高中生物第1部分微生物的利用實(shí)驗(yàn)1大腸桿菌的培養(yǎng)和分離教案浙科版浙科版高二生物教案

【實(shí)驗(yàn)1大腸桿菌的培育和分別】之小船創(chuàng)作課標(biāo)解讀重點(diǎn)難點(diǎn)1.微生物實(shí)驗(yàn)的無菌操作。進(jìn)行大腸桿菌的擴(kuò)增，利用液體培育基進(jìn)行細(xì)菌培2.利用LB液體培育基進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)的操作。養(yǎng)。進(jìn)行大腸桿菌的分別，用固體平面培育基進(jìn)行細(xì)菌3.利用LB固體培育基分別大腸桿的劃線培育。菌。說明大腸桿菌培育的條件和實(shí)驗(yàn)原理。4.劃線分別法和涂布分別法。一、大腸桿菌1．大腸桿菌是革蘭氏陰性、兼性厭氧的腸道桿菌。2．在腸道中，大腸桿菌一般對人無害，但也有一些菌株能夠侵襲腸黏膜并產(chǎn)生毒素，任何大腸桿菌假如進(jìn)入人的泌尿系統(tǒng)，都會對人體產(chǎn)生危害。3．大腸桿菌是基因工程技術(shù)中被寬泛采納的工具。二、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1．本實(shí)驗(yàn)的內(nèi)容是將大腸桿菌擴(kuò)大培育和劃線分別。分別后，一個菌體便會形成一個菌落，這是除去污染雜菌的通用方法，也是用于挑選高表達(dá)量菌株的最簡易方法之一。2．本實(shí)驗(yàn)用LB液體培育基(通用的細(xì)菌培育基)擴(kuò)大培養(yǎng)大腸桿菌。培育后再在LB固體平面培育基上劃線進(jìn)行分離，隨后培育基上便會形成一個個獨(dú)自的菌落。三、細(xì)菌的培育和分別1．細(xì)菌以分裂的方式生殖，分裂速度很快，約20分鐘分裂一次。人們在培育細(xì)菌時，一般用接種環(huán)轉(zhuǎn)移帶菌的培養(yǎng)物。接種時，先將接種環(huán)在明火上燒紅后冷卻，再操作。2．細(xì)菌的分別劃線分別法：在液體培育基中，只需接種后培育8h，每毫升培育基中就有幾億個細(xì)菌。可用接種環(huán)蘸菌液在含有固體培育基的培育皿平板上劃線，在劃線過程中接種環(huán)上的菌液漸漸減少，所以，劃線到最后，可使細(xì)菌間的距離加大。在固體培育基培育10～20h后，可由一個細(xì)菌產(chǎn)生單菌落，菌落不會重疊。假如再將每個菌落分別接種至含有固體培育基的試管斜面上，在斜面上劃線，則每個斜面的菌群就是由一個細(xì)菌產(chǎn)生的后輩。這類方法也可用于分別細(xì)菌，將污染的雜菌除掉。接種環(huán)在取菌種前和劃線前都要灼燒、爾后都要冷卻、操作完成后又要灼燒的原由是什么？【提示】取菌種前灼燒接種環(huán)的目的是消滅接種環(huán)上的微生物；除第一次劃線外，其余劃線前都要灼燒接種環(huán)的目的是消滅接種環(huán)上殘留菌種；取菌種和劃線前都要求接種環(huán)冷卻后進(jìn)行，目的是防備高溫殺死菌種；最后灼燒接種環(huán)的目的是防備細(xì)菌污染環(huán)境和操作者。涂布分別法：先將培育的菌液稀釋，往常稀釋10－5～10－7倍，而后取0.1mL不一樣稀釋度的稀釋菌液加在培育皿的固體培育基上，用玻璃刮刀涂布在培育基平面長進(jìn)行培育，在合適的稀釋度下，可產(chǎn)生互相分開的菌落。往常每個培育皿有20個之內(nèi)的單菌落最為合適。將每個菌落分別接種在斜面上擴(kuò)增培育后，再做功能性實(shí)驗(yàn)。細(xì)菌的兩種分別法各有長處，都可采納。劃線分別法，方法簡單；涂布分別法，單菌落更易分開，但操作復(fù)雜些。四、滅菌操作1．各樣器皿一定是無菌的：實(shí)驗(yàn)器具用牛皮紙或報紙包好，全部容器都先封口，而后進(jìn)行高壓蒸汽滅菌(1kg/cm2壓力、121℃、15min)辦理，并在超凈臺上使用。注意：實(shí)驗(yàn)中所需棉花不可以用脫脂棉，由于脫脂棉易吸水。2．各樣培育基一定是無菌的。3．細(xì)菌轉(zhuǎn)移過程要防止雜菌污染和菌種外泄。注意：培育皿需倒置，防備冷凝后形成的水珠滴落在培養(yǎng)基上污染培育基，沖散菌落。五、大腸桿菌培育與分別的實(shí)驗(yàn)步驟1．在兩個250mL三角瓶中分別裝入50mLLB液體培養(yǎng)基和50mLLB固體培育基，加上封口膜。將培育皿包好，連同培育基一起滅菌15min。2．滅菌后待培育基冷卻至60℃時，封閉紫外燈，點(diǎn)燃酒精燈，并用酒精棉球擦抹桌面和實(shí)驗(yàn)者的手。在酒精燈火焰旁用右手持盛有固體培育基的三角瓶，左手拿培育皿，并將培育基倒入4個培育皿中，將培育皿置于水平地點(diǎn)上，待其凝結(jié)。為何要在酒精燈火焰旁進(jìn)行操作？【提示】酒精燈火焰旁約10cm的空間是一個無菌區(qū)，在酒精燈火焰旁操作能防備雜菌污染。3．?dāng)U大培育先將接種環(huán)在酒精燈火焰上燒紅，再深入到大腸桿菌斜面，使環(huán)冷卻后，取菌體，并將菌體放入三角瓶液體培育基中，封瓶后在37℃每分鐘200轉(zhuǎn)的搖床上振蕩培育12h。4．劃線分別用在酒精燈火焰上灼燒后的接種環(huán)深入到搖床上培育后的菌液中，而后在固體培育基的平板上連續(xù)劃線，接種環(huán)需蘸菌液1次，劃線后蓋好皿蓋，將培育皿倒置，在37℃，恒溫培育箱中培育12～24h后，可在劃線的尾端出現(xiàn)不連續(xù)的單個菌落，表示菌已被分別。在無菌操作下將單菌落用接種環(huán)拿出，再用劃線法接種在斜面上，37℃培育24h后，置于4℃冰箱中保留。微生物培育的基本條件培育基及其種類培育基：①觀點(diǎn)：人們依照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不一樣需求，配制出供其生長生殖的營養(yǎng)基質(zhì)，此即培育基。②作用：在供給主要營養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培育基還需要知足微生物生長對pH、特別營養(yǎng)物質(zhì)及O2的需求，如培育乳酸桿菌時需在培育基中增添維生素，培育霉菌時需將pH調(diào)至酸性，培育厭氧型微生物需賜予無氧條件等。培育基的種類區(qū)分標(biāo)準(zhǔn)培育基種類特色用途液體培育基不加凝結(jié)劑微生物的擴(kuò)大培育、工業(yè)生產(chǎn)半固體培育基察看微生物的運(yùn)動、分類判定物理性質(zhì)加凝結(jié)劑，如瓊脂微生物分別、判定、活菌計數(shù)、保固體培育基藏菌種培育基中加入某種化(如培育培育、分別出特定微生物學(xué)物質(zhì)，以克制不需酵母菌和霉菌，可在培育基中加入用途選擇培育基要的微生物的生長，青霉素；培育金黃色葡萄球菌，可促使所需要的微生物)的生長在培育基中加入高濃度食鹽依據(jù)微生物的代謝特鑒識不一樣種類的微生物，如可用伊用途鑒識培育基點(diǎn)，在培育基中加入紅—美藍(lán)培育基鑒識飲用水或乳某種指示劑或化學(xué)藥

制品中能否有大腸桿菌

(如有，菌品

落呈深紫色，并帶有金屬光彩

)無菌技術(shù)進(jìn)行微生物培育獲取純凈培育物的重點(diǎn)是防備雜菌污染，無菌技術(shù)即環(huán)繞著怎樣防止雜菌的污染睜開，主要包含以下幾個方面：對實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的穿著和手，進(jìn)行潔凈和消毒。將用于微生物培育的器皿、接種器具和培育基等器具進(jìn)行滅菌。為防止四周環(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰鄰近進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)操作時應(yīng)防止已經(jīng)滅菌辦理的資料器具與四周的物件相接觸。3．消毒和滅菌的比較觀點(diǎn)常用方法應(yīng)用的范圍煮沸消毒法：在100℃開水中煮一般物件使用較為平和的物沸5～6min理或化學(xué)方法，殺巴氏消毒法：70～75℃煮30min消死物體表面或內(nèi)部對于一些不耐高溫的液或在80℃煮15min毒的部分微生物(不體，如牛奶包含芽孢和孢子)如用酒精擦抹雙手、用氯化學(xué)藥劑消毒法氣消毒水源等滅使用激烈的理化因灼燒滅菌：酒精燈火焰接種工具的滅菌菌素殺死物體內(nèi)外所干熱滅菌：干熱滅菌箱內(nèi)160～玻璃器皿、金屬工具的滅有的微生物(包含170℃下滅菌1～2h菌芽孢和孢子)高壓蒸汽滅菌：121℃條件下，培育基及容器的滅菌滅菌15～30min注：消毒與滅菌的最大差別是芽孢和孢子可否存活某小組同學(xué)為了檢查湖水中細(xì)菌的污染狀況而進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)包含制備培育基、滅菌、接種及培育、菌落察看計數(shù)。請回答與此實(shí)驗(yàn)有關(guān)的問題。制備培育基：依據(jù)物理性質(zhì)的不一樣，能夠?qū)⑴嘤譃橐后w、半固體和固體培育基。對細(xì)菌進(jìn)行大批的擴(kuò)增，用________培育基進(jìn)行培育；對細(xì)菌進(jìn)行分別，用________培育基進(jìn)行培育。滅菌：在培育微生物時一定進(jìn)行無菌操作，包含各樣________都一定是無菌的。對它們進(jìn)行滅菌，往常用________法滅菌。接種及培育：接種經(jīng)常用的工具是________和玻璃三角刮刀。為了趕快察看到細(xì)菌培育的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，應(yīng)將接種了湖水樣品的平板置于________中培育，培育的溫度設(shè)定在37℃。要使該實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果靠譜，還應(yīng)當(dāng)同時在另一平板上接種________作為比較進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。菌落察看計數(shù)：培育20小時后，察看到平板上有形態(tài)和顏色不一樣的菌落，這說明湖水樣品中有________種細(xì)菌。一般說來，菌落總數(shù)越多，湖水遭到細(xì)菌污染的程度越________。選擇培育基是在培育基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以克制不需要的微生物的生長，促使所需要的微生物的生長。如果提升培育基中NaCl的濃度，能夠用于挑選耐________細(xì)菌?！舅悸伏c(diǎn)撥】(1)細(xì)菌擴(kuò)大培育用液體培育基，分別用固體培育基。(2)無菌操作包含全部的器皿要無菌，全部的培育基要無菌，接種過程要防備雜菌污染。實(shí)驗(yàn)室中常用高壓蒸汽滅菌法。(3)接種經(jīng)常用接種環(huán)，用恒溫培育箱保持溫度。在實(shí)驗(yàn)過程中，除實(shí)驗(yàn)變量之外的其余各變量應(yīng)適宜且同樣，以利于更好地實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?4)不一樣的菌落擁有各自不一樣的菌落特色(如硬度、顏色、透明度、圓滑度等。)(5)選擇培育基能夠?qū)⑺枰奈⑸飶幕煜奈⑸镏蟹謩e出來?！敬鸢浮?1)液體固體平面(2)器皿和培育基高壓蒸汽滅菌(3)接種環(huán)恒溫培育箱無菌水(4)多高(5)鹽(或NaCl)1．細(xì)菌培育過程中分別采納了高壓蒸汽、用酒精棉球擦試、火焰灼燒等幾種不一樣的辦理，這些方法挨次用于殺滅哪些部位的雜菌()A．接種環(huán)、手、培育基B．高壓鍋、手、接種環(huán)C．培育基、手、接種環(huán)D．接種環(huán)、手、高壓鍋【分析】本題考察對無菌技術(shù)的掌握。高壓蒸汽滅菌鍋是滅菌的一個設(shè)施，往常用于培育基的滅菌。用酒精擦抹雙手是消毒的一種方法?；鹧孀茻軌蚩焖偻耆販缇嫌糜谖⑸锝臃N工具的滅菌，如接種環(huán)。【答案】C大腸桿菌的培育和分別1.LB培育基的制備計算：依據(jù)LB培育基配方的比率，計算配制50mL的培育基時各樣成分的用量。(2)稱量：正確地稱取各樣成分。即：蛋白胨

0.5g、酵50mL(

LB體培育基，則再加

1g

瓊脂

)制備空白斜面：將LB液體培育基配好，加入瓊脂并加熱使之消融后，經(jīng)過玻璃漏斗加入試管中，每試管2mL，加棉塞并將試管捆在一起，上端加蓋一張牛皮紙，滅菌。滅菌后斜靠于平放的鉛筆上，冷卻后即成空白斜面培育基。2．進(jìn)行大腸桿菌培育與分別操作滅菌250mL三角瓶甲→50mLLB液體培育基mL三角瓶乙→50mLLB固體培育基還沒有凝結(jié)牛皮紙包好的培育皿置于滅菌鍋1kg壓力滅菌15min制備LB固體平面培育基——倒平板操作待培育基冷卻至60℃左右時，在酒精燈火焰鄰近倒平板。倒平板的詳細(xì)操作描繪以下：擴(kuò)大培育①左手持大腸桿菌斜面和有液體培育基的三角瓶，右手拿接種環(huán)并用無名指、小指夾住斜面的棉塞和三角瓶封口膜。②將接種環(huán)在火焰上燒紅，再深入到斜面，使其冷卻后取菌體。③將菌體放入三角瓶液體培育基中(將封口膜及斜面棉塞還原)。④三角瓶在37℃搖床振蕩培育12h。劃線分別①取種在酒精燈火焰上灼燒接種環(huán)，將上述培育后的菌液打開，接種環(huán)部分深入到菌液中取種。②平板劃線操作在LB固體培育基的平板上連續(xù)劃線(以以下圖所示)，劃線后蓋好培育皿。③培育將上述劃線操作后的培育皿倒置放至37℃恒溫培育箱中培育12～24h，可看到劃線的尾端出現(xiàn)不連續(xù)的單個菌落，表示菌已被分別。菌種純化與收藏在無菌操作下，將單菌落用接種環(huán)拿出，再用劃線法接種至斜面上，37℃培育24h后，4℃冰箱保留即可。劃線的目的是將齊集的菌種逐漸稀釋分別到培育基表面，以期在連續(xù)劃線后，能夠分別到由單個細(xì)胞生殖而來的子細(xì)胞集體(菌落)，進(jìn)而達(dá)到純化菌種的目的，為此，在劃線操作時，接種環(huán)只需在菌液中蘸取菌液一次，且作第二次及其此后的劃線操作時，須從前一次劃線的尾端劃線——如此可使菌體數(shù)目隨劃線次數(shù)的增添而減少，并逐漸分別，最終實(shí)此刻平板上獲取單菌落的目的。以下圖為“大腸桿菌的培育和分別”實(shí)驗(yàn)的基本流程：C.接種和培育A.滅菌→B.倒平板→液體培育基→D.劃線分別和培育→E.菌種保留請回答：滅菌常用________法，滅菌后，要待________________時才能翻開鍋蓋。倒平板和接種前要用________擦手。接種和劃線前使用________的方法對接種環(huán)滅菌。劃線分別時，接種環(huán)在菌液中蘸取________次。以下圖甲表示在平板培育基上的第一次和第二次劃線，請?jiān)谝覉D中畫出第三次劃線。劃線后在恒溫培育箱中培育時，培育皿須倒置，目的是__________________。實(shí)驗(yàn)達(dá)成后，接觸過細(xì)菌的器皿應(yīng)怎樣辦理？____________________。【思路點(diǎn)撥】本題考察大腸桿菌的培育和分別過程，詳細(xì)剖析以下：(1)滅菌是指對LB液體培育基和LB固體培育基進(jìn)行的滅菌。對培育基進(jìn)行的滅菌應(yīng)當(dāng)是用滅菌鍋進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。滅菌后，滅菌鍋內(nèi)的壓力與大氣壓同樣時，才能翻開滅菌鍋，不然會造成培育液濺出。在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作時，操作者的雙手要用酒精棉球擦拭消毒，接種環(huán)要用火焰炙烤滅菌。(3)劃線分別時，接種環(huán)在菌液中蘸取菌液1次而后連續(xù)劃線。在培育時，培育皿須倒置，目的是防備冷凝后形成的水滴落在培育基上污染培育基，沖散菌落。實(shí)驗(yàn)達(dá)成后，接觸過細(xì)菌的器皿應(yīng)滅菌辦理以防備污染。【答案】(1)高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)壓力與大氣壓同樣酒精棉球(酒精燈火焰上)灼燒(3)1(見右圖)防止水滴污染培育基接觸過細(xì)菌的器皿應(yīng)作滅菌辦理劃線分別操作①第一次劃線及每次劃線以前都需灼燒滅菌，劃線操作結(jié)束仍需灼燒接種環(huán)，每次灼燒的目的以下表：第一次灼燒每次劃線以前灼燒劃線結(jié)束灼燒殺死前一次劃線結(jié)束后，接種防止接種環(huán)上可能存

殺死接種環(huán)上殘留的菌種，目

環(huán)上殘留的菌種，使每次劃在的微生物污染培育

防止細(xì)菌污染環(huán)境和感染的

線的菌種來自前一次劃線末物

操作者端②灼燒接種環(huán)以后，要冷卻后才能伸入菌液，免得溫度太高殺死菌種。③劃線時最后一地區(qū)不要與第一地區(qū)相連。④劃線使勁要大小合適，防備使勁過大將培育基劃破。2．以下圖為“大腸桿菌的培育和分別”實(shí)驗(yàn)的基本流程，請回答：A.配制培→B.滅菌→C.擴(kuò)大培育養(yǎng)基液體培育基D.劃線分別和培育

E.菌→

固體培育基

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保留(1)A過程配制的是通用細(xì)菌培育基，稱為________培育基。配制時除了加入特定的營養(yǎng)物質(zhì)之外，還要加入必定量的氯化鈉，以保持________。對培育基酸堿度的調(diào)理，應(yīng)當(dāng)在B過程的________(填“前面”或“后邊”)。(2)D過程與C過程對比，培育基中增添的物質(zhì)是________。E過程所需的溫度是________。(3)D過程后，一個菌體便會形成一個________，這類分離方法是________________的通用方法，也是挑選特定菌株的最簡易方法之一。【答案】(1)LB浸透壓前面(2)瓊脂4℃(3)(單)菌落除去污染雜菌(純化菌種)1．以下有關(guān)倒平板操作錯誤的選項(xiàng)是()A．將滅過菌的培育皿放在火焰旁的桌面上B．使翻開的錐形瓶瓶口快速經(jīng)過分焰C．將培育皿翻開，培育皿蓋倒放在桌面上D．等候平板冷卻凝結(jié)后需要將平板倒過來擱置【分析】整個倒平板過程要防備外來雜菌的入侵，因此，滅過菌的培育皿放在火焰旁，翻開的錐形瓶瓶口快速通過分焰，培育皿翻開一條稍大于瓶口的空隙，不可以將培育皿蓋完整翻開，等候平板冷卻凝結(jié)后需要將平板倒過來擱置?！敬鸢浮緾2．無菌技術(shù)包含以下幾個方面的表達(dá)，此中錯誤的選項(xiàng)是()A．對培育操作的空間、操作者的穿著和手進(jìn)行滅菌B．對培育器皿、接種器具和培育基等進(jìn)行滅菌C．為防止四周環(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰鄰近進(jìn)行D．實(shí)驗(yàn)操作時應(yīng)防止已經(jīng)滅菌辦理的資料器具與四周物件相接觸【分析】滅菌是采納激烈的理化要素對用于微生物培養(yǎng)的培育皿、接種器具和培育基進(jìn)行辦理，使物體內(nèi)外全部微生物，包含芽孢和孢子都要被殺死；實(shí)驗(yàn)操作者的穿著和手以及操作空間只好進(jìn)行消毒?！敬鸢浮緼3．以下挨次表示倒平板、接種的地點(diǎn)，以及劃線法接種的路徑表示圖，此中錯誤的選項(xiàng)是()【分析】在劃線時，應(yīng)在第一區(qū)的劃線尾端開始往第二地區(qū)內(nèi)劃線，在第二區(qū)的劃線尾端開始往第三區(qū)劃線?！敬鸢浮緿4．對于大腸桿菌的培育和分別實(shí)驗(yàn)以下表達(dá)不正確的是()A．本實(shí)驗(yàn)的內(nèi)容是將大腸桿菌進(jìn)行擴(kuò)大培育和劃線分離B．本實(shí)驗(yàn)用LB液體培育基擴(kuò)大培育大腸桿菌，再在LB固體平面培育基上劃線進(jìn)行大腸桿菌的分別C．除劃線分別外，也可用涂布分別法分別大腸桿菌，兩種分別方法中劃線分別方法簡單且單菌落更易分開D．進(jìn)行培育以前對加入培育基的三角瓶、試管也要在121℃下滅菌15min【分析】劃線分別與涂布分別均可實(shí)現(xiàn)對大腸桿菌的分別，此中劃線分別法操作簡單，但單菌落相對不易分開，涂布分別法操作雖相對復(fù)雜，但單菌落更易分開。【答案】C5．微生物與人類關(guān)系親密。固然有些微生物能使動植物生病，但多半微生物對人類是有利的。請回答：培育基中含有蛋白胨、淀粉分別為細(xì)菌培育供給____________。對培育基進(jìn)行滅菌，應(yīng)當(dāng)采納的方法是____________。接種時往常采納________法。在制備牛肉膏蛋白胨固體培育基的倒平板操作時，平板冷凝后，要將平板倒置的原由是________________________________________________________________________________________________________________。微生物接種的方法好多，最常用的是平板劃線法和____________法。在用平板劃線法接種時，在操作的第一步以及每次劃線以前都要灼燒接種環(huán)的目的是____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。在劃線操作結(jié)束時，仍舊需要灼燒接種環(huán)嗎？為何？________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________?！敬鸢浮?1)氮源(碳源)、碳源高壓蒸汽滅菌平板劃線皿蓋上會凝有水珠，防備水珠落入培育皿造成污染，還可使培育基表面的水分更好地?fù)]發(fā)稀釋涂布平板第一步灼燒接種環(huán)是防備接種環(huán)上有其余微生物而污染培育基。每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死前一次接種時留下的菌種，使下一次劃線時接種環(huán)上的菌種直接來自前一次劃線的尾端，以便經(jīng)過多次劃線后，獲取單個的菌落劃線結(jié)束后仍要灼燒接種環(huán)，免得菌種對環(huán)境造成污染和感染操作者學(xué)業(yè)達(dá)標(biāo)測評(一)大腸桿菌的培育和分別1．要從多種細(xì)菌中分別某種細(xì)菌，培育基要用()A．固體培育基B．液體培育基C．加青霉素的培育基D．加入高濃度食鹽的培育基【分析】分別微生物應(yīng)使用固體培育基?！敬鸢浮緼2．涂布平板操作需要用到()A．接種環(huán)、滴管、酒精燈B．接種環(huán)、移液管、酒精燈C．涂布器、移液管、酒精燈D．涂布器、接種環(huán)、酒精燈【分析】涂布平板操作過程中不需要接種環(huán)。【答案】C3．采納干熱滅菌、灼燒滅菌、高壓蒸汽滅菌、紫外線照耀等幾種方法，可分別殺死哪些部位的雜菌()A．接種環(huán)、吸管、培育基、接種室B．吸管、接種環(huán)、培育基、接種箱C．培育基、接種環(huán)、吸管、接種箱D．培育皿、吸管、培育基、雙手【分析】干熱滅菌主要對玻璃器皿進(jìn)行滅菌，紫外線主要對接種室和接種箱進(jìn)行空氣和表面滅菌?！敬鸢浮緽4．以下操作錯誤的選項(xiàng)是()A．用酒精擦抹雙手B．用氯氣消毒水源C．實(shí)驗(yàn)室用紫外線進(jìn)行消毒D．玻璃器皿(吸管、培育皿)用酒精直接擦抹即可達(dá)到完全滅菌的目的【分析】玻璃器皿應(yīng)用干熱無菌箱在160～170℃加熱1～2h才能達(dá)到無菌目的?！敬鸢浮緿5．在涂布平板操作時錯誤的選項(xiàng)是()A．將涂布器在酒精燈火焰上灼燒，直到燒紅B．取少許菌液滴加在培育基表面C．將沾有少許酒精的涂布器在火焰上引燃待酒精燃盡后，冷卻8～10s再用D．涂布時可轉(zhuǎn)動培育皿，使涂布平均【分析】涂布平板所用涂布器是玻璃器皿，不可以在酒精燈火焰上灼燒，不然會變形，正確方法是沾取少許酒精，引燃。【答案】A6．利用涂布分別法純化的大腸桿菌，經(jīng)培育后發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上出現(xiàn)了多種菌落，不行能的原由是()A．培育基制備過程中被雜菌污染B．接種過程中，無菌操作不切合要求C．系列稀釋時，無菌操作不切合要求D．由大腸桿菌的種類不一樣造成的【分析】大腸桿菌培育基中出現(xiàn)了多種菌落，說明污染了雜菌，雜菌可能來自培育基，也可能是由于操作過程中無菌操作不切合要求?！敬鸢浮緿7．以下與大腸桿菌及其培育與分別的有關(guān)表達(dá)正確的是()A．大腸桿菌是革蘭氏陽性菌B．大腸桿菌的代謝種類是異養(yǎng)需氧型C．可用LB固體平面培育基擴(kuò)大培育大腸桿菌D．進(jìn)行平板劃線分別時，接種環(huán)只需蘸菌液一次【分析】大腸桿菌是革蘭氏陰性菌，其代謝種類為異養(yǎng)兼性厭氧型，擴(kuò)大培育大腸桿菌宜使用LB液體培育基，LB固體平面培育基可用于劃線分別，進(jìn)行劃線分別時，為達(dá)到分別目的，獲取單菌落，接種環(huán)只需蘸取菌液一次，故只有D選項(xiàng)所述正確?！敬鸢浮緿8．(2016·杭州檢測)請回答微生物培育的有關(guān)問題：人們依照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不一樣需要，配制出供其生長生殖的營養(yǎng)物質(zhì)稱培育基。培育基之所以有________、________和半固體培育