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致病菌的檢驗螺旋體霉形體立克次體及衣原體詳解演示文稿當(dāng)前1頁,總共34頁。(優(yōu)選)致病菌的檢驗螺旋體霉形體立克次體及衣原體當(dāng)前2頁,總共34頁。一、形態(tài)特征1、形態(tài):螺旋或波浪狀。2、大?。簯沂?,長3-500μm,寬0.09-3.0μm;某些螺旋體可通過一般的細(xì)菌濾器。3、基本結(jié)構(gòu):與細(xì)菌相似,有細(xì)胞壁、原始核質(zhì)。4、繁殖:二分裂。5、對某些抗生素敏感。當(dāng)前3頁,總共34頁。二、染色特性
1、G-,但多不易著色,故少用。
2、姬姆薩染色效果較好:染成紅色或藍(lán)色。染成藍(lán)色者多屬腐生性螺旋體。
3、病理組織中的螺旋體(1)銀染法:螺旋體染成黑褐色,其他細(xì)菌和組織均染成黃色。(2)印度墨汁負(fù)染色:螺旋體透明無色,背景襯有顏色,反差明顯,形象清晰。
4、常用相差和暗視野顯微鏡觀察,既能檢查形體又可分辨運動方式。當(dāng)前4頁,總共34頁。三分類:螺旋體目(Spirochaetales)螺旋體科(Spirochaetaceae),共5個屬:1、螺旋體屬:長5-500μm,寬0.2-0.75μm,厭氧或兼性厭氧,自由生活,多見于水生環(huán)境,目前尚未發(fā)現(xiàn)有致病者。2、脊螺旋體屬:長30-150μm,寬0.5-3.0μm,有螺旋2-10圈。在活體標(biāo)本,可用相差顯微鏡觀察到卵圓形的內(nèi)含物及大束的軸絲。營共生生活,通常存于蛤、貝等軟體動物腸內(nèi)。3、疏螺旋體屬:長3-15μm,寬0.2-0.5μm,螺旋琉松而不規(guī)則,較容易染色。厭氧,營寄生生活。一部分為病原菌,經(jīng)蟬及虱傳播,其中包括感染人的各種回歸熱病原體。在獸醫(yī)實踐上具有重要意義的有:①鵝疏螺旋體(Borreliaanserina)可引起鴨、火雞、雞及某些野禽的疏螺旋體病。②色勒氏疏螺旋體(Borreliatheileri),可引起牛和馬的疏螺旋體病。當(dāng)前5頁,總共34頁。4、密螺旋體屬:本屬螺旋體長5-20μm,寬0.09-0.5μm;螺旋彎曲而致密。多數(shù)菌種用姬姆薩氏染料染色,效果不佳。用銀染法較好。本屬的病原菌最熟知者為梅毒蒼白密螺旋體。在獸醫(yī)微生物學(xué)中重要者有兔密螺旋體和豬痢疾密螺旋體。5、細(xì)螺旋體屬:細(xì)螺旋體屬是其一端或兩端可彎曲呈鉤狀的一大類螺旋體,故通常又稱之為鉤端螺旋體。大部分是腐生性和水生性的,一部分有寄生性,可引起人和動物的傳染病。當(dāng)前6頁,總共34頁。當(dāng)前7頁,總共34頁。四、培養(yǎng)特性螺旋體的培養(yǎng)與細(xì)菌相比較為困難,但有些種屬,特別是細(xì)螺旋體屬的培養(yǎng)并不難。其他種屬的培養(yǎng)則要特殊的培養(yǎng)基,既便如此,也不易成功。細(xì)螺旋體屬在需氧條件下可以生長,而密螺旋體屬則要求嚴(yán)格的厭氧條件。當(dāng)前8頁,總共34頁。伯氏疏螺旋體(B.burgdorferi)
引起萊姆?。↙ymedisease)的病原體。萊姆病最早于1975年在美國的康尼狄克州的萊姆鎮(zhèn)發(fā)現(xiàn),故而得名,現(xiàn)已遍布全世界。當(dāng)前9頁,總共34頁。此病由硬蜱(Ixodes)為傳播媒介,感染人和犬、牛、馬等動物,可致關(guān)節(jié)炎等多種疾病。病人出現(xiàn)的第一個病癥是被蜱叮咬的部位呈圓環(huán)狀疹塊。
當(dāng)前10頁,總共34頁。第17章支原體(Mycoplasma)
支原體又稱霉形體,是一類無細(xì)胞壁的細(xì)菌,是目前已知能在無生命的培養(yǎng)基中繁殖的最小微生物。自然界廣泛分布,如污水,土壤,礦石,植物,昆蟲,家畜,禽類和人體中;危害人、畜、植物,引起高度重視。
當(dāng)前11頁,總共34頁。特點:(1)無細(xì)胞壁,細(xì)胞柔軟,多形性,能通過細(xì)菌濾器
(2)在人工培養(yǎng)基中生長繁殖,形成“煎荷包蛋狀”菌落(3)含有DNA和RNA(4)以二分裂或芽生方式繁殖(5)對青霉素有抵抗力當(dāng)前12頁,總共34頁。一、形態(tài)與染色
支原體的大小為0.2-0.3μm,可通過濾菌器,常給細(xì)胞培養(yǎng)帶來污染。具多形性和可塑性。無鞭毛,革蘭氏染色陰性,著色不良,姬姆薩或瑞氏染色良好,呈淡紫色。支原體基因組為一環(huán)狀雙鏈DNA,分子量?。▋H有大腸桿菌的五分之一),合成與代謝很有限。
細(xì)胞膜具有三層結(jié)構(gòu),內(nèi)、外層主要是蛋白質(zhì),中間層主要是脂質(zhì)(固醇含量高)。當(dāng)前13頁,總共34頁。與細(xì)菌L型的區(qū)別支原體
L型遺傳上與細(xì)菌無關(guān)與原菌有關(guān),??梢曰貜?fù)細(xì)胞膜含高濃度固醇細(xì)胞膜不含固醇在一般培養(yǎng)基中穩(wěn)定大多需要高滲培養(yǎng)生長慢,菌落小菌落稍大
菌落中心深埋于培養(yǎng)基中菌落生長于基質(zhì)表面,不易刮除易于刮除液體培養(yǎng)混濁度低有一定混濁度當(dāng)前14頁,總共34頁。二、培養(yǎng)特性
1、營養(yǎng)要求比一般細(xì)菌高,除基礎(chǔ)營養(yǎng)物質(zhì)外還需加10-20%人或動物血清以提供所需的膽固醇。2、最適之間,低于7.0則死亡,但解脲脲原體最適。3、多數(shù)兼性厭氧,有些菌株在初分離時加入5%CO2生長更好。生長緩慢,在瓊脂含量較少的固體培養(yǎng)基上孵育2-3天出現(xiàn)典型的“荷包蛋樣”菌落:圓形,核心部分較厚,向下長入培養(yǎng)基,周邊為一層薄的透明顆粒區(qū)。當(dāng)前15頁,總共34頁。4、可在雞胚的卵黃囊或絨毛尿囊膜上生長,有些菌株可致雞胚死亡。也能在細(xì)胞培養(yǎng)中生長,不一定引起細(xì)胞病變,但可妨礙病毒的細(xì)胞培養(yǎng)。5、液體培養(yǎng)基中生長少,不易見渾濁,僅有小顆粒沉于管底。6、繁殖方式多樣,主要為二分裂,還有斷裂、分枝、出芽等。同時,支原體分裂和其DNA復(fù)制不同步,可形成多核長絲體。當(dāng)前16頁,總共34頁。三、生化反應(yīng)與分型
1、一般能分解葡萄糖的支原體則不能利用精氨酸,能利用精氨酸的則不能分解葡萄糖。解脲脲原體不能利用葡萄糖或精氨酸,但可利用尿素作能源。
2、各種支原體都有特異的表面抗原結(jié)構(gòu),很少有交叉反應(yīng),具有型特異性。應(yīng)用生長抑制試驗(Growthinhibitiontest,GIT)、代謝抑制試驗(Metabolicinhibitiontest,MIT)等可鑒定支原體抗原并進(jìn)行分型。
當(dāng)前17頁,總共34頁。四、抵抗力支原體對熱的抵抗力與細(xì)菌相似。對環(huán)境滲透壓敏感,滲透壓突變可致細(xì)胞破裂。對重金屬鹽、石炭酸、來蘇爾和一些表面活性劑較細(xì)菌敏感,但對醋酸鉈、結(jié)晶紫和亞銻酸鹽的抵抗力比細(xì)菌強。對影響壁合成的抗生素如青霉素不敏感,但紅霉素、四環(huán)素、鏈霉素及氯霉素等作用于支原體核蛋白體的抗生素,可抑制或影響蛋白質(zhì)合成,有殺滅支原體的作用。
當(dāng)前18頁,總共34頁。五、致病性與免疫性1、支原體不侵入機體組織與血液,在呼吸道或泌尿生殖道上皮細(xì)胞粘附并定居后,通過不同機制引起細(xì)胞損傷,如獲取細(xì)胞膜上的脂質(zhì)與膽固醇造成膜損傷,釋放神經(jīng)(外)毒素、磷酸酶及過氧化氫等。2、巨噬細(xì)胞、IgG及IgM對支原體均有一定的殺傷作用。呼吸道粘膜產(chǎn)生的二聚體IgA抗體已證明有阻止支原體吸附的作用。致敏淋巴細(xì)胞可增強機體對肺炎支原體的抵抗力。當(dāng)前19頁,總共34頁。3、臨床致?。?)宿主范圍很窄,多具有種特異性。(2)定居于呼吸道、泌尿生殖道、乳腺、消化道、眼粘膜表面;(3)單純性感染:癥狀輕微或無臨床表現(xiàn);(4)有細(xì)菌或病毒繼發(fā)感染或受外界不良因素的影響,可致疾病,如:羊胸膜肺炎、豬氣喘病、雞慢性呼吸道感染等。(5)疾病特點:潛伏期長,慢性經(jīng)過,地方性流行。當(dāng)前20頁,總共34頁。六、微生物學(xué)診斷直接鏡檢:形態(tài)多樣,意義不大。
分離培養(yǎng):無菌病料接種含青霉素的血清培養(yǎng)基中,注意與L型菌區(qū)別。生理生化反應(yīng):可縮小選用抗血清的范圍,種的鑒定必須用血清學(xué)方法最后確定,這與細(xì)菌鑒定到種只需作生理生化測定不同。血清學(xué)檢查
當(dāng)前21頁,總共34頁。第18章立克次體(Rickettsia)和衣原體(Chlamydia)
為紀(jì)念HowardTaylorRicketts而命名。立克次體(Rickettsia)是一類嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生的原核細(xì)胞型微生物,在形態(tài)結(jié)構(gòu)、化學(xué)組成及代謝方式等方面均與細(xì)菌類似:具有細(xì)胞壁;以二分裂方式繁殖;含有RNA和DNA兩種核酸;由于酶系不完整需在活細(xì)胞內(nèi)寄生;對多種抗生素敏感。立克次體病多數(shù)是自然疫源性疾病,且人畜共患。我國除斑疹傷寒、恙蟲病外,已證明有Q熱、斑點熱疫源地存在。節(jié)肢動物和立克次體病的傳播密切相關(guān),或為儲存宿主,或同時為傳播媒介。
當(dāng)前22頁,總共34頁。一、生物學(xué)特性
1.具有多形態(tài)的特點,球桿狀或桿狀,0.3-0.6×0.8-2.0μm。2.大小介于細(xì)菌和病毒之間,多數(shù)不能通過細(xì)菌濾器。3.有細(xì)胞壁,革蘭氏陰性,但一般著染不明顯,因此常用Gimenez染色。
4.專性細(xì)胞內(nèi)寄生,以二分裂方式繁殖6.對理化因素抵抗力不強,尤對熱敏感7.主要寄生于節(jié)肢動物,通過叮咬感染人和動物當(dāng)前23頁,總共34頁。二、抗原結(jié)構(gòu)
1、立克次體:有兩種主要抗原,一種為可溶性(醚類),耐熱,與細(xì)胞壁表面的粘液層有關(guān),為群特異性。另一種為顆粒(外膜)性,不耐熱,與細(xì)胞壁成份有關(guān),為種特異性。
2、斑疹傷寒群:
群特異性抗原一般與其他屬立克次體很少或不交叉,而種特異性蛋白抗原一般有交叉。
3、斑點熱群:同斑疹傷寒群。
4、恙蟲病群:只有恙蟲病立克次體一個種,有若干血清型。
斑疹傷寒等具有與變形桿菌某些菌株O抗原共同的耐熱多糖抗原,因而臨床上常用以代替相應(yīng)的立克次體抗原進(jìn)行凝集反應(yīng),作為人或動物血清中相關(guān)抗體的檢查。這種交叉凝集試驗稱外斐反應(yīng)(Weii-Felixreaction),作為輔助診斷。當(dāng)前24頁,總共34頁。三、抵抗力除貝鈉柯克斯體外(Q熱),立克次體對理化因素的抵抗力與細(xì)菌繁殖體相似。56℃,30min死亡;室溫放置數(shù)小時即可喪失活力。對低溫及干燥的抵抗力強,在干燥虱糞中能存活數(shù)月。對一般消毒劑敏感,對四環(huán)素和氯霉素敏感?;前奉愃幬锊粌H不能抑制反而促進(jìn)立克次體的生長、繁殖。
當(dāng)前25頁,總共34頁。四、致病性與免疫性
1、立克次體的致病因子有兩種,一為內(nèi)毒素,由脂多糖組成,具有與腸桿菌內(nèi)毒素相似的多種生物學(xué)活性。二為磷脂酶A,可分解脂膜而溶解細(xì)胞,導(dǎo)致宿主細(xì)胞中毒。2、立克次體感染與節(jié)肢動物關(guān)系密切,如虱、蚤、蜱、螨等,虱、蚤的傳播方式是含大量病原體的糞便在叮咬處經(jīng)搔抓皮損處侵入人體;蜱、螨傳播則是由叮咬處直接注入體內(nèi)。①首先吸附細(xì)胞膜上受體,再由磷脂酶A溶解吞噬體膜的甘油酸而進(jìn)入胞質(zhì),隨后分裂繁殖,導(dǎo)致細(xì)胞腫脹、中毒,出現(xiàn)血管炎癥,管腔堵塞而形成血栓、組織壞死。②立克次體也能進(jìn)入血流而擴(kuò)散,到達(dá)皮膚、肝、脾、腎等處而出現(xiàn)毒血癥。③立克次體還能直接破壞血管內(nèi)皮細(xì)胞,使透性增加、血容量下降和水腫。另外,血管活性物質(zhì)的激活可加劇血管擴(kuò)張,導(dǎo)致血壓降低,休克、DIC等。當(dāng)前26頁,總共34頁。3、由于立克次全是嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生的病原體,其抗感染免疫以細(xì)胞免疫為主。病后一般能獲得較強的免疫性。感染后產(chǎn)生的特異性群和種抗體有中和毒性物質(zhì)和促進(jìn)吞噬的作用。特異性細(xì)胞因子有增強巨噬細(xì)胞殺滅胞內(nèi)立克次體的作用。
當(dāng)前27頁,總共34頁。五、微生物診斷1.分離培養(yǎng)
病料接種易感動物腹腔,分離毒株作雞胚或細(xì)胞培養(yǎng),結(jié)合血清學(xué)試驗鑒定。2.血清學(xué)試驗
用已知Ag作凝集試驗、補體結(jié)合試驗、中和試驗當(dāng)前28頁,總共34頁。
六、防治原則(1)預(yù)防立克次體重點應(yīng)針對中間宿主及儲存宿主。消滅體虱有望根絕流行性斑疹傷寒;滅鼠、殺滅媒介節(jié)肢動物和個人預(yù)防是防止地方性斑疹傷寒、恙蟲熱、斑點熱的有效措施。目前國內(nèi)斑疹傷寒已基本控制,大城市極少見,恙蟲熱和Q熱也僅在東南沿海和西南地區(qū)發(fā)生。(2)特異性預(yù)防以接種滅活疫苗為主,接種后有一定效果。病原體的最終清除仍有賴于機體細(xì)胞免疫功能。
(3)氯霉素和四環(huán)素對各種立克次體均有很好效果,能明顯縮短病程,大幅度降低死亡率。但某些立克次體病的復(fù)發(fā)日漸增多,可能病原未能全部殺死的緣故。當(dāng)前29頁,總共34頁。衣原體(Chlamydia)
一類嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生,有獨特發(fā)育周期,能通過細(xì)菌濾器的原
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