抗原抗體反應(yīng)的類型之凝集反應(yīng)（免疫學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)課件）

間接凝集反應(yīng)免疫學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)教學(xué)培訓(xùn)課件—*—間接凝集反應(yīng)Ag顆粒性Ab+Ag-Ab（凝集）電解質(zhì)？電解質(zhì)電解質(zhì)—*—間接凝集反應(yīng)直接間接（1）改造（2）反應(yīng)反應(yīng)—*—間接凝集反應(yīng)凝集反應(yīng)直接凝集反應(yīng)間接凝集反應(yīng)正向間接凝集試驗(yàn)反向間接凝集試驗(yàn)<不改造><改造><改造Ag><改造Ab>載體類型紅細(xì)胞聚苯乙烯膠乳顆粒炭粒金黃色葡萄球菌（含A蛋白）—*—間接凝集反應(yīng)（1）改造Ag（試劑）（2）反應(yīng)已知抗原載體抗原致敏載體抗原致敏載體待測(cè)抗體抗原抗體復(fù)合物（凝集）正向間接凝集試驗(yàn)（改抗原→測(cè)抗體）可溶性抗原（Ag）致敏載體，檢測(cè)標(biāo)本中未知抗體（Ab）凝集→待測(cè)抗體陽(yáng)性；無(wú)凝集→待測(cè)抗體陰性—*—間接凝集反應(yīng)反向間接凝集試驗(yàn)（改抗體→測(cè)抗原）抗體（Ab）致敏載體，檢測(cè)標(biāo)本中未知可溶性抗原（Ag）（1）改造Ab（試劑）（2）反應(yīng)已知抗體載體抗體致敏載體抗體致敏載體待測(cè)抗原抗原抗體復(fù)合物（凝集）凝集→待測(cè)抗原陽(yáng)性；無(wú)凝集→待測(cè)抗原陰性—*—類風(fēng)濕因子（RF）是抗自身變性IgG的自身抗體。應(yīng)用舉例測(cè)定血清中類風(fēng)濕因子（RF）是陰性還是陽(yáng)性？待測(cè)血清思路分析R間接凝集反應(yīng)目標(biāo)：RF是抗體（未知）變性IgG載體顆粒性抗原（已知試劑）顆粒性抗原（已知試劑）待測(cè)血清凝集現(xiàn)象？膠乳顆粒結(jié)果：凝集→陽(yáng)性；無(wú)凝集→陰性正向間接凝集試驗(yàn)微視頻：類風(fēng)濕因子（RF）檢測(cè)（膠乳凝集法）—*—間接凝集反應(yīng)間接凝集抑制試驗(yàn)用抗原致敏載體和相應(yīng)的抗體作為診斷試劑，檢測(cè)標(biāo)本中是否存在與致敏抗原相同的抗原的方法凝集→待測(cè)抗原陰性；無(wú)凝集→待測(cè)抗原陽(yáng)性—*—間接凝集反應(yīng)試劑已知抗體抗原致敏載體標(biāo)本待測(cè)抗原（1）已知抗體與待測(cè)抗原反應(yīng)（2）反應(yīng)液中加入抗原致敏載體待測(cè)抗原已知抗體抗原抗體復(fù)合物無(wú)凝集抗原致敏載體抗原抗體復(fù)合物—*—提問(wèn)下列方法中，哪兩種是測(cè)抗原的？?jī)煞N測(cè)抗原的方法中，哪一種靈敏度高？待測(cè)抗原選項(xiàng)RF間接凝集反應(yīng)A：正向間接凝集試驗(yàn)B：反向間接凝集試驗(yàn)C：間接凝集抑制試驗(yàn)—*—間接凝集反應(yīng)反向間接凝集試驗(yàn)（測(cè)抗原）抗體致敏載體待測(cè)抗原抗原抗體復(fù)合物（凝集）—*—間接凝集反應(yīng)反向間接凝集試驗(yàn)抗體致敏載體待測(cè)抗原無(wú)凝集待測(cè)抗原間接凝集抑制試驗(yàn)待測(cè)抗原已知抗體抗原抗體復(fù)合物無(wú)凝集抗原致敏載體陽(yáng)性陰性—*—間接凝集反應(yīng)協(xié)同凝集試驗(yàn)（測(cè)抗原）IgG類抗體與葡萄球菌A蛋白結(jié)合，形成抗體致敏載體顆粒，檢測(cè)標(biāo)本中的待測(cè)抗原凝集→待測(cè)抗原陽(yáng)性；無(wú)凝集→待測(cè)抗原陰性已知抗體凝集抗體致敏載體金葡（含A蛋白）待測(cè)抗原抗球蛋白試驗(yàn)免疫學(xué)檢驗(yàn)教學(xué)培訓(xùn)課件—*—案例不完全抗體leRF抗球蛋白試驗(yàn)一名Rh（D）-孕婦今做了第一胎流產(chǎn)手術(shù)，胎兒為Rh（D）+，胎兒含D抗原的紅細(xì)胞進(jìn)入母體內(nèi)，刺激母體產(chǎn)生抗DIgG類不完全抗體。機(jī)體在某些抗原刺激下產(chǎn)生的大小為7S的IgG類抗體，此抗體能與相應(yīng)抗原牢固結(jié)合，但在一般條件下不出現(xiàn)凝集現(xiàn)象?！?—抗球蛋白試驗(yàn)（Coombs試驗(yàn)）Coombs利用抗球蛋白抗體作為第二抗體，連接結(jié)合在紅細(xì)胞表面抗原的不完全抗體，使紅細(xì)胞發(fā)生凝集?？骨虻鞍自囼?yàn)Coombs（Coombstest）（1945）分類：直接抗球蛋白試驗(yàn)（直接Coombs試驗(yàn)）間接抗球蛋白試驗(yàn)（間接Coombs試驗(yàn)）應(yīng)用：新生兒溶血癥檢測(cè)等?！?—胎兒紅細(xì)胞D抗原刺激母體免疫系統(tǒng)抗D（IgG）（不完全抗體）免疫動(dòng)物抗球蛋白抗體（二抗）抗原-抗體（無(wú)凝集）抗原-抗體-二抗（凝集）抗球蛋白試驗(yàn)—*—案例選項(xiàng)RFA：直接抗球蛋白試驗(yàn)B：間接抗球蛋白試驗(yàn)該Rh（D）-孕婦今產(chǎn)下第二胎，新生兒為Rh（D）+，新生兒發(fā)生溶血癥，怎樣確定新生兒的紅細(xì)胞上有無(wú)不完全抗體？其母親的血清中有無(wú)不完全抗體？抗球蛋白試驗(yàn)—*—試劑已知二抗標(biāo)本新生兒紅細(xì)胞？抗球蛋白試驗(yàn)直接抗球蛋白試驗(yàn)（直接Coombs試驗(yàn)）檢測(cè)結(jié)合在紅細(xì)胞表面的不完全抗體的方法—*—抗原-抗體（無(wú)凝集）抗原-抗體-二抗（凝集）已知抗體抗球蛋白試驗(yàn)—*—試劑標(biāo)本抗球蛋白試驗(yàn)間接抗球蛋白試驗(yàn)（間接Coombs試驗(yàn)）檢測(cè)血清中游離不完全抗體的方法母親血清？已知抗體已知RBC（含D）—*—抗原-抗體抗原-抗體-二抗（凝集）已知二抗抗球蛋白試驗(yàn)已知RBC（含D）待測(cè)抗D（IgG）（不完全抗體）抗原-抗體—*—冷凝集試驗(yàn)此試驗(yàn)是用于檢測(cè)血清中冷凝集素的方法，冷凝集素是冷反應(yīng)型抗紅細(xì)胞抗體，在0-4℃是容易和紅細(xì)胞膜表面抗原結(jié)合，具有較強(qiáng)的凝集紅細(xì)胞的作用，屬于IgM型抗體，可存在于正常人血清中，但效價(jià)比較低?？骨虻鞍自囼?yàn)?zāi)磻?yīng)免疫學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)教學(xué)培訓(xùn)課件—*—凝集反應(yīng)的概念和分類顆?？乖?xì)菌、紅細(xì)胞等）與相應(yīng)抗體特異性結(jié)合，或可溶性抗原（或抗體）致敏載體顆粒（如紅細(xì)胞、聚苯乙烯膠乳顆粒、炭粒等）形成的顆粒狀物質(zhì)與相應(yīng)抗體（或抗原）特異性結(jié)合，在適當(dāng)電解質(zhì)存在下，出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的凝集現(xiàn)象。凝集反應(yīng)概念—*—凝集反應(yīng)的概念和分類Ag顆粒性Ab+Ag-Ab（凝集）電解質(zhì)電解質(zhì)—*—凝集反應(yīng)的概念和分類顆粒性抗原類型紅細(xì)胞金黃色葡萄球菌—*—凝集反應(yīng)的概念和分類Widal（肥達(dá)反應(yīng)）(1896)Landsteiner（ABO血型）（1900）—*—凝集反應(yīng)的概念和分類Ag顆粒性Ab+Ag-Ab（凝集）電解質(zhì)？電解質(zhì)電解質(zhì)—*—凝集反應(yīng)的概念和分類直接間接（1）改造（2）反應(yīng)反應(yīng)—*—凝集反應(yīng)的概念和分類已知抗體載體抗體致敏載體抗體致敏載體待測(cè)抗原抗原抗體復(fù)合物（凝集）（1）改造（2）反應(yīng)—*—凝集反應(yīng)的概念和分類凝集反應(yīng)直接凝集反應(yīng)間接凝集反應(yīng)正向間接凝集試驗(yàn)反向間接凝集試驗(yàn)<不改造><改造><改造Ag><改造Ab>—*—凝集反應(yīng)的概念和分類檢測(cè)結(jié)果定性半定量定量備注：定性：常用“陰性”或“陽(yáng)性”，“有”或“無(wú)”判斷結(jié)果。半定量：常以滴度或效價(jià)表示。定量：有準(zhǔn)確的量值（數(shù)字和單位）。直接凝集反應(yīng)免疫學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)教學(xué)培訓(xùn)課件—*—直接凝集反應(yīng)電解質(zhì)Ag顆粒性Ab+Ag-Ab（凝集）電解質(zhì)—*—直接凝集反應(yīng)顆粒性抗原類型紅細(xì)胞金黃色葡萄球菌在適當(dāng)電解質(zhì)參與下，顆?？乖?xì)菌、螺旋體、紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板等）可直接與相應(yīng)抗體特異性結(jié)合出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的凝集現(xiàn)象。直接凝集反應(yīng)—*—直接凝集反應(yīng)直接凝集反應(yīng)玻片法試管法血型鑒定微孔板法效價(jià)測(cè)定柱凝集法直接凝集反應(yīng)類型—*—應(yīng)用舉例簡(jiǎn)述血型鑒定的原理和結(jié)果判斷方法。（玻片法）待測(cè)RBC直接凝集反應(yīng)思路分析R目標(biāo)：紅細(xì)胞表面抗原（未知顆粒性抗原）顆粒性抗原（未知）已知抗體（試劑）凝集現(xiàn)象？結(jié)果：凝集→陽(yáng)性；無(wú)凝集→陰性—*—直接凝集反應(yīng)微視頻：ABO、Rh血型鑒定正定型（玻片法）動(dòng)畫：血型鑒定的原理和結(jié)果判斷—*—應(yīng)用舉例什么是效價(jià)？怎樣測(cè)定？結(jié)果判斷方法？（試管法）待測(cè)血清直接凝集反應(yīng)思路分析R效價(jià)：又稱滴度，是指抗體（或抗原）與一定量的對(duì)應(yīng)物產(chǎn)生可見(jiàn)反應(yīng)的最小量，一般以抗體（或抗原）仍能與對(duì)應(yīng)物呈現(xiàn)可見(jiàn)反應(yīng)的最高稀釋度表示。結(jié)果：凝集2+的血清最高稀釋度可見(jiàn)反應(yīng)：明顯凝集（2+）倍比稀釋：1：2、1：4、