普通微生物學(xué)實驗之三微生物形態(tài)

一、目的要求1、細(xì)菌斜面培養(yǎng)的菌落特征及平板培養(yǎng)時的生長特征2、觀察并掌握根霉、曲霉和青霉的具體形態(tài)3、學(xué)會制備霉菌標(biāo)本片的方法4、放線菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察5、酵母菌的培養(yǎng)特征及形態(tài)觀察當(dāng)前1頁，總共24頁。二、實驗原理1、培養(yǎng)特征：是指微生物在培養(yǎng)基上所表現(xiàn)的群體形態(tài)和生長情況。培養(yǎng)特征包括菌落特征、斜面培養(yǎng)的菌落特征及液體培養(yǎng)時的生長特征,是認(rèn)識微生物和微生物分類的重要依據(jù)2、菌落：是指個體微生物在固體培養(yǎng)基上繁殖成的肉眼可見的群體。3、霉菌:霉菌是由交織在一起的菌絲體構(gòu)成。菌絲呈管狀,有的有橫隔將菌絲分割為多細(xì)胞（如青霉、曲霉）,有的菌絲沒有橫隔（如毛霉、根霉）。菌絲直徑比一般細(xì)菌和放線菌菌絲大幾倍到幾十倍。菌落形態(tài)較大,質(zhì)地疏松,顏色各異,有絲狀、絨毛狀或蜘蛛網(wǎng)狀的菌絲體。將菌絲體放在水中易變形,將其置于乳酸石炭酸溶液中,可保持菌絲體原形。當(dāng)前2頁，總共24頁。二、實驗原理4、放線菌觀察放線菌菌落表面形狀、大小、顏色、邊緣以及有無色素分泌；注意在培養(yǎng)基上的著生的緊密情況。區(qū)別基內(nèi)菌絲、氣生菌絲及孢子絲的著生部位。5、酵母菌有些酵母菌進(jìn)行一連串的出芽繁殖后，子細(xì)胞與母細(xì)胞并不立即分離，其間僅以極狹小的面積相連，形成似藕節(jié)狀排列的細(xì)胞串，且有分枝，這種細(xì)胞串就稱為假菌絲。是否能生成假菌絲，是酵母菌屬或種的特征，同時也與培養(yǎng)基的種類；培養(yǎng)條件等因素有關(guān)。一般于缺氧條件下在玉米粉瓊脂或馬鈴薯浸汁瓊脂培養(yǎng)基上較容易形成。當(dāng)前3頁，總共24頁。三、實驗材科及儀器(一)菌種黑根霉、黑曲霉、青霉、細(xì)菌、酵母菌和放線菌(二)染液乳酸石炭酸棉藍(lán)染色液。(三)其它顯微鏡、蓋玻片、載玻片、接種針、濾紙、涂布棒、鑷子等。當(dāng)前4頁，總共24頁。四、方法與步驟1、每組一套常見的幾種細(xì)菌的培養(yǎng)皿。2、觀察幾種放線菌的斜面培養(yǎng)特征及標(biāo)本片。3、觀察酵母菌平板培養(yǎng)特征及標(biāo)本片。4、霉菌的觀察直接取片觀察法(1)取潔凈的載玻片，于中央滴一滴乳酸石炭酸棉藍(lán)染液。(2)用鑷子從培養(yǎng)皿中輕輕取一帶菌蓋玻片，從一側(cè)蓋在載玻片上的乳酸石炭酸棉藍(lán)染液上，不要產(chǎn)生氣泡。(3)將制好的載片標(biāo)本置于低倍鏡下觀察，必要時換用高倍鏡。當(dāng)前5頁，總共24頁。五、觀察與作業(yè)1、觀察幾種細(xì)菌菌落的形態(tài)、大小、顏色、邊緣、光澤、隆起等特征并記錄比較。

李斯特菌培養(yǎng)特征枯草芽孢菌菌落特征金葡菌溶血大腸在EMB當(dāng)前6頁，總共24頁。有莢膜的細(xì)菌菌落較大并且表面光滑，而沒有莢膜的則表面較粗糙；具有芽孢的細(xì)菌菌落表面常有褶皺并且不透明。沒有鞭毛不運動的細(xì)菌，特別是球菌，常形成較小、較厚、邊緣較整齊的菌落；有鞭毛的細(xì)菌則較大而扁平，邊緣波狀、鋸齒狀等；當(dāng)前7頁，總共24頁。細(xì)菌在平板上的菌落特征大腸在（VRBA）上副溶血型弧菌在TCBS上大腸在麥康凱上蠟樣芽孢桿菌在葡萄糖瓊脂上鼠傷寒沙門在SS上沙門在（DHL）上當(dāng)前8頁，總共24頁。大腸桿菌圖片電鏡鞭毛大腸電鏡當(dāng)前9頁，總共24頁。當(dāng)前10頁，總共24頁。蠟樣芽孢桿菌菌落枯草芽孢桿菌菌落當(dāng)前11頁，總共24頁。光滑型菌落粗糙型菌落粘液型菌落當(dāng)前12頁，總共24頁。斜面培養(yǎng)物的觀察

絲狀樹狀念珠狀擴展?fàn)罴俑鶢畲堂珷町?dāng)前13頁，總共24頁。霉菌形態(tài)觀察2、幾種霉菌的觀察觀察根霉和毛霉時，應(yīng)注意觀察：(1)有無假根，及假根的形狀、發(fā)達(dá)程度；(2)孢囊梗的形狀、大小、顏色、排列、著生位置和分枝情況；(3)孢子囊的形狀、大小、囊軸、囊托及孢囊孢子的性狀、大小、顏色；菌絲有無橫隔等。觀察青霉時，應(yīng)注意觀察：(1)分生孢子梗的來源、分枝情況、直徑等；(2)帚狀枝的輪數(shù)及對稱性；(3)分生孢子的形成方式。觀察曲霉時應(yīng)注意觀察：(1)菌絲的寬度、色澤、有無足細(xì)胞；(2)分生孢子梗的寬度、顏色和表面特征；(3)分生孢子頭和頂囊的形狀、大小和可育面積；(4)小梗的形狀、層數(shù)及在頂囊上的著生情況；(5)孢子鏈的排列情況。當(dāng)前14頁，總共24頁。根霉和曲霉根霉曲霉假根匍匐絲孢囊梗孢子囊孢子囊軸足細(xì)胞頂囊小梗分生孢子孢子梗當(dāng)前15頁，總共24頁。霉菌觀察黑曲霉電鏡青霉電鏡當(dāng)前16頁，總共24頁。霉菌觀察當(dāng)前17頁，總共24頁。霉菌菌落特征當(dāng)前18頁，總共24頁。酵母菌培養(yǎng)特征觀察酵母菌電鏡片當(dāng)前19頁，總共24頁。酵母菌培養(yǎng)特征觀察當(dāng)前20頁，總共24頁。放線菌觀察當(dāng)前21頁，總共24頁。六、思考題1、培養(yǎng)特征的重要意義何在？2、細(xì)菌菌落有那些重要的特征3、繪圖說明你所觀察到的各種霉菌的形態(tài)特征。

當(dāng)前22頁，總共24頁。七、接種1、每四人一組，接種葡萄糖蛋白胨水培