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藥品性狀鑒別主講人:XXX操作步驟5.顯微測量:顯微鑒定時應(yīng)用測量方法以測定細(xì)胞及細(xì)胞內(nèi)含物等的大小,應(yīng)用最多的是長度測定。常用的量具是目鏡測微尺與載物臺微尺。操作步驟5.顯微測量:
(1)目鏡測微尺,又稱目鏡量尺或目微尺。它是放在目鏡內(nèi)的一種標(biāo)尺,是一個直徑18-20mm的圓形玻璃片,中央刻有精確等距離的平行線刻度,常為50或100條,目鏡測微尺是用以直接測量物體用的,但其刻度所代表的長度是根據(jù)顯微鏡放大倍數(shù)不同而改變,故使用前必須用載物臺測微尺來標(biāo)化。操作步驟5.顯微測量:
(2)載物臺測微尺,又稱鏡臺測微尺或臺微尺。它是一種特制的載玻片,中央粘有一小圓形玻片,上刻有將1mm(或2mm)精確等分為100(或200)小格的細(xì)線,每小格長為10μm,它是用以標(biāo)化目鏡測微尺的。(3)目鏡測微尺的標(biāo)化,以確定使用同一顯微鏡及特定信數(shù)的物鏡、目鏡和鏡筒長度時,目鏡測微尺上每一格所代表的實(shí)際長度。操作步驟5.顯微測量:
標(biāo)化方法:將載物臺測微尺置于顯微鏡鏡臺上,按常規(guī)對光調(diào)焦,并移動測微尺物象于視野中央,從鏡筒中取下目鏡,旋下接目鏡的目鏡蓋,將目鏡測微尺放入目鏡筒中部的光欄上(應(yīng)正面向上),旋上目鏡蓋后返置鏡筒上,此時在視野中,除鏡臺測微尺的象外,還同時可觀察到目鏡測微尺的分度小格,移動鏡臺測微尺和旋轉(zhuǎn)目鏡,使兩種量尺的刻度平行。左邊的“0”刻度重合,尋找第二條重合刻度記錄兩刻度的讀數(shù),并根據(jù)比值計(jì)算出目鏡測微尺每小格在該物鏡條件下所相當(dāng)?shù)拈L度(μm)。
操作步驟5.顯微測量:
標(biāo)化方法:例如:接目鏡頭為10×,接物鏡頭為40×?xí)r,目鏡測微尺每17小格相當(dāng)于載物臺量尺4小格,則目鏡測微尺每1小格的長度為4×10μm÷17=2.35μm。操作步驟5.顯微測量:
(4)測量細(xì)胞及細(xì)胞內(nèi)含物的方法:將載物臺測微尺取下,換以裝有待測的標(biāo)本載片。對光,調(diào)焦,移動載片,使需測量的目的物置于目鏡量尺范圍內(nèi),調(diào)清物象,計(jì)數(shù)出目的物占測微尺的小格數(shù),乘以目鏡尺每1小格的長度值,即得。操作步驟5.顯微測量:
例如:測得淀粉粒長經(jīng)為20小格,每小格長2.35μm,20×2.35μm=47μm。測量通常是在高倍鏡下進(jìn)行,因目鏡量尺的每一小格的長度值較小,結(jié)果較為準(zhǔn)確,但如測量較長的物體,如纖維、非腺毛等的長度時,則在低倍鏡下測量為較為方便。每次測量記下數(shù)據(jù),并分析數(shù)據(jù)最小量值、最大量值和多見量值(μm)。如浙貝母淀粉粒直徑為6-56μm,表示最小量值和最大量值。如為6-40-56μm,中間的數(shù)值表示多見量值。測量直徑時,應(yīng)以物體中部為準(zhǔn)。
操作步驟5.顯微測量:
目鏡測微尺所代表的長度值隨不同目鏡與物鏡配合而異,因此在實(shí)驗(yàn)前,應(yīng)將專用的目鏡測微尺,在所用顯微鏡不同的倍數(shù)的目鏡與物鏡組合后,進(jìn)行測量其長度值,全部測定后記載于實(shí)驗(yàn)記錄本或?qū)?shù)值表貼在顯微鏡座上,備用。測量時,如大小與規(guī)定有差異時,允許有少量略高于或低于規(guī)定的數(shù)值。操作過程的記錄
1.組織特征的記錄,應(yīng)從外至內(nèi)的次序進(jìn)行,對有鑒別意義的特征需詳細(xì)的描述,并要繪制簡圖。2.粉末顯微鑒別時,先記錄原粉末的色澤、氣味,然后邊觀察,邊記錄,注意觀察應(yīng)找的特征,將每一特征一一描述及繪圖,在觀察與描述時,即應(yīng)測定其長度,一一作記錄,分析統(tǒng)計(jì)其長度。操作過程的記錄
描述特征時,應(yīng)根據(jù)先多數(shù)后少數(shù)的順序,將易見、多見的特征先加以描述,順次而為少見的,最后再描述偶見的,并在特征項(xiàng)下加注“多見”、“少見”等字樣。描述應(yīng)先著重描述特殊的組織、細(xì)胞和含有物。對于各類藥材均具有的一些基本組織,如葉類藥材有柵欄細(xì)胞、海綿細(xì)胞、細(xì)小導(dǎo)管等可不作重點(diǎn)描述。操作過程的記錄
3.繪圖時應(yīng)注意特征明確、線條清晰,徒手繪圖時,一邊用左眼向顯微鏡內(nèi)觀察,一邊睜開右眼將視野中特征圖象用鉛筆(HB畫粗線、4H畫中線、6H畫細(xì)線)轉(zhuǎn)繪于記錄紙上。顯微鑒別法注意事項(xiàng)
1.粉碎用具用完后,必須處理干凈,干燥后方能使用另一種藥材。2.所用的載玻片和蓋玻片應(yīng)絕對干凈,新片要用洗液浸泡或用肥皂水煮半小時,用水沖洗,再用蒸餾水沖洗1-2次,置于70%-90%乙醇中,取出,烘干。3.進(jìn)行顯微鑒別實(shí)驗(yàn)時有一定的步驟,一般先進(jìn)行甘油醋酸片的觀察后進(jìn)行水合氯醛片的觀察,最后再進(jìn)行滴加試劑或結(jié)合其他理化試劑的顯微觀察,所以在實(shí)驗(yàn)中,首先觀察淀粉粒,不論其多少、大小,首先描述,其次是它的顯微特征。
顯微鑒別法注意事項(xiàng)
4.為提高顯微鑒別的正確性,可與對照藥材或已經(jīng)鑒定品種的藥材對照觀察。5.成方制劑鑒別前,應(yīng)了解處方組成,分析處方中各
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