殺菌抑菌基本知識(shí)課件

殺菌抑菌基本知識(shí)課件第一頁(yè)，共二十六頁(yè)，2022年，8月28日一、名詞解釋1、抗菌劑——能夠在一定時(shí)間內(nèi)，使某些微生物（細(xì)菌、真菌、酵母菌、藻類及病毒等）的生長(zhǎng)或繁殖保持在必要水平以下的化學(xué)物質(zhì)?？咕鷦┦且活惥哂幸志蜌⒕阅艿男滦椭鷦?、殺菌——指殺滅物體中的致病菌，物體中還含有芽孢、嗜熱菌等非致病菌。3、抑菌——采用化學(xué)或物理方法抑制或妨礙細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖及其活性的過程。第二頁(yè)，共二十六頁(yè)，2022年，8月28日一、名詞解釋4、中和劑——在微生物殺滅試驗(yàn)中，用以消除試驗(yàn)微生物與消毒劑的混懸液中和微生物表面上殘留的消毒劑，使其失去對(duì)微生物抑制和殺滅作用的試劑。5、PBS——磷酸鹽緩沖液，0.03mol/L,pH=7.2。6、MIC——最小抑菌濃度。第三頁(yè)，共二十六頁(yè)，2022年，8月28日一、名詞解釋7、cfu——在活菌營(yíng)養(yǎng)計(jì)數(shù)時(shí)，由單個(gè)菌體或聚集成團(tuán)的多個(gè)菌體在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖所形成的集落，稱為菌落形成單位，以其表達(dá)活菌的數(shù)量。第四頁(yè)，共二十六頁(yè)，2022年，8月28日一、名詞解釋8、試驗(yàn)菌金黃色葡萄球菌（ATCC6538）細(xì)菌繁殖體中化膿性代表。第五頁(yè)，共二十六頁(yè)，2022年，8月28日一、名詞解釋大腸桿菌（8099或ATCC259922）細(xì)菌繁殖體中腸道菌的代表。第六頁(yè)，共二十六頁(yè)，2022年，8月28日一、名詞解釋白色念珠菌（ATCC10231）空氣中細(xì)菌的代表。第七頁(yè)，共二十六頁(yè)，2022年，8月28日一、名詞解釋銅綠假單胞菌（ATCC15442）醫(yī)院感染中最常分離的細(xì)菌繁殖體的代表。第八頁(yè)，共二十六頁(yè)，2022年，8月28日二、殺菌率試驗(yàn)1、制備試驗(yàn)菌懸液濃度為：用100μl滴于對(duì)照片上，回收菌落數(shù)為1×104～1×109cfu/片。2、制備染菌樣片取上述菌懸液，分別在每個(gè)被試樣片和對(duì)照樣片上滴加100μl，作用2min。第九頁(yè)，共二十六頁(yè)，2022年，8月28日二、殺菌率試驗(yàn)3、操作步驟分別將樣片投入含5ml相應(yīng)中和劑的試管內(nèi)，充分混勻，，作適當(dāng)稀釋，取其中2-3個(gè)稀釋度，，分別吸取0.5ml，只要兩個(gè)平皿中，用40-50℃的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(細(xì)菌)或沙氏瓊脂培養(yǎng)基(酵母菌)15ml作傾注，轉(zhuǎn)動(dòng)平皿，使其充分混勻，瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)平板，倒置培養(yǎng)。4、培養(yǎng)時(shí)間、溫度細(xì)菌：35℃±2℃，48小時(shí)酵母菌：37℃±2℃，72小時(shí)第十頁(yè)，共二十六頁(yè)，2022年，8月28日二、殺菌率試驗(yàn)5、計(jì)算公式

式中：X——?dú)⒕剩?A——對(duì)照樣片平均菌落數(shù)

B——被試樣片平均菌落數(shù)6、評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)殺菌率≥90%，產(chǎn)品有殺菌作用。。第十一頁(yè)，共二十六頁(yè)，2022年，8月28日三、抑菌率試驗(yàn)1、制備試驗(yàn)菌懸液濃度為：用100μl滴于對(duì)照片上，回收菌落數(shù)為1×104～1×109cfu/片。2、制備染菌樣片取上述菌懸液，分別在每個(gè)被試樣片和對(duì)照樣片上滴加100μl，作用20min。第十二頁(yè)，共二十六頁(yè)，2022年，8月28日三、抑菌率試驗(yàn)3、操作步驟分別將樣片投入含5mlPBS的試管內(nèi)，充分混勻，作適當(dāng)稀釋，取其中2-3個(gè)稀釋度，，分別吸取0.5ml，只要兩個(gè)平皿中，用40-50℃的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(細(xì)菌)或沙氏瓊脂培養(yǎng)基(酵母菌)15ml作傾注，轉(zhuǎn)動(dòng)平皿，使其充分混勻，瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)平板，倒置培養(yǎng)。4、培養(yǎng)時(shí)間、溫度細(xì)菌：35℃±2℃，48小時(shí)酵母菌：37℃±2℃，72小時(shí)第十三頁(yè)，共二十六頁(yè)，2022年，8月28日三、抑菌率試驗(yàn)5、計(jì)算公式

式中：X——抑菌率，%A——對(duì)照樣片平均菌落數(shù)

B——被試樣片平均菌落數(shù)6、評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)抑菌率≥50%-90%，產(chǎn)品有抑菌作用。抑菌率≥90%，產(chǎn)品有較強(qiáng)抑菌作用。第十四頁(yè)，共二十六頁(yè)，2022年，8月28日四、殺菌性能與抑菌性能的不同點(diǎn)1、含義不同

殺菌抑菌消毒劑對(duì)微生物的殺滅能力。

消毒劑抑制或妨礙細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖及活性的能力。

第十五頁(yè)，共二十六頁(yè)，2022年，8月28日四、殺菌性能與抑菌性能的不同點(diǎn)2、作用時(shí)間不同殺菌抑菌2min20min殺菌的作用時(shí)間可為2min、5min、10min、20min，相同條件下，作用時(shí)間越短，殺菌率越低，所以選擇最短的作用時(shí)間來檢測(cè)殺菌性能更具有代表性。

抑菌的作用時(shí)間可為2min、5min、10min、20min，相同條件下，作用時(shí)間越長(zhǎng)，抑菌率越低，所以選擇最長(zhǎng)的作用時(shí)間來檢測(cè)抑菌性能更具有代表性。

第十六頁(yè)，共二十六頁(yè)，2022年，8月28日四、殺菌性能與抑菌性能的不同點(diǎn)3、殘留消毒劑的去除方法不同殺菌抑菌中和劑法（化學(xué)中合法）稀釋法指在消毒劑與微生物作用到達(dá)規(guī)定時(shí)間的終點(diǎn)時(shí)，取樣加于適宜種類和濃度的中和劑中，將殘留消毒劑迅速中和，使其不再持續(xù)抑制或殺滅微生物的方法。

將經(jīng)消毒劑作用過的微生物樣本，用稀釋液（PBS）稀釋，降低殘留消毒劑濃度，以消除對(duì)微生物的抑制作用。第十七頁(yè)，共二十六頁(yè)，2022年，8月28日四、殺菌性能與抑菌性能的不同點(diǎn)4、評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)殺菌抑菌殺菌率≥90％，產(chǎn)品有殺菌作用。抑菌率≥50％～90％，產(chǎn)品有抑菌作用，抑菌率≥90％，產(chǎn)品有較強(qiáng)的抑菌作用。第十八頁(yè)，共二十六頁(yè)，2022年，8月28日五、抗（抑）菌試驗(yàn)1、目的測(cè)定抗（抑）菌產(chǎn)品對(duì)細(xì)菌和真菌的抗（抑）菌作用。常使用的方法有抑菌環(huán)試驗(yàn)、最小抑制濃度測(cè)定試驗(yàn)等等。第十九頁(yè)，共二十六頁(yè)，2022年，8月28日五、抗（抑）菌試驗(yàn)2、抑菌環(huán)試驗(yàn)

1）原理利用抑菌劑不斷溶解經(jīng)瓊脂擴(kuò)散形成不同濃度梯度，以顯示其抑菌作用。

第二十頁(yè)，共二十六頁(yè)，2022年，8月28日五、抗（抑）菌試驗(yàn)2）操作程序（1）制備抑菌片滴加實(shí)際使用濃度抑菌劑溶液的直徑為5mm,厚不超過4mm圓片。（2）制備陰性對(duì)照片不含抑菌成分的與實(shí)驗(yàn)組大小相同的樣片。（3）接種試驗(yàn)菌蘸取濃度為5×105～5×10-9cfu/ml試驗(yàn)菌懸液，在營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平板均勻涂抹。（4）抑菌樣片和對(duì)照片貼放（5）培養(yǎng)溫度：37℃±2℃，培養(yǎng)時(shí)間：16～18小時(shí)第二十一頁(yè)，共二十六頁(yè)，2022年，8月28日五、抗（抑）菌試驗(yàn)3）評(píng)價(jià)（1）抑菌作用的判斷

抑菌環(huán)直徑大于7mm者，判為有抑菌作用。抑菌環(huán)直徑小于或等于7mm者，判為無抑菌作用。（2）3次重復(fù)試驗(yàn)均有抑菌作用結(jié)果者，判為合格。（3）陰性對(duì)照組應(yīng)無抑菌環(huán)產(chǎn)生。否則試驗(yàn)無效。第二十二頁(yè)，共二十六頁(yè)，2022年，8月28日五、抗（抑）菌試驗(yàn)3、最小抑菌濃度（MIC）

1)原理采用瓊脂稀釋法將不同濃度的抑菌劑混合溶解在瓊脂培養(yǎng)基中，然后點(diǎn)種細(xì)菌，通過細(xì)菌的生長(zhǎng)與否，確定抗（抑）菌物質(zhì)抑制受試菌生長(zhǎng)的最低濃度，即最小抑菌濃度（MIC）第二十三頁(yè)，共二十六頁(yè)，2022年，8月28日五、抗（抑）菌試驗(yàn)2）操作程序（1）配制抗（抑）菌溶液（2）配制雙倍濃度培養(yǎng)基（3）配制含抗（抑）菌液培養(yǎng)基（4）取1μl～2μl（含菌量約為107cfu/ml）菌懸液點(diǎn)種于含抗（抑）菌液培養(yǎng)基的平皿（5）以同樣方法接種不含抗（抑）菌成分的瓊脂平板，作為陽(yáng)性對(duì)照。（6）培養(yǎng)溫度：35℃±