微生物學第三章消毒與滅菌演示文稿

微生物學第三章消毒與滅菌演示文稿當前1頁，總共59頁。微生物有比其他生物更大的表面積，極高的代謝率，驚人的繁殖速度和明顯的適應能力。用控制微生物的生長的方法來減少它們對營養(yǎng)資源的破壞。如食物的腐爛、人與動物的疾病等。物理化學生物當前2頁，總共59頁。概念滅菌（Sterilization）：殺死物體上所有微生物的方法，包括殺滅所有細菌芽孢、霉菌孢子在內(nèi)的全部病原微生物和非病原微生物。消毒（Disinfection）：殺滅物體上的病原微生物的方法，叫消毒。消毒只要求達到消滅傳染性的目的，而對非病原微生物及其芽孢、孢子并不嚴格要求全部殺死。防腐(Antisepsis)或抑菌：指阻止或抑制物品上微生物生長繁殖的方法，微生物不一定死亡。無菌（asepsis）：指沒有活的微生物的狀態(tài)。無菌操作：是指防止或杜絕任何微生物進入動物機體或其他物體的方法。當前3頁，總共59頁。方法當前4頁，總共59頁。第一節(jié)

物理消毒滅菌法當前5頁，總共59頁。控制溫度（高溫、低溫）干燥滲透壓輔射微波聲波濾過當前6頁，總共59頁。溫度是微生物生長繁殖的重要因素。最適溫度：微生物繁殖最快、最盛，并能將它的生活機能充分地表現(xiàn)出來的溫度。最高溫度：能夠生長的最高溫度。最低溫度：能夠生長的最低溫度。一、溫度與熱力滅菌法最適溫度最低溫度最高溫度細菌生長繁殖細菌死亡細菌休眠當前7頁，總共59頁。根據(jù)微生物對溫度的適應性可分為：嗜冷菌嗜溫菌嗜熱菌當前8頁，總共59頁。生長溫度范圍當前9頁，總共59頁。1、熱力滅菌法

高溫殺菌原理：高溫可引起菌體蛋白質(zhì)、核酸酶系統(tǒng)破壞蛋白質(zhì)受熱變性→氫鍵破壞→失去生物活性當前10頁，總共59頁。熱力滅菌法干熱滅菌法濕熱滅菌法火焰滅菌法熱空氣滅菌法煮沸滅菌流通蒸氣滅菌法巴氏消毒法高壓蒸氣滅菌法當前11頁，總共59頁。干熱滅菌法火焰滅菌法酒精燈以火焰直接灼燒殺死物體中的全部微生物的方法。灼燒焚燒當前12頁，總共59頁。熱空氣滅菌法干烤箱適用于高溫下不損壞、不變質(zhì)的物品，需在160℃維持1－2小時，才能達到殺死所有微生物及其芽孢、孢子的目的。當前13頁，總共59頁。濕熱滅菌法煮沸滅菌100℃，煮沸10～20分鐘，可殺死所有細菌繁殖體，芽孢常需煮沸1－2h才能殺死。水中加入2%碳酸鈉或2～5%石炭酸增強滅菌效果）當前14頁，總共59頁。流通蒸氣滅菌利用蒸汽在蒸籠或流通蒸汽滅菌器內(nèi)殺死細菌的方法。100℃-30分鐘，殺死細菌繁殖體。間歇滅菌法：（含糖培養(yǎng)基；血清培養(yǎng)基）第一天：100℃-30分鐘，殺死細菌繁殖體，37℃過夜培養(yǎng)，芽孢發(fā)芽為繁殖體；第二天：100℃-30分鐘，殺死細菌繁殖體，37℃過夜培養(yǎng)，殘余的芽孢發(fā)芽為繁殖體；第三天：100℃-30分鐘，殺死所有微生物。當前15頁，總共59頁。巴氏消毒法

最大限度地消滅病原體，盡可能少地損害食品的營養(yǎng)物質(zhì)常用于牛乳及一些飲料低溫維持巴氏消毒法（LTH)：63～65℃-30分鐘；高溫短時間巴氏消毒法(HTST):71～72℃-15秒，超高溫巴氏消毒法(UHT):132℃-1～2秒當前16頁，總共59頁。高壓蒸氣滅菌法121.3℃(15磅壓力/英寸2)20-30分115℃(10磅壓力/英寸2)20-30分（含葡萄糖培養(yǎng)基）當前17頁，總共59頁。影響高溫殺菌作用的因素微生物的類型菌齡及發(fā)育時溫度加熱的溫度和時間細菌的濃度介質(zhì)的性質(zhì)當前18頁，總共59頁。幾種細菌的致死溫度及時間當前19頁，總共59頁。幾種細菌芽胞的致死溫度及時間當前20頁，總共59頁。菌齡及發(fā)育時溫度

對數(shù)生長期比老齡菌抵抗力低，芽胞最適形成比最高時抵抗力大。當前21頁，總共59頁。加熱的溫度和時間60℃30分；

70℃10~15分；

80~100℃→立即、幾分鐘熱斃點：是指一定時間內(nèi)殺死某菌所需的溫度。熱斃時：是指一定溫度下殺死某菌所需的時間。當前22頁，總共59頁。溫度對一種嗜中溫菌存活力的影響當前23頁，總共59頁。細菌的濃度濃度越大，殺死最后一個細菌所需時間愈長。當前24頁，總共59頁。介質(zhì)的性質(zhì)

細菌在非水介質(zhì)中，比水作介質(zhì)時對熱的抵抗力大水分、2~4℃石炭酸、油類、干焦空氣當前25頁，總共59頁。不同介質(zhì)對微生物抗熱力的影響當前26頁，總共59頁。2、低溫抑菌法低溫可降低微生物代謝的速度。大多數(shù)微生物對低溫有很強的抵抗力一般的：4-10℃淋球菌、腦膜炎球菌、流行感冒桿菌敏感，傷寒桿菌、白喉桿菌耐低溫冷凍干燥：采用迅速冷凍和抽真空除水。當前27頁，總共59頁。為什么低溫保存微生物時必須迅速冷凍，原因是：（1）冰結(jié)晶擾亂胞漿膠體狀態(tài)；（2）刺傷菌體胞膜、胞壁；（3）迅速冰凍，水分形成均勻的玻璃樣狀態(tài)；當前28頁，總共59頁。二、輔射滅菌法可見光線的影響日光的影響紫外線的影響電離輻射的影響放射性同位素對微生物的影響紅外線微波當前29頁，總共59頁?？梢姽饩€的影響長時間暴露于光線中，其代謝與繁殖均可受影響而遞增。光感作用（photosensitization）:某些染料能增強可見光的殺菌作用。一般在有氧條件下才出現(xiàn)光感作用；G+菌比G-菌對光感作用敏感；伊紅、美蘭和汞溴紅只作用于G+菌，沙黃只作用于G-菌.當前30頁，總共59頁。日光的影響直射陽光有強烈的殺菌作用，是天然的殺菌因素。細菌：0.5-幾個小時炭疽桿菌芽胞：20小時當前31頁，總共59頁。紫外線的影響紫外線波長：13.6-400nm；殺菌波長：200-300nm；265-266nm殺菌力最強；紫外線殺菌燈253.7nm；紫外線穿透力較弱，只適用于空氣及表面殺菌表面、G—

菌（敏感）、葡萄球菌和鏈球菌（抵抗力大，5~10倍）、芽胞（病毒抵抗力大）當前32頁，總共59頁。紫外線對微生物的作用機理：DNA分子吸收260nm左右的紫外光，同一股DNA鏈上相鄰的胸腺嘧啶通過共價鏈結(jié)合形成胸腺嘧啶二聚體，影響DNA復制與轉(zhuǎn)錄時的正常堿基配對，引起致死性突變而死亡。當前33頁，總共59頁。光復活作用：細菌受致死量的紫外線照射后，3h以內(nèi)若再以可見光照射，則部分細菌又恢復活力，這種現(xiàn)象稱為光復活作用(photoreactivatio)。原理：細菌所具有的光裂解酶和經(jīng)紫外線照射過的DNA在黑暗中結(jié)合，在可見光作用下，酶與DNA又復解離，使形成胸腺嘧啶二聚體的DNA分子又恢復為正常的分子結(jié)構(gòu)。光復活作用：最有效波長510nm。當前34頁，總共59頁。電離輻射放射性同位素的射線（α、β、γ射線）、X射線、高能質(zhì)子、中子在足夠劑量時，對各種細菌均有致死作用。常用X射線、β射線、γ射線主要用于塑料制品、食品、飼料等的消毒。當前35頁，總共59頁。放射性同位素對微生物的影響放射性同位素在微生物學中的應用微生物的誘變當前36頁，總共59頁。紅外線滅菌利用紅外線烤箱滅菌，主要利用紅外線的加熱效應，效果與干熱滅菌類似，主要用于醫(yī)療器械的滅菌。當前37頁，總共59頁。微波微波（microwave）是一種波長為1mm至1m的超高頻電磁波，微波滅菌主要利用微波的加熱作用滅菌。主要用于食品、維生素、中藥丸劑的滅菌。常用微波頻率為915-2450MHz。當前38頁，總共59頁。三、超聲波殺菌法20000－200000Hz的聲波稱為超聲波。對大多數(shù)微生物有殺傷作用；實驗室常用超聲波進行菌體裂解試驗。當前39頁，總共59頁。四、濾過除菌濾過除菌是通過機械、物理阻留作用將液體或空氣中的細菌等微生物除去的方法。特殊培養(yǎng)基、血清、毒素、抗毒素、抗生素、維生素、氨基酸、糖培養(yǎng)液等常用濾過除菌。濾膜孔徑常用的有兩種：0.45μm，0.20μm。當前40頁，總共59頁。空氣潔凈度等級潔凈度級別塵粒最大允許數(shù)/m3（靜態(tài)）微生物最大允許數(shù)（靜態(tài)）≥0.5μm塵粒數(shù)≥5μm塵粒數(shù)浮游菌/m3沉降菌/90mm皿,0.5h100級3,50005110,000級350，0002，000503100，000級350000020，00015010300，000級10，500，00060，00020015當前41頁，總共59頁。五、干燥抑菌法水分—媒質(zhì)，微生物新陳代謝過程中不可缺少的成分。代謝障礙、菌體蛋白變性或鹽類濃度增高而逐漸導致死亡。淋球菌、鼻疽桿菌：幾天，不耐干燥結(jié)核桿菌：90天芽胞、孢子：數(shù)年至數(shù)十年當前42頁，總共59頁。六、高滲抑菌滅菌法質(zhì)壁分離：菌體置于高滲溶液中菌體內(nèi)的水分向外滲出，胞漿因高度脫水而濃縮，并與細胞壁脫離。胞漿壓出：菌體置于低滲溶液中，菌體吸收水分，最終菌體膨大甚至破裂。高鹽高糖抑菌當前43頁，總共59頁。第二節(jié)

化學消毒滅菌法用于體外殺滅病原微生物的化學藥物稱為消毒劑（disinfectant）；用于抑制微生物生長繁殖的化學藥品稱為防腐劑（antispetic)或抑菌劑(bacteriostat)。消毒劑在低濃度時只能抑菌，而防腐劑在高濃度時也能殺菌，二者之間無明顯界限，統(tǒng)稱為防腐消毒劑。消毒劑只能體外使用。當前44頁，總共59頁。消毒劑分類（一）酸類：氫離子（二）堿類：OH—（三）重金屬（四）氧化劑（五）鹵素（六）酚類（七）醇類（八）醛類（九）染料（十）表面活性劑（十一）膽汁和膽酸鹽當前45頁，總共59頁。選擇消毒劑應考慮的因素：應具有強大的殺菌力易溶水，使用方便，價格低性質(zhì)穩(wěn)定，便于貯存，安全對動物體應毒性小，無殘留殺菌力不受有機物影響當前46頁，總共59頁。影響消毒劑作用的因素藥物性質(zhì)：一般認為化學消毒劑的作用是沒有選擇性藥物濃度：一般濃度愈大，對微生物毒害作用愈強，但酒精有一定限度（70－75％）。作用時間微生物的種類及其數(shù)量溫度pH有機物的存在藥物的相互拮抗當前47頁，總共59頁?；瘜W治療劑對微生物的作用用于消除宿主體內(nèi)病原微生物和其他寄生物的化學藥品稱為化學治療劑（chemotherapeuticagent）。當前48頁，總共59頁。第三節(jié)

生物因素對微生物的影響一、抗菌素對微生物的影響二．細菌素對微生物的作用三．噬菌體對微生物的作用當前49頁，總共59頁。一、抗菌素對微生物的影響抗菌素：是由某些微生物（真菌、放線菌或細菌）產(chǎn)生的一類能抑制或殺死另一些微生物的物質(zhì)。抗生素的抗菌作用主要是干擾細菌的代謝過程：干擾細菌細胞壁的合成損傷細胞膜而影響其通透性影響菌體蛋白的合成影響細菌核酸的合成當前50頁，總共59頁。細菌抗生素作用機制當前51頁，總共59頁。二、細菌素對微生物的作用細菌素是由某種細菌產(chǎn)生的一種具有殺菌作用的蛋白質(zhì)，它主要作用于與它同種的其他菌株的細菌以及與它親緣關(guān)系相近的細菌。如大腸菌素。植物殺菌素：某些植物中存在的殺菌物質(zhì)。當前52頁，總共59頁。三、噬菌體對微生物的作用噬菌體（phage）：是指寄生于微生物（細菌、霉形體、螺旋體、放線菌以及藍細菌等）中的病毒。當前53頁，總共59頁。烈性噬菌體（virulentphage）：凡能使大量敏感細菌迅速裂解引起溶菌反應的噬菌體。溫和噬菌體（temperatephage）：有些噬菌體侵入菌體后，將其基因整合于細菌的基因組中，與細菌DNA一起復制，并隨細菌的分裂而傳給后代，因此，這種溫和噬菌體的侵入并不引起宿主細胞裂解，這種現(xiàn)象稱為溶原性或溶原現(xiàn)象。當前54頁，總共59頁。引起溶原性的噬菌體也稱為溶原性噬菌體（lysogenicphage）

。前噬菌體

（prophage）：整合到細菌DNA上的噬菌體基因稱為前噬菌體。溶原性細菌（lysogenicbacterium）：帶有前噬菌體的細菌稱為溶原性細菌。當前55頁，總共59頁。噬菌體的應用細菌的鑒定與分型檢測未知細菌作為分子生物學研究的工具當前56頁，總共59頁。第四節(jié)獸醫(yī)微生物實驗室

的生物安全當前57頁