HNO310ml14d250IIISbG．P．HCl，0.2％（氫化物法）14d250III項目采樣容器保存劑及用量保存期采樣量/ml容器洗滌HgG．P．HCl，1％如水養(yǎng)為中性，1L水樣中加濃HCl10ml14d250IIIPbG．P．HNO3，1％如水養(yǎng)為中性，1L水樣中加濃HCl10ml14d250III油類G．加入HCl至pH≤27d250II農(nóng)藥類**G．加入抗壞血酸0.01g~0.02g除去殘余氯24h1000I除草劑類**G．（同上）24h1000I鄰苯二甲酸脂類**G．（同上）24h1000I揮發(fā)性有機物**G．用1+10HCl調(diào)至pH=2加入0.01~0.02g抗壞血酸除去殘余氯12h1000I甲醛**G．加入0.2~0.5g/L硫代硫酸鈉除去殘余氯24h250I酚類**G．用H3PO4調(diào)至pH=2加入0.01~0.02g抗壞血酸除去殘余氯24h1000I陰離子活性劑G．P．24h250IV微生物**G．加入硫代硫酸鈉至0.2~0.5g/L除去殘余物，4℃保存12h250I生物**G．P．不能現(xiàn)場測定時用甲醛固定12h250I注：（1）*表示應盡量作現(xiàn)場測定；**低溫（0~4℃）避光保存。（2）G為硬質(zhì)玻璃瓶；P為聚乙烯瓶（桶）。（3）①為單項樣品的最少采樣量；②如用溶出伏安法測定，可改用1L水樣中加19ml濃HClO4。（4）I，II，III，IV表示表示四種洗滌方法，如下：I：洗滌劑洗一次，自來水洗三次，蒸餾水洗一次；II：洗滌劑洗一次，自來水洗二次，1+3HNO3蕩洗一次，自來水洗三次，蒸餾水洗一次；III：洗滌劑洗一次，自來水洗二次，1+3HNO3蕩洗一次，自來水洗三次，去離子水一次；IV：鉻酸洗液洗一次，自來水洗三次，蒸餾水洗一次。如果采集污水樣品可省去用蒸餾水、去離子水清洗的步驟。（5）經(jīng)160℃干熱滅菌2h的微生物、生物采集容器，必須在兩周內(nèi)使用，否則應重新滅菌；經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌15min的采樣容器，如不立即使用，應于60℃將瓶內(nèi)冷凝水烘干，兩周內(nèi)使用。細菌監(jiān)測項目采樣時不能用水樣沖洗采樣容器，不能采混合水樣，應單獨采樣后2h內(nèi)送實驗室分析。（三）采樣方法a、采樣器（1）聚乙烯塑料桶（2）單層采水瓶（3）直立式采水器（4）自動采樣器b、采樣數(shù)量在地表水質(zhì)監(jiān)測中通常采集瞬時水樣，所需水樣量見1-1。此采樣量已考慮重復分析和質(zhì)量控制的需要，并留有余地。c、在水樣采入或裝入容器后，應立即按1-1的要求加入保存劑。d、油類采樣：采樣前先破壞可能存在的油膜，用直立式采水器把玻璃材質(zhì)容器安裝在采水器的支架中，將其放到300mm深度，邊采水邊向上提升，在到達水面時剩余適當空間。e、注意事項(1）采樣時不可攪動水底的沉積物。（2）采樣時應保證采樣點的位置正確，必須使用定位儀（GPS）定位。（3）認真填寫“水質(zhì)采樣記錄表”，用簽字筆或硬質(zhì)鉛筆在現(xiàn)場記錄，字跡應端正、清晰，項目完整。（4）保證采樣按時、準確、安全。（5）采樣結(jié)束前，應核對采樣計劃、記錄與水樣，如有錯誤或遺漏，應立即補采或重采。（6）如采樣現(xiàn)場水體很不均勻，無法采到有代表性的樣品，則應詳細記錄不均勻的情況和實際采樣情況，供使用該數(shù)據(jù)者參考。（7）測定油類的水樣，應在水面至300mm采集柱狀水樣，并單獨采樣，全部用于測定，并且采樣瓶（容器）不能用采集的水樣沖洗。（8）測溶解氧、生化需氧量和有機污染物等項目時，水樣必須注滿容器，上部不留空間，并有水封口。（9）如果水樣中含沉降性固體（如泥沙等），則應分離除去。分離方法為：將所采水樣搖勻后倒入筒形玻璃容器（如1－2升量筒），靜置30min，將不含沉降性固體但含懸浮性固體的水樣移入盛樣容器中并加入保存劑。測定水溫、pH、DO、電導率、總懸浮物和油類的水樣除外。（10）測定湖庫水的COD、高錳酸鹽指數(shù)、葉綠素a、總氮、總磷時，水樣靜置30min后，用吸管一次或幾次移取水樣，吸管進水尖嘴應插至水樣表層50mm以下位置，再加保存劑保存。（11）測定油類、BOD、DO、硫化物、余氧、糞大腸菌群、懸浮物、放射性等項目要單獨采樣。（四）水質(zhì)采樣記錄表在“水質(zhì)采樣記錄表”中，包括現(xiàn)場描述與現(xiàn)場測定項目兩部分內(nèi)容，均應認真填寫。三、污水采樣（一）條件頻次①監(jiān)督性監(jiān)測：地方環(huán)境監(jiān)測站對污染源的監(jiān)督性監(jiān)測每年不少于1次。如被國家或地方環(huán)境保護行政主管部門列為年度監(jiān)測的重點排污單位，應增加到每年2—4次。②企業(yè)自控監(jiān)測、工業(yè)污水按生產(chǎn)周期和生產(chǎn)特點確定監(jiān)測頻次，一般每個生產(chǎn)周期不得少于3次。③對于污染治理、環(huán)境科研、污染源調(diào)查和評價等工作中的污水監(jiān)測，其采樣頻次可以根據(jù)工作方案的要求另行確定。④根據(jù)管理需要進行調(diào)查性檢測，監(jiān)測站事先應對污染源單位正常生產(chǎn)條件下的一個生產(chǎn)周期進行加密監(jiān)測。⑤排污單位如有污水處理設施并能正常運行，使污水能穩(wěn)定排放，則污染物排放曲線比較平穩(wěn)，監(jiān)督監(jiān)測可以采瞬時樣，對于排放曲線有明顯變化的不穩(wěn)定排放污水，要根據(jù)曲線情況分時間單元采樣，再組成混合樣品。(二)污水采樣方法(1)污水的監(jiān)測項目按照行業(yè)類型有不同要求。在分時間單元采集樣品時，測定pH、COD、BOD5、DO、硫化物、油類、有機物、余氯、糞大腸菌群、懸浮物、放射性等項目的樣品，不能混合，只能單獨采樣。（2）不同監(jiān)測項目要求對不同的監(jiān)測項目應選用的容器材質(zhì)、加入的保存劑及其用量與保存期、應采集的水樣體積和容器及其洗滌方法等見表1-1。（3）實際采樣位置的設置實際的采樣位置應在采樣斷面的中心。當水深大于1m時，應在表層下1/4深度處采樣；水深小于或等于1m時，在水深的1/2處采樣。（三）注意事項①用樣品容器直接采樣時，必須用水樣沖洗三次后再行采樣。但當水面有浮油時，采油的容器不能沖洗。②采樣時應注意除去水面的雜物、垃圾等漂浮物。③用于測定懸浮物、BOD5、硫化物、油類、余氯的水樣，必須單獨定容采樣，全部用于測定。④在選用特殊的專用采樣器（如油類采樣器）時，應按照該采樣器的使用方法采樣。⑥凡需現(xiàn)場監(jiān)測的項目，應進行現(xiàn)場監(jiān)測。（四）污水采樣時的流量測量流量測量方法(1)污水流量計法：污水流量計的性能指標必須符合污水流量計技術(shù)要求。(2)容積法：將污水納入已知容量的容器中，測定其充滿容器所需要的時間，從而計算污水量的方法。(3)流速儀法：通過測量排污渠道的過水截面積，以流速儀測量污水流速計算污水量，(4)量水槽法：在明渠或涵管內(nèi)安裝量水槽，測量其上游水位可以計量污水量。常用的有巴氏槽。(5)溢流堰法：是在固定形狀的渠道上安裝特定形狀的開口堰板，過堰水頭與流量有固定關(guān)系，據(jù)此測量污水流量。根據(jù)污水量大小可選擇三角堰、矩形堰、梯形堰等。四、水樣的保存與運輸（一）水樣的保存（1）導致水質(zhì)變化的因素水樣采集后，應盡快送到實驗室分析。樣品久放，受下列因素影響，某些組分的濃度可能會發(fā)生變化。①生物因素：微生物的代謝活動，如細菌、藻類和其它生物的作用可改變許多被測物的化學形態(tài)，它們可影響許多測定指標的濃度，主要反映在pH、溶解氧、生化需氧量、二氧化碳、堿度、硬度、磷酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽和某些有機化合物的濃度變化上。②化學因素：測定組分可能被氧化或還原，如六價鉻在酸性條件下易被還原為三價鉻，低價鐵可氧化成高價鐵。③物理因素：測定組分被吸附在容器壁上或懸浮顆粒物的表面上，如溶解的金屬或膠狀的金屬，某些有機化合物以及某些易揮發(fā)組分的揮發(fā)損失。（2）水樣保存方法1）冷藏或冷凍：樣品在4℃冷藏或?qū)⑺畼友杆倮鋬觯A存于暗處，可以抑制生物活動，減緩物理揮發(fā)作用和化學反應速度。2）加入化學保存劑：①控制溶液pH值：測定金屬離子的水樣常用硝酸酸化至pH1～2,既可以防止重金屬的水解沉淀，又可以防止金屬在器壁表面上的吸附，同時在pH1～2的酸性介質(zhì)中還能抑制生物的活動。用此法保存，大多數(shù)金屬可穩(wěn)定數(shù)周或數(shù)月。測定氰化物的水樣需加氫氧化鈉調(diào)至pH1～2。測定六價鉻的水樣應加氫氧化鈉調(diào)至pH8，因在酸性介質(zhì)中，六價鉻的氧化電位高，易被還原。保存總鉻的水樣，則應加硝酸或硫酸至pH1～2。②加入抑制劑：為了抑制生物作用，可在樣品中加入抑制劑。在測酚水樣中用磷酸調(diào)溶液的pH值，加入硫酸銅以控制苯酚分解菌的活動。③加入氧化劑：水樣中痕量汞易被還原，引起汞的揮發(fā)性損失，加入硝酸—重鉻酸鉀溶液可使汞維持在高氧化態(tài)，汞的穩(wěn)定性大為改善。④加入還原劑：測定硫化物的水樣，加入抗壞血酸對保存有利。含余氯水樣，能氧化氰離子，可使酚類、烴類、苯系物氯化生成相應的衍生物，為此在采樣時加入適量的硫代硫酸鈉予以還原，除去余氯干擾。樣品保存劑如酸、堿或其它試劑在采樣前應進行空白試驗，其純度和等級必須達到分析的要求。（3）水樣的保存條件不同監(jiān)測項目樣品的保存條件見表1—1?？勺鳛樗h(huán)境監(jiān)測保存樣品的一般條件。此外，由于地表水、廢水（或污水）樣品的成分不同，同樣保存條件很難保證對不同類型樣品中待測物都是可行的。因此，在采樣前應根據(jù)樣品的性質(zhì)、組成和環(huán)境條件，要檢測保存方法或選用的保存劑的可靠性。經(jīng)研究表明，污水或受納污水的地表在測定重金屬Pb、Cd、Cu、Zn等時，往往需加入酸達到1%，才能保證重金屬不沉淀或不被容器壁吸附。（2）水樣的運輸和交接水樣采集后必須立即送回實驗室，根據(jù)采樣點地理位置和每個項目分析前最長可保存的時間選用適當?shù)倪\輸方式，在現(xiàn)場工作開始之前，就要安排好水樣的運輸工作，以防延誤。凡能做現(xiàn)場測定的項目，均應在現(xiàn)場測定。水樣運輸前應將容器的外（內(nèi)）蓋蓋緊。裝箱時應用泡沫塑料等分隔，以防破損。箱子上應有“切勿倒置”等標志。同一采樣點的樣品瓶應盡量裝在同一個箱子中；如分裝在幾個箱子內(nèi)，則各箱內(nèi)均應有同樣的采樣記錄表。運輸前應檢查所采水樣是否已全部裝箱。運輸時應有專門押運人員。水樣交化驗室時，應有交接手續(xù)。第二部分室內(nèi)分析管理制度1)實驗室應制定儀器的使用管理制度、安全操作制度、化學制劑的使用管理制度、樣品管理制度等，實驗人員應嚴格掌握，認真執(zhí)行。3)實驗室內(nèi)不準會客、吸煙、用餐，不準喧嘩、打鬧等與實驗無關(guān)的活動；實驗室內(nèi)不準存放個人物品及與實驗無關(guān)的物品，嚴禁帶小孩進入實驗室和工作間；未經(jīng)許可不準拉線，釘釘子，張掛圖表或移動固定設備。4)實驗人員熟練地掌握本崗位的監(jiān)測分析制度，對承擔的監(jiān)測項目做到理解原理，操作正確，嚴守規(guī)程，準確無誤。接受新項目前，應在試測工作中完成規(guī)定的各種質(zhì)量控制實驗，達到要求才能進行新項目的監(jiān)測。5)認真做好分析測試前的各項技術(shù)準備工作，實驗用水、試劑、標準溶液、器皿、儀器等均應符合要求，方能進行分析測試，樣品在標準方法或技術(shù)規(guī)范規(guī)定的保存期內(nèi)完成分析測試，若有意外損壞、丟失或失效現(xiàn)象及時報告，必要時須重新采樣，樣品測試完畢后所剩余樣品，按規(guī)范要求，保存期較長的樣品，在測定結(jié)果報出，質(zhì)控數(shù)據(jù)經(jīng)審核合格后，方可將樣品倒掉，按要求保存和處置，防止造成環(huán)境污染。6)對于實驗過程中出現(xiàn)的樣品損壞事故，設備損壞事故，停電、停水中斷監(jiān)測事故，被盜事故及影響實驗質(zhì)量的其他事故，要保護現(xiàn)場及時報告領導。7)實驗室環(huán)境條件保證滿足標準的要求，對各種設施定期檢查，發(fā)現(xiàn)問題及時維護和修理，保證分析工作處于最佳狀態(tài)，負責地填報監(jiān)測分析結(jié)果，做到數(shù)據(jù)清晰，記錄完整，校對嚴格，實事求是。8)及時地完成分析測試后的實驗室清理工作，做到現(xiàn)場環(huán)境清潔，工作交接清楚，做好安全檢查。第三部分糞大腸菌群分析檢測實施細則糞大腸菌群是總大腸菌群中的一部分，主要來自糞便，在44.5℃溫度下生長并發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的大腸菌群稱為糞大腸菌群。用提高培養(yǎng)溫度的方法，造成不利于來自自然環(huán)境的大腸菌群生長的條件，使培養(yǎng)出來的菌主要為來自糞便中的大腸菌群，從而更準確地反映出水質(zhì)受糞便污染的情況。糞大腸菌群的測定可用多管發(fā)酵法。多管發(fā)酵法：1、培養(yǎng)基（1）單倍和三倍乳糖蛋白胨培養(yǎng)液乳糖蛋白胨培養(yǎng)液蛋白胨10克牛肉浸膏3克乳糖5克氯化鈉5克1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1mL蒸餾水1000mL將蛋白胨、牛肉浸膏、氯化鈉、乳糖加熱溶解于1000mL蒸餾水中，調(diào)節(jié)PH為7.2~7.4，再加入1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1mL，充分混勻，分裝于含有倒置的小玻璃管的試管中，置于高壓蒸汽滅菌器中，在115℃滅菌20min，貯存于暗處備用。根據(jù)需要，按上述配方的比例（除蒸餾水外）配成三倍濃縮的乳糖蛋白胨培養(yǎng)液，制法同上。（2）EC培養(yǎng)液：胰胨20克乳糖5克膽鹽三號1.5克磷酸氫二鉀（K2HPO4）4克磷酸二氫鉀（KH2PO4）1.5克氯化鈉5克蒸餾水1000mL將上述成分加熱溶解，然后分裝于含有玻璃倒管的試管中，置高壓蒸汽滅菌器中，在115℃滅菌20min，滅菌后PH應為6.9。2、步驟（1）水樣接種量將水樣充分混勻后，根據(jù)水樣污染的程度確定水樣接種量。每個樣品至少用三個不同的水樣量接種。同一接種水樣量要有五管。相對未受污染的水樣接種量為10ml、1ml、0.1ml。受污染水樣接種量根據(jù)污染程度接種1ml、0.1ml、0.01ml或0.1ml、0.01ml、0.001ml等（見下表）。水樣種類檢測方法接種量（ml）100501010.10.010.0010.00010.00001較清潔的湖濾膜法×××井水多管發(fā)酵法×××一般的江水濾膜法×××河水、塘水多管發(fā)酵法×××城市內(nèi)的河水濾膜法×××湖水、塘水多管發(fā)酵法×××城市原污水濾膜法×××多管發(fā)酵法×××如接種體積為10ml，則試管內(nèi)應裝有三倍濃度乳糖蛋白胨培養(yǎng)液5ml；如接種1ml或少于1ml，則可接種于普通濃度的乳糖蛋白胨培養(yǎng)液10ml中。（2）初發(fā)酵試驗將水樣分別接種到盛有乳糖蛋白胨培養(yǎng)液的發(fā)酵管中。在37℃±0.5℃下培養(yǎng)24h±2h。產(chǎn)酸和產(chǎn)氣的發(fā)酵管表明試驗陽性。如在倒管內(nèi)產(chǎn)氣不明顯，可輕拍試管，有小氣泡升起的為陽性。（3）復發(fā)酵試驗輕微振蕩初發(fā)酵試驗陽性結(jié)果的發(fā)酵管，用3mm接種環(huán)或滅菌棒將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)接到EC培養(yǎng)液中。在44.5℃±0.5℃溫度下培養(yǎng)24h±2h，培養(yǎng)后立即觀察，發(fā)酵管產(chǎn)氣則證實為糞大腸菌群陽性。3.計算和報告結(jié)果根據(jù)不同接種量的發(fā)酵管所出現(xiàn)陽性結(jié)果的數(shù)目，從MPN表（見下表）中查得相應的MPN指數(shù)，按總大腸菌群的計算方法計算每升水中糞大腸菌群細菌的MPN值。最可能數(shù)（MPN）表（接種5份10ml水樣、5份1ml水樣、5份0.1ml水樣時，不同陽性及陰性情況下100ml水樣中細菌數(shù)的最可能數(shù)和95％可信限值）出現(xiàn)陽性份數(shù)每100ml水樣中細菌數(shù)的最可能數(shù)95％置信限值出現(xiàn)陽性份數(shù)每100ml水樣中細菌數(shù)的最可能數(shù)95％置信限值10ml管1ml管0.1ml管下限上限10ml管1ml管0.1ml管下限上限000<2421369780012<0.57430279800102<0.574313311930204<0.5114403412931002<0.57500237701014<0.5115013411891104<0.51150243151101116<0.5155103311931206<0.51551146161202222<0.5135126321150202211752049171302107117521702317021192215229428220220922153079251902301232853111031250300811953214037310301112255331804450031011225540130353003111443454117043190320224345422205770032117546543280908503301754654435012022004001333155024068750401175465513501202200410175465525401801400411217635539203003200412269785541600640580042022767555≥2400如果接種的水樣量不是10mL、1mL和0.1mL，而是較低的或較高的三個濃度的水樣量，也可以查表求得MPN指數(shù)，再經(jīng)下面的公式換算成每100mL的MPN值。MPN值=MPN指數(shù)×10（mL）/接種量最大的一管（mL）我國目前以1L為報告單位，MPN值再乘10，即為1L水樣中的糞大腸菌群數(shù)。第四部分細菌總數(shù)分析檢測實施細則細菌總數(shù)測定是測定水中需氧菌、兼性厭氧菌和異養(yǎng)菌密度的方法。因為細菌能以單獨個體、成雙成對、鏈狀、成簇等形式存在，而且沒有任何單獨一種培養(yǎng)基能滿足一個水樣中所有細菌的生理要求。所以，由此法所得的菌落可能要低于真正存在的或細菌的總數(shù)。實際上是指1mL水樣在一個營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中，于37℃培養(yǎng)24h后，所生長細菌菌落的總數(shù)。此法主要作為判定飲用水、水源水、地表水等污染程度的標志。（一）培養(yǎng)基營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（1）營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基為減少配置中的誤差，盡量選用市售已配好的綜合培養(yǎng)基（二）水樣的稀釋1、選擇稀釋度稀釋度要選擇適宜，以期在平皿上的菌落總數(shù)介于30~300之間。例如，如果認為直接水樣的標準平皿計數(shù)可高達3000，就應該將水樣稀釋到1：100后，在進行平皿計數(shù)。大多數(shù)飲用水水樣，未經(jīng)稀釋直接接種1ml，所得的菌落總數(shù)可適于計數(shù)。（三）水樣的稀釋方法1)將水樣用力振搖20~25次，使可能存在的細菌凝團成分散狀。2)以無菌操作方法吸取10ml充分混勻的水樣，注入盛有90ml滅菌水的三角燒瓶中（可放有適量的玻璃珠）混勻成1：10稀釋液。（五）計算和報告計數(shù)結(jié)果細菌總數(shù)是以每個平皿菌落的總數(shù)或平均數(shù)（例如同一個稀釋度兩個重復平皿的平均數(shù)）乘以稀釋倍數(shù)而得來的。各種不同情況的計算方法如下：1、選擇平均菌落在30—300之間，則只有一個稀釋度的平均菌落數(shù)符合此范圍時，即以該平均菌落數(shù)乘其稀釋倍數(shù)報告（見下表例1）。若有兩個稀釋度，其平均菌落數(shù)約在30—300之間，則應按二者之比值來決定。若其比值小于2應報告兩者的平均數(shù)，若大于2則報告其中較小的數(shù)值（見表例2）第五部分顯微鏡室管理制度（1）防潮顯微鏡放置位置應離墻、離地