免疫組織化學(xué)抗體試劑及檢測(cè)試劑盒注冊(cè)申報(bào)資料的基礎(chǔ)要求

IIQCZIZZrw7、免疫組織化學(xué)抗體試劑及檢測(cè)試劑盒注冊(cè)申報(bào)資料的基本要求2013-01-0401:48免疫組織化學(xué)抗體試劑及檢測(cè)試劑是指一類利用免疫學(xué)原理聯(lián)合酶催化底物顯色的化學(xué)方法，檢測(cè)組織標(biāo)本中抗原的檢測(cè)試劑。此類試劑為待測(cè)抗原特異性單克隆或多克隆抗體，或抗體與顯色系統(tǒng)、比較試劑、質(zhì)控片及其余協(xié)助試劑一起包裝成試劑盒形式的檢測(cè)試劑盒。該類產(chǎn)品檢測(cè)項(xiàng)目眾多，應(yīng)用寬泛，檢測(cè)過程為多步驟檢測(cè)，影響要素多，在臨床上主要用于檢測(cè)細(xì)胞的特異性抗原以確立細(xì)胞的表型。該類產(chǎn)品的預(yù)期用途與診療、鑒識(shí)診療、預(yù)后判斷、指導(dǎo)用藥有關(guān)，依照三類體外診療試劑管理。鑒于該類產(chǎn)品臨床應(yīng)用的重要性及特別性，依據(jù)當(dāng)前注冊(cè)申報(bào)工作的需要、依照《體外診療試劑注冊(cè)管理方法（試行）》、《體診外斷試劑臨床研究技術(shù)指導(dǎo)原則》以及《體外診療試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》的有關(guān)規(guī)定，聯(lián)合臨床及病理檢測(cè)中的應(yīng)用實(shí)踐、臨床病理專家和生產(chǎn)公司的建議，現(xiàn)對(duì)免疫組織化學(xué)抗體試劑及檢測(cè)試劑盒注冊(cè)申報(bào)資料提出以下基本要求（關(guān)于本要求未說起的部分，申請(qǐng)人均應(yīng)依照有關(guān)法例要求提交注冊(cè)申報(bào)資料）。本《要求》是在當(dāng)前科學(xué)技術(shù)認(rèn)識(shí)水平及現(xiàn)階段免疫組化類產(chǎn)品技術(shù)審評(píng)基礎(chǔ)上形成的，審評(píng)人員會(huì)親密關(guān)注有關(guān)技術(shù)的最新進(jìn)展，跟著認(rèn)識(shí)的提升將適時(shí)調(diào)整。因?yàn)樵擃惍a(chǎn)品種類眾多，《基本要求》不可以涵蓋全部該類產(chǎn)品的特別狀況，如某些要求不合用，申請(qǐng)人也可采納其余方式證明產(chǎn)品的技術(shù)性能，建議申請(qǐng)人對(duì)此進(jìn)行詳盡說明，并1/10IIQCZIZZrw7、提交相應(yīng)的性能考證資料。依照免疫組化不一樣標(biāo)記物的臨床應(yīng)用狀況，將其分為二個(gè)大類：A類：Her2/Neu、ER、PR、ALK、CD117、c-met、CD20、EGFR等與臨床治療、用藥親密有關(guān)的標(biāo)記物；其余嶄新標(biāo)記物，擁有新的臨床意義。B類：臨床使用多個(gè)指標(biāo)綜合診治的標(biāo)記物之一，與協(xié)助診療、鑒識(shí)診療、病情監(jiān)測(cè)、預(yù)后有關(guān)標(biāo)記物：如：Ki67、CK5/6等。一、產(chǎn)品說明書.【產(chǎn)品名稱】：獨(dú)自的第一抗體試劑通用名稱建議采納以下命名方式：待測(cè)抗原特異性抗體+試劑（免疫組織化學(xué)法）?？贵w與顯色系統(tǒng)、比較試劑、質(zhì)控片及其余協(xié)助試劑一起包裝成試劑盒形式的檢測(cè)試劑盒通用名稱建議采納以下命名方式：待測(cè)抗原+檢測(cè)試劑盒（免疫組織化學(xué)法）。如：雌激素受體抗體試劑（免疫組織化學(xué)法）、孕酮受體檢測(cè)試劑盒（免疫組織化學(xué)法）。.【預(yù)期用途】：應(yīng)明確檢測(cè)的樣本種類（冰凍和/或白臘包埋等）；明確抗體的種類、克隆號(hào)、陽(yáng)性著色特色；明確臨床用途（診療、鑒識(shí)診療、預(yù)后判斷、指導(dǎo)用藥）；指明“對(duì)任何陽(yáng)性或陰性結(jié)果的解讀，應(yīng)2/10IIQCZIZZrw7、由病理醫(yī)生聯(lián)合病理形態(tài)學(xué)、臨床表現(xiàn)及其余檢測(cè)方法進(jìn)行，不作為獨(dú)自的診療指標(biāo)?！?【樣本要求】：應(yīng)明確對(duì)合用樣本的取材、固定、包埋及穩(wěn)固性（樣本辦理前、后的儲(chǔ)藏條件及有效期）的詳細(xì)要求；關(guān)于骨組織進(jìn)行脫鈣辦理等要求。此部分內(nèi)容可參照國(guó)內(nèi)、外有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)操作性文件內(nèi)容進(jìn)行編寫。.【檢測(cè)方法】：應(yīng)注明標(biāo)準(zhǔn)操作程序（手工和/或自動(dòng)化），明確介紹的染色前辦理步驟、抗原修復(fù)方式、各步驟辦理時(shí)間、所用緩沖液的配制及pH等內(nèi)容；假如申報(bào)產(chǎn)品只包含第一抗體，應(yīng)注明配套使用的第二抗體及顯色系統(tǒng)的詳盡信息；假如抗體為濃縮型抗體，還需明確介紹抗體工作液的濃度、稀釋液的詳盡信息；應(yīng)明確詳盡的“質(zhì)量控制”方法，為用戶供給可作為（內(nèi)部）陽(yáng)性和陰性比較的組織名稱。.【檢測(cè)結(jié)果的解說】：配合彩色圖片對(duì)結(jié)果判讀進(jìn)行說明，明確陽(yáng)性著色特色，包含顏色及著色部位。對(duì)可能出現(xiàn)的假陰性、假陽(yáng)性狀況進(jìn)行說明，并明確提出出現(xiàn)該狀況后的辦理方法。彩色圖片應(yīng)起碼包含，陽(yáng)性及陰性質(zhì)控片結(jié)果圖例；關(guān)于A類產(chǎn)品，應(yīng)包含不一樣級(jí)別（如合用）陽(yáng)性及陰性質(zhì)控片的結(jié)果圖例。.【參照值（參照范圍）】：業(yè)企可依據(jù)合用狀況進(jìn)行編寫；如不合用，無需編寫。另：因?yàn)椴±懋a(chǎn)品不存在“查驗(yàn)”說法，建議申請(qǐng)人，將說明書各項(xiàng)標(biāo)題中，全部【“查驗(yàn)”】改正為【“檢測(cè)”】。二、主要原資料研究資料3/10IIQCZIZZrw7、應(yīng)包含以下內(nèi)容：.抗體的免疫源資料。.抗原的特征。.詳盡的抗系統(tǒng)備資料，包含抗體的克隆選擇、抗體的純化。.抗體性質(zhì)判定資料，資料應(yīng)包含抗衡體種類、特異性、抗體辨別表位、親和力及效價(jià)的測(cè)定。申請(qǐng)人可經(jīng)過雙向瓊脂擴(kuò)散法、ELIS.公司內(nèi)部質(zhì)控片及試劑盒配套質(zhì)控片（如合用）的研究資料。建議在試劑盒中，設(shè)置弱陽(yáng)性質(zhì)控品（如合用），可更為敏捷的監(jiān)控試驗(yàn)過程中可能出現(xiàn)的錯(cuò)誤結(jié)果。.關(guān)閉液的研究資料，關(guān)閉液應(yīng)能夠關(guān)閉非特異聯(lián)合、內(nèi)源性酶活性或內(nèi)源性生物素等。三、反響系統(tǒng)研究資料因?yàn)槿旧珳囟?、時(shí)間、抗原修復(fù)與否、修復(fù)方式等實(shí)驗(yàn)條件關(guān)于染色結(jié)果有較大影響，關(guān)于檢測(cè)過程各步驟的實(shí)驗(yàn)條件，均應(yīng)有充足的試驗(yàn)考證資料支持。四、剖析性能評(píng)估資料1.應(yīng)起碼包含免疫反應(yīng)性及精細(xì)度研究資料。（1）免疫反響性：正常組織：對(duì)30種正常人體組織（見表1），每種組織種類許多于3例，進(jìn)行特異性評(píng)論，同時(shí)對(duì)著色地點(diǎn)及染色特色進(jìn)行描繪。4/10IIQCZIZZrw7、非正常組織：對(duì)有關(guān)良性、惡性病變組織進(jìn)行特異性評(píng)論，每種組織種類許多于3例。（2）精細(xì)度：在進(jìn)行精細(xì)度評(píng)論時(shí)，除申報(bào)試劑自己的影響外，還應(yīng)付檢測(cè)時(shí)間（日內(nèi)/白天）、批次（三個(gè)批次）、合用機(jī)型（如合用）等要進(jìn)素行有關(guān)的考證。.關(guān)于半定量的免疫組化檢測(cè)試劑，應(yīng)付不一樣強(qiáng)度分別進(jìn)行研究。若有手工和自動(dòng)兩種修復(fù)、染色方式，還應(yīng)付兩種方式之間的精細(xì)度進(jìn)行評(píng)論。.關(guān)于已寬泛應(yīng)用的與治療用藥及預(yù)后有關(guān)的病理產(chǎn)品，應(yīng)供給充足的文件支持資料，論證標(biāo)記物與療效、生計(jì)率之間的關(guān)系。支持資料能夠?yàn)槲募Y料或?qū)嶒?yàn)室/多中心臨床試驗(yàn)資料。關(guān)于新病理產(chǎn)品且預(yù)期用途與治療用藥及預(yù)后有關(guān)，支持資料應(yīng)包含文件資料及實(shí)驗(yàn)室/多中心臨床試驗(yàn)資料。.建議公司踴躍參加國(guó)內(nèi)（衛(wèi)生部病理質(zhì)控評(píng)論中心、各省直轄市臨床病理質(zhì)控中心等）、國(guó)際（NordiQC、UKNEQUAS、CAP等）質(zhì)控機(jī)構(gòu)的質(zhì)控活動(dòng)，并提交質(zhì)控結(jié)果報(bào)告（若有）。五、穩(wěn)固性研究資料因?yàn)榭贵w開瓶/稀釋后的穩(wěn)固性依據(jù)不一樣的儲(chǔ)存條件有較大變化，且開瓶使用后效價(jià)變化較快，直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，所以，申請(qǐng)人除貨架穩(wěn)固性外，還應(yīng)提交開瓶、機(jī)載穩(wěn)固性研究資料。關(guān)于濃縮型的抗體，還應(yīng)提交稀釋后抗體工作液的穩(wěn)固性研究資料。5/10IIQCZIZZrw7、六、參照值（范圍）確立資料關(guān)于上述A類產(chǎn)品中部分陽(yáng)性級(jí)別與治療用藥有關(guān)的標(biāo)記物，應(yīng)提交染色特色的研究資料及參照值確立資料。因?yàn)榇祟惷庖呓M化診療標(biāo)記物的參照值，隨研究/應(yīng)用的進(jìn)展不停變化，參照值確立資料可提交參照文件資料。關(guān)于上述其余A類及B類產(chǎn)品，僅需提交染色特色的研究資料七、臨床試驗(yàn)資料.臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)：該類產(chǎn)品臨床試驗(yàn)應(yīng)在許多于三家省級(jí)醫(yī)療衛(wèi)活力構(gòu)中達(dá)成，應(yīng)在經(jīng)過病理威望機(jī)構(gòu)認(rèn)證的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行（若有）。.臨床樣本：（1）樣本選用：因免疫組化實(shí)驗(yàn)在臨床上作為HE染色的后續(xù)步驟，應(yīng)選擇已有HE染色病理診療的白臘包埋組織和/或冰凍樣本作為當(dāng)選樣本，該診療應(yīng)在原始數(shù)據(jù)記錄表中予以體現(xiàn)，必需時(shí)，其結(jié)果應(yīng)在臨床總報(bào)告中列表進(jìn)行總結(jié)。（2）樣本例數(shù)：關(guān)于上述分類A類產(chǎn)品，臨床總樣本數(shù)起碼應(yīng)知足1000例，陽(yáng)性樣本例數(shù)不應(yīng)少于300例；上述B類產(chǎn)品，臨床總樣本數(shù)起碼應(yīng)滿足500例，陽(yáng)性樣本例數(shù)不應(yīng)少于150例。如合用冰凍樣本，也需進(jìn)行臨床試驗(yàn)，且起碼知足冰凍樣本總例數(shù)許多于200例，此中應(yīng)包含6/10IIQCZIZZrw7、許多于60例陽(yáng)性樣本。關(guān)于發(fā)病率低的病種，臨床試驗(yàn)陽(yáng)性樣本可適合減少。（3）樣本種類：應(yīng)包含說明書預(yù)期用途宣稱的陽(yáng)性樣本。關(guān)于上述A類標(biāo)記物，不一樣臨床適應(yīng)癥均應(yīng)波及，每種適應(yīng)癥陽(yáng)性樣本不該少于100例，總陽(yáng)性樣本例數(shù)不應(yīng)少于300例；關(guān)于B類標(biāo)記物，要求陽(yáng)性病例在說明書預(yù)期用途宣稱的表達(dá)組織中均應(yīng)有所波及，每種組織種類陽(yáng)性樣本不該少于30例。陰性樣本除了癌旁正常比較外，還應(yīng)包含易混雜的良、惡性疾病病例等。注：關(guān)于合用樣本種類為白臘包埋切片的檢測(cè)試劑，臨床試驗(yàn)樣本也可使用組織芯片進(jìn)行。.比較試劑的選擇：因?yàn)樵擃愒噭┊?dāng)前在境內(nèi)注冊(cè)較少，建議臨床試驗(yàn)選擇公認(rèn)較好的試劑進(jìn)行比對(duì)，如：該抗體克隆經(jīng)過國(guó)際威望機(jī)構(gòu)（如NordiQC等）年度評(píng)分紅績(jī)較好。與比較試劑不符的樣本應(yīng)使用最后臨床診療結(jié)果進(jìn)行確認(rèn)。.結(jié)果報(bào)告：（1）原始數(shù)據(jù)：1）應(yīng)提交CRF匯總表，內(nèi)容應(yīng)包含：性別、年紀(jì)、被查核試劑檢測(cè)結(jié)果、比較試劑檢測(cè)結(jié)果、HE染色結(jié)果等。2）應(yīng)提交當(dāng)選樣本染色代表性彩色圖片。（2）統(tǒng)計(jì)：大部分免疫組化標(biāo)記物的臨床應(yīng)用為定性類產(chǎn)品，一般應(yīng)使用四格表進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，報(bào)告敏感性、特異性或陽(yáng)性切合率、陰性切合7/10IIQCZIZZrw7、率等；關(guān)于指導(dǎo)用藥的定量、半定量產(chǎn)品而言，除了進(jìn)行整體數(shù)據(jù)線性有關(guān)剖析外，還應(yīng)依照結(jié)果判斷方法進(jìn)行分級(jí)統(tǒng)計(jì)。各結(jié)果應(yīng)報(bào)告95%置信區(qū)間并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)查驗(yàn)。.質(zhì)控：因?yàn)槊庖呓M化實(shí)驗(yàn)前辦理步驟許多，致使判讀結(jié)果可能會(huì)在實(shí)驗(yàn)人員間、實(shí)驗(yàn)室間產(chǎn)生差別。為了客觀單調(diào)評(píng)論試劑性能，盡量減少這類人為差別對(duì)最后結(jié)果造成的影響，臨床試驗(yàn)開始前，各臨床機(jī)構(gòu)應(yīng)進(jìn)行判讀一致性試驗(yàn)及一致的質(zhì)量控制，一致操作步驟，保證相同的染色片在不一樣醫(yī)院的判讀結(jié)果保持一致。該預(yù)評(píng)估內(nèi)容，實(shí)現(xiàn)方法、結(jié)果等應(yīng)在臨床報(bào)告中表現(xiàn)。.其余：除上述要求外：（1）如該抗體試劑合用不一樣檢測(cè)系統(tǒng)，如配合使用的第二抗體、顯色劑等，則不一樣檢測(cè)系統(tǒng)（包含不一樣組合）均需在一種檢測(cè)系統(tǒng)知足臨床試驗(yàn)最低例數(shù)要求的前提下，增添的此外檢測(cè)系統(tǒng)應(yīng)再提交臨床樣本起碼各200例。（2）如抗體試劑包含濃縮型與即用型、手工操作與上機(jī)操作等不一樣劑型，在一種劑型知足臨床試驗(yàn)最低例數(shù)要求的前提下，另一種劑型，需提交臨床樣本起碼200例。以上（1）、2（）需在許多于3家臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)達(dá)成，且選擇的臨床樣本應(yīng)包含必定比率的陽(yáng)性樣本。8/10

表1:正常組織列表中樞神經(jīng)系統(tǒng)腦、大腦（灰質(zhì)與白質(zhì)神經(jīng)元、膠質(zhì)等）腦、小腦內(nèi)分泌系統(tǒng)腎上腺（皮質(zhì)與髓質(zhì)）卵巢胰腺（胰島與外分泌胰腺）甲狀旁腺垂體（腺垂體與神經(jīng)垂體）睪丸甲狀腺（濾泡上皮、濾泡旁細(xì)胞、膠體等）乳腺乳腺（乳腺小葉、乳腺管、肌上皮細(xì)胞等）