急性經(jīng)皮毒性試驗

僅供個人參考僅供個人參考不得用于商業(yè)用途不得用于商業(yè)用途三、急性經(jīng)皮毒性試驗范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了動物急性皮膚毒性試驗的根本原則、要求和方法。Forpersonaluseonlyinstudyandresearch;notforcommercialuse本標(biāo)準(zhǔn)適用于化裝品原料安全性毒理學(xué)檢測。標(biāo)準(zhǔn)性引用文件OECDGuidelinesforTestingofChemicals (No.402, Feb.1987)USEPAOPPTSHarmonizedTestGuidelines〔Series870.1200，Aug.1998)試驗?zāi)康钠吩隙拘苑旨壓蜆?biāo)簽標(biāo)識以及確定亞慢性毒性試驗和其它毒理學(xué)試驗劑量供給依據(jù)。定義急性皮膚毒性Acutedermaltoxicit損害效應(yīng)。經(jīng)皮L5〔,Mediumlethaldose體中半數(shù)死亡的毒物的統(tǒng)計學(xué)劑量。以單位體重涂敷受試物的重量(mg/kg或g/kg)來表示。試驗的根本原則和死亡狀況。試驗期間死亡的動物要進(jìn)展尸檢，試驗完畢時仍存活的動物要處死并進(jìn)展尸檢。假設(shè)受試物具有腐蝕性或強(qiáng)刺激性可不進(jìn)展急性經(jīng)皮毒性試驗。試驗方法受試物液體受試物一般不需稀釋。假設(shè)受試物為固體，應(yīng)研磨成細(xì)粉狀，并用適量水或無毒、無刺激性、不影響受試物穿透皮膚、不與受試物反響的介質(zhì)混勻，以保證受試物與皮膚有良好的接觸。常用的介質(zhì)有橄欖油、羊毛脂、凡士林等。試驗動物和飼養(yǎng)環(huán)境可選用安康成年大鼠、家兔或豚鼠作為試驗動物，也可使用其它種屬動物進(jìn)展試驗。使用雌性動物應(yīng)是未孕和未曾產(chǎn)仔的。建議試驗動物體重范圍為：大鼠200g~300g；家兔2kg~3kg；豚鼠350g~450g。試驗動物皮膚應(yīng)安康無破損。試驗前動物要在試驗動物房環(huán)境中至3d~5d時間。試驗動物及試驗動物房應(yīng)符合國家相應(yīng)規(guī)定。選用常規(guī)飼料，飲水不限制。6.３劑量水平依據(jù)所選用的方法要求，原則上應(yīng)設(shè)4~610只，雌雄各半。各劑量組間距大小以兼顧產(chǎn)生毒性大小和死亡為宜，通常以較大組距和較少量動物進(jìn)展預(yù)試。10只動物〔雌雄各半〕皮膚涂抹5000mg/kg體重劑量，當(dāng)未引起動物死亡，可考慮不再進(jìn)展多個劑量的急性經(jīng)皮毒性試驗。試驗步驟試驗開頭前24h，剪去或剃除動物軀干背部擬染毒區(qū)域的被毛，去毛時應(yīng)格外留神，不要損傷皮膚以免影響皮膚的通透性。涂皮面積約占動物體外表積的10%，應(yīng)依據(jù)動物體重確200g~300g30cm2~40cm22kg~3kg的家兔約為160cm2~210cm2,350g~450g46cm2~54cm2。將受試物均勻涂敷于動物背部皮膚染毒區(qū)，然后用一層薄膠片掩蓋，無刺激膠布固定，防止動物舔食。假設(shè)受試物毒性較高，可削減涂敷面積，但涂敷仍需盡可能薄而均勻。一般封24h。染毒完畢后，應(yīng)使用水或其它適宜的溶液去除殘留受試物。觀看期限一般不超過14d短而定。假設(shè)有延遲死亡跡象，可考慮延長觀看時間。1d要定時觀看試驗動物的中毒表現(xiàn)和死亡狀況，其后至少每天進(jìn)展一次認(rèn)真的檢查。包括被毛和皮膚、眼睛和粘膜以及呼吸、循環(huán)、自主神經(jīng)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)、肢體運動和行為活動等的轉(zhuǎn)變。特別留意觀看動物是否消滅震顫、抽搐、流涎、腹瀉、嗜睡、和昏迷等病癥。死亡時間的記錄應(yīng)盡可能準(zhǔn)確。觀看期內(nèi)存活動物每周稱重、觀看期完畢存活動物應(yīng)稱重，處死后進(jìn)展尸檢。24h和24h以上動物并存在大體病理轉(zhuǎn)變的器官應(yīng)進(jìn)展病理組織學(xué)檢查。LD，建議承受霍恩氏法、--對數(shù)圖解法和寇氏法等。50試驗結(jié)果評價評價試驗結(jié)果時，應(yīng)將經(jīng)皮LD50

與觀看到的毒性效應(yīng)和尸檢所見相結(jié)合考慮，LD 值是50受試物毒性分級和標(biāo)簽標(biāo)識以及判定受試物經(jīng)皮膚吸取后引起動物死亡可能性大小的依據(jù)。LD50

值時肯定要注明所用試驗動物的種屬、性別、染毒途徑、觀看期限等。評價應(yīng)包括動物接觸受試物與動物特別表現(xiàn)〔包括行為和臨床轉(zhuǎn)變、大體損傷、體重變化、致死效應(yīng)及其它毒性作用〕的發(fā)生率和嚴(yán)峻程度之間的關(guān)系。1。試驗報告試驗報告應(yīng)包括如下內(nèi)容:受試物名稱、理化性狀、配制方法、所用濃度；試驗動物的種屬、品系和來源〔注明合格證號和動物級別；試驗動物飼養(yǎng)環(huán)境，包括飼料來源、室溫、相對濕度、試驗動物房合格證號；所用劑量和動物分組，每組所用動物性別、數(shù)量及體重范圍；染毒后動物中毒表現(xiàn)和死亡狀況及消滅時間，大體解剖及病理所見；LD50

的方法；列表報告結(jié)果和計算LD50

及其95可信區(qū)間〔建議的表格形式見表2；結(jié)論。LD (mg/kg)50

1皮膚毒性分級

毒性分級≤200>200～2023>2023～5000>5000

高毒中等毒低毒實際無毒表2 對大鼠急性經(jīng)皮毒性試驗結(jié)果動物性別 劑量分組〔mg/kg〕

動物數(shù)〔只〕

體重〔x±SD〕(g)0天 7天 14天

死亡動物數(shù)〔只〕

死亡率〔%〕LD 95%可信區(qū)間：50雄性動物：雌性動物：試驗結(jié)果的解釋急性經(jīng)皮毒性試驗爭論和經(jīng)皮LD50

確實定供給了受試物經(jīng)皮染毒的毒性。其結(jié)果外推到人類的有效性很有限。急性經(jīng)皮毒性試驗的結(jié)果應(yīng)與經(jīng)其它途徑染毒的急性毒性試驗結(jié)果相結(jié)合進(jìn)展綜合評價。僅供個人用于學(xué)習(xí)、爭論；不得用于商業(yè)用途。Forpersonaluseonlyinstudyandresearch;notforcommercialuse.Nurfürdenpers?nlichenfürStudien,Forschung,zukommerziellenZweckenverwendetwerden.Pourl”étudeetlarechercheuniquementàdesfinspersonnelles;pasàdesfinscommerciales.толькодлялюдей,которыеиспользуютсядляобучения,исследованийинедолжныиспользоватьсявкоммерческихцелях.以下無正文僅供個人用于學(xué)習(xí)、爭論；不得用于商業(yè)用途。Forpersonaluseonlyinstudyandresearch;notforcommercialuse.Nurfürdenpers?nlichenfürStudien,Forschung,zukommerziellenZweckenverwendetwerden.Pourl”étudeetlarechercheuniquementàdesfinspersonnelles;pasàdesfinscommerciales.толькодлялюдей,которыеиспользуютсядляобучения,исследованийинедолжныиспользоватьсявкоммерческихцелях.以下無正文僅供個人用于學(xué)習(xí)、爭論；不得用于商業(yè)用途。Forpersonaluseonlyinstudyandresearch;notforcommercialuse.Nurfürdenpers?nlichenfürStudien,Forschung,zukommerziellenZweckenverwendetwerden.Pourl”étudeetlarechercheuniquementàdesfinspersonnelles;pasàdesfinscommerciales.толькодлялюдей,к