高中生物選修三動物細胞融合和單克隆抗體

高中生物選修三動物細胞融合和單克隆抗體第一頁，共二十二頁，2022年，8月28日

回憶已學(xué)知識，你是否已經(jīng)見到過動物細胞融合的實例？人-鼠(想像圖)第二頁，共二十二頁，2022年，8月28日動物細胞融合與單克隆抗體第三頁，共二十二頁，2022年，8月28日鼠細胞人細胞人工誘導(dǎo)一、動物細胞融合雜交細胞動物細胞融合（技術(shù)）：是指（在一定的條件下）兩個或多個細胞融合形成一個細胞的過程。1、概念：第四頁，共二十二頁，2022年，8月28日2、誘導(dǎo)融合的因素化學(xué)法：聚乙二醇(PEG)誘導(dǎo)融合.物理法：電激融合生物法：滅活的病毒誘導(dǎo)融合.病毒顆粒黏附細胞表面細胞膜連接細胞膜被病毒顆粒穿通細胞融合、形成雜種細胞

為什么滅活的病毒能作誘導(dǎo)劑？滅活喪失感染性但保留融合活性第五頁，共二十二頁，2022年，8月28日獲得雜種植株物理、化學(xué)方法（同左）滅活的病毒

物理（離心、振蕩、電激）化學(xué)（聚乙二醇）直接誘導(dǎo)細胞融合去壁—原生質(zhì)體融合—誘導(dǎo)新壁—雜種植株細胞膜的流動性細胞膜的流動性結(jié)果誘導(dǎo)方法步驟融合的原理動物細胞融合植物體細胞雜交比較項目植物、動物細胞融合的比較獲得雜交細胞小結(jié)第六頁，共二十二頁，2022年，8月28日3、動物細胞融合技術(shù)的意義和應(yīng)用第七頁，共二十二頁，2022年，8月28日問題：抗體由什么細胞產(chǎn)生？其化學(xué)本質(zhì)是什么？與抗原作用的特點？主要分布在哪里？二、單克隆抗體的制備第八頁，共二十二頁，2022年，8月28日抗體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法：從血清中分離抗體

該法制備抗體的特點：

產(chǎn)量低、純度低，且抗體的特異性差。多種漿細胞動物體內(nèi)多種抗體抗原第九頁，共二十二頁，2022年，8月28日提示：每一個效應(yīng)B淋巴細胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一，特異性強的抗體。如果利用單個效應(yīng)B淋巴細胞進行無性繁殖（克?。纬杉毎?，這樣的細胞群就有可能產(chǎn)生出化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體——單克隆抗體。問題：怎樣獲得化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體呢？第十頁，共二十二頁，2022年，8月28日材料：效應(yīng)B細胞在體內(nèi)只能由B淋巴細胞增殖、分化而來,不再進行分裂,在體外培養(yǎng)的條件下，也很難分裂。思考：用什么方法才能讓B淋巴細胞在體外培養(yǎng)時既能產(chǎn)生抗體又能無限增殖?第十一頁，共二十二頁，2022年，8月28日雜交瘤細胞動物細胞培養(yǎng)技術(shù)動物細胞融合技術(shù)單克隆抗體

既能產(chǎn)生特異性抗體，又能大量繁殖的細胞骨髓瘤細胞能無限增殖+一個漿細胞只分泌一種特異性抗體設(shè)計方案：米爾斯坦科勒第十二頁，共二十二頁，2022年，8月28日讀下面一段文字資料，找出單克隆抗體的概念

人們發(fā)現(xiàn)，在動物發(fā)生免疫反應(yīng)的過程中，體內(nèi)的B細胞可以產(chǎn)生多達百萬種以上的特異性抗體，但是每個B細胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體。要想獲得大量的單一抗體，必須用單個B細胞進行無性繁殖，即克隆。單克隆抗體的概念單:單個細胞克隆:無性繁殖單克隆抗體:單個細胞克隆產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一特異性強的抗體第十三頁，共二十二頁，2022年，8月28日單克隆抗體的制備問題思考Q1Q2細胞兩兩融合后，有哪些類型？B-B;B-瘤;瘤-瘤哪種是需要的類型，要篩選嗎？第十四頁，共二十二頁，2022年，8月28日①細胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。②人淋巴細胞中有這兩種DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖。

③鼠骨髓瘤細胞中只有D途徑，沒有S途徑，可是能不斷分裂增殖。你想到篩選雜交瘤細胞的方案了么？

小資料：第十五頁，共二十二頁，2022年，8月28日單克隆抗體的制備問題思考Question經(jīng)過選擇培養(yǎng)基篩選的雜交瘤細胞群進行克隆是否就得到產(chǎn)生純度高的抗體？還需怎么辦？第十六頁，共二十二頁，2022年，8月28日有限稀釋法稀釋多次稀釋對能產(chǎn)生特異性抗體的單個雜交瘤細胞進行克隆，即單細胞克隆。由它產(chǎn)生的抗體，即單克隆抗體。將培養(yǎng)皿孔內(nèi)的上清液取出，檢測抗體。多孔細胞培養(yǎng)板第十七頁，共二十二頁，2022年，8月28日單克隆抗體雜交細胞滅活的病毒等手段小鼠骨髓瘤細胞B淋巴細胞經(jīng)免疫的小鼠提取雜交瘤細胞第一次篩選用特定的選擇培養(yǎng)基第二次篩選能產(chǎn)生專一抗體的雜交瘤細胞體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔提取單克隆抗體4.單抗制備過程中應(yīng)用了那些技術(shù)？動物細胞融合、動物細胞培養(yǎng)1.此過程中至少進行了幾次篩選？目的相同嗎？3.單克隆抗體的優(yōu)點？特異性強，靈敏度高，可大量制備。2.最終從哪兒提取單克隆抗體？第十八頁，共二十二頁，2022年，8月28日（1）作為診斷試劑——最廣泛應(yīng)用準確、高效、簡易、快速（如同位素標記單克隆抗體，可診斷腫瘤、心血管畸形等）三、單克隆抗體的應(yīng)用第十九頁，共二十二頁，2022年，8月28日（2）治療疾病和運載藥物生物導(dǎo)彈=單克隆抗體+藥物（治療腫瘤）(“生物導(dǎo)彈”—單抗導(dǎo)向，藥物為彈頭)單克隆抗體的應(yīng)用療效高、副作用小第二十頁，共二十二頁，2022年，8月28日1、科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細胞與某種細胞融合，得到雜交細胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細胞融合的是（）A.經(jīng)過免疫的B淋巴細胞B.沒經(jīng)過免疫的T淋巴細胞

C.經(jīng)過免疫的T淋巴細胞D.沒經(jīng)過免疫的Ｂ淋巴細胞A鞏固練習(xí)2.動物細胞融合與植物體細胞雜交的比較中，正確的是（）誘導(dǎo)融合的方法完全相同B.所用的技術(shù)手段基本相同C.操作步驟基本相同D.都能形成雜種細胞D第二十一頁，共二十二頁，2022年，8月28日3.單克隆抗體制備過程中培育的雜交細胞是（）A.由小鼠能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞與肝細胞融合B.由小鼠一個B淋巴細胞誘導(dǎo)融合而成C.由小鼠一