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第二講細_胞_工_程[教材知識問題化梳理]一、植物細胞工程1.植物組織培養(yǎng)理論基礎:植物細胞的全能性。操作過程:①②―→植物體外植體――→A――→B圖中①脫分化,②再分化,A表示愈傷組織,B表示胚狀體或叢芽2.植物體細胞雜交技術過程①為去除細胞壁獲取擁有活力的原生質(zhì)體,常用方法是酶解法,所用到的酶是纖維素酶和果膠酶。過程②是原生質(zhì)體的交融,人工引誘的物理方法包含離心、振動、電刺激等;化學方法一般用聚乙二醇作引誘劑。過程③是原生質(zhì)體交融后重生出細胞壁,這是原生質(zhì)體交融成功的標記。二、動物細胞培養(yǎng)1.觀點與操作流程2.培養(yǎng)條件無菌、無毒的環(huán)境。營養(yǎng):除糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素以外,還往常需加入血清等天然成分。(3)適合的溫度和pH:溫度為36.5℃±0.5℃,pH為7.2~7.4。(4)氣體環(huán)境:CO和O。O是細胞代謝所必要的,CO的主要作用是保持培養(yǎng)液的pH。2222三、體細胞核移植技術四、單克隆抗體制備過程:單克隆抗體的特色:特異性強、敏捷度高。[成效自評組合式設計]一、在小題集訓中洞悉命題視角1.理論上,每個正?;罴毎紦碛腥苄?。(√)2.植物的每個細胞在植物體內(nèi)和體外都能表現(xiàn)出細胞的全能性。(×)3.愈傷組織是外植體脫分化和再分化后形成的。(×)4.原生質(zhì)體交融的原理是細胞膜的流動性。(√)5.重生出細胞壁是原生質(zhì)體交融成功的標記。(√)6.傳代培養(yǎng)的細胞失掉接觸克制現(xiàn)象。(×)7.原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)都需要用胰蛋白酶辦理。(√)8.動物細胞核移植的受體細胞是卵細胞。(×)9.克隆動物的性狀與供體動物完整相同。(×)10.單克隆抗體擁有特異性強、敏捷度高的特色。(√)11.雜交瘤細胞既能無窮增殖,又能產(chǎn)生專一性抗體。(√)二、在回首教材圖表中加強學科能力據(jù)動物細胞培養(yǎng)過程回答以下問題:可否用胃蛋白酶辦理動物組織塊,使之分別成單個細胞?為何?答案:不可以夠,由于培養(yǎng)液pH為7.2~7.4,胃蛋白酶的最適pH為1.8左右。細胞獲取不死性是在原代培養(yǎng)過程中,仍是在傳代培養(yǎng)過程中?答案:傳代培養(yǎng)過程中。(3)冷凍保留的細胞為何要選10代之內(nèi)的培養(yǎng)細胞?答案:保持細胞正常的二倍體核型。植物組織培養(yǎng)與動物細胞培養(yǎng)的比較1.植物組織培養(yǎng)與動物細胞培養(yǎng)的異同項目植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)理論基礎植物細胞全能性細胞增殖種類固體或半固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基培葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維養(yǎng)成分水、礦質(zhì)元素、維生素、蔗糖、氨基酸、瓊脂生素、促生長因子、動物血清基等動物胚胎或出生不久的幼齡取材植物幼嫩部位或花藥等動物的器官或組織外植體(離體根、莖、葉等)動物胚胎或幼齡過程動物的組織器官新的細胞系或細胞株,不形成結(jié)果新的組織或植株個體,能夠表現(xiàn)全能性個體,不表現(xiàn)全能性①植株迅速生殖①蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn)②脫毒植株的培養(yǎng)②皮膚移植資料的培養(yǎng)目的③人工種子③檢測有毒物質(zhì)④生產(chǎn)藥物、殺蟲劑等④生理、病理、藥理學研究⑤轉(zhuǎn)基因植物的培養(yǎng)①兩技術手段培養(yǎng)過程中都進行有絲分裂,都是無性生殖,都可稱克隆,都不相同點波及減數(shù)分裂②均為無菌操作,需要適合的溫度、pH等條件2.有關觀點的辨析原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng):①原代培養(yǎng):可有兩種表述:a.細胞懸液第一次在瓶中培養(yǎng),沒有分瓶培養(yǎng)以前的細胞培養(yǎng);b.第1代細胞的培養(yǎng)與傳10代之內(nèi)的細胞培養(yǎng)統(tǒng)稱為原代培養(yǎng)。兩種表述沒有實質(zhì)差別。②傳代培養(yǎng):相同有兩種表述:a.細胞懸液培養(yǎng)一段時間后,分瓶再進行的細胞培養(yǎng);b.傳10代以后的細胞培養(yǎng),統(tǒng)稱為傳代培養(yǎng)。細胞株和細胞系:①細胞株:原代培養(yǎng)的細胞一般傳至10代左右會出現(xiàn)生長阻滯,衰老死亡,少量度過“危機”的細胞能傳50代左右,形成細胞株。細胞株的遺傳物質(zhì)并無發(fā)生改變。②細胞系:細胞株傳至50代此后,會出現(xiàn)第二次危機,少量度過第二次危機的細胞能夠無窮傳代下去,形成細胞系。細胞系的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變,帶有癌變細胞的特色。[例1]以下與細胞工程技術有關的表述中,不正確的選項是( ).A.植物體細胞雜交技術能夠戰(zhàn)勝慣例的遠緣雜交不親和阻礙B.動物細胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基成分相同C.動物細胞交融與植物原生質(zhì)體交融的基來源理相同D.植物組織培養(yǎng)技術的理論基礎是細胞的全能性[分析]植物體細胞雜交能夠把來自不一樣植物的細胞交融在一同,戰(zhàn)勝了自然狀態(tài)下植物間遠緣雜交不親和阻礙,交融后的細胞能培養(yǎng)成一個植物個體,表現(xiàn)了植物細胞全能性,細胞交融原理是膜的流動性,但植物細胞培養(yǎng)基除基本成格外還需要植物激素,動物細胞培養(yǎng)液還需要動物血清。[答案]B植物體細胞雜交與動物細胞交融植物體細胞雜交動物細胞交融原理細胞膜的流動性、細胞的全能性細胞膜的流動性細胞A、B去壁原生質(zhì)體A、B細胞A、B交融交融過程交融的原生質(zhì)體雜交細胞有絲分裂雜種細胞多個相同雜交細胞植物組織培養(yǎng)雜栽種株有關酶纖維素酶和果膠酶胰蛋白酶或膠原蛋白酶交融方物理法:離心、電激、振動;除物理法和化學法外還能夠用滅活法化學法:聚乙二醇等試劑引誘的病毒引誘結(jié)果雜栽種株雜交細胞打破了有性雜交方法的限制,使遠意義戰(zhàn)勝了遠緣雜交的不親和性,獲取雜栽種株緣雜交成為可能[例2](2013·廣東名校質(zhì)檢)下邊是“白菜-甘藍”雜栽種株培養(yǎng)過程表示圖。以下表達正確的選項是( )A.如將純種的白菜和甘藍的卵細胞分別制成原生質(zhì)體,按相同的方法操作也可獲取與圖示相同基因型的雜栽種株B.能夠經(jīng)過察看在0.3g/mL蔗糖溶液中能否發(fā)生質(zhì)壁分別來判斷白菜原生質(zhì)體的死活C.該培養(yǎng)過程中可能發(fā)生細胞分化、染色體變異、基因突變或基因重組D.植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基、培養(yǎng)目的不完整相同,但引誘細胞或原生質(zhì)體交融的方法完整相同[分析]A項用卵細胞雜交獲取的植株細胞的遺傳物質(zhì)是體細胞雜交的一半。B項白菜的原生質(zhì)體已經(jīng)去掉了細胞壁,不會發(fā)生質(zhì)壁分別。C項培養(yǎng)過程中可能發(fā)生細胞分化、染色體變異、基因突變或基因重組。D項植物組織培養(yǎng)是獲取植株或細胞產(chǎn)物,而動物細胞培養(yǎng)是獲取大批的細胞;細胞交融的方法也不完整相同,動物細胞交融可用滅活的病毒。[答案]C易誤點不可以正確掌握單克隆抗體的制備過程失誤種類知識理解類失誤[認知糾偏]1.單克隆抗體的制備過程2.兩次挑選的目的不一樣第一次挑選是將未交融的B淋巴細胞、骨髓瘤細胞以及BB交融、瘤瘤交融的細胞經(jīng)過選擇培養(yǎng)基裁減,挑選出B瘤交融的細胞。第二次挑選是將產(chǎn)生特定抗體的B瘤細胞經(jīng)過細胞培養(yǎng)用相應抗原檢測的方法挑選出來。由于從體內(nèi)取免疫過的B淋巴細胞時拿出好多種,形成的雜交瘤細胞有好多種,因此需挑選出產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞。[設誤角度]高考命題常從以下角度設置圈套給出單克隆抗體的制備過程,考察對有關過程的理解與掌握。聯(lián)合基因工程、細胞工程等知識,綜合考察單克隆抗體的制備方法。1.關于下邊制備單克隆抗體過程表示圖,不.正確的表達是( )A.①表示B淋巴細胞和骨髓瘤細胞均是從小鼠的脾臟中提取的B.④中的挑選是經(jīng)過抗原、抗體反響進行的C.②促使細胞交融的方法能夠利用聚乙二醇作介導D.⑤能夠無窮增殖分析:選A單克隆抗體是利用B淋巴(漿)細胞和小鼠骨髓瘤細胞交融獲取,交融方法能夠有化學方法如聚乙二醇,生物方法如滅活病毒;假如要挑選能夠經(jīng)過檢測抗原、抗體反應,假如有反響說明表達了抗體;交融細胞擁有雙親特色,即能無窮增殖又能產(chǎn)生單調(diào)抗體。骨髓瘤細胞是體外培養(yǎng)的。2.(2013·南京一模)以下方案中不可以制備出抗H1N1流感病毒單克隆抗體的是( )A.將H1N1流感病毒抗原的基因?qū)牍撬枇黾毎?,并使該基因表達B.將抗H1N1流感病毒抗

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