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文檔簡介
細(xì)菌的遺傳與變異第一頁,共六十二頁,2022年,8月28日1、遺傳VS變異(1)遺傳:生命體通過核酸的復(fù)制和分配使親代的性狀傳遞給子代,致使子代與親代的生物學(xué)性狀基本相同,且代代相傳,遺傳使細(xì)菌的性狀保持相對(duì)穩(wěn)定。
(2)變異:在一定條件下,子代與親代、子代相互之間,生物學(xué)性狀發(fā)生不同程度的穩(wěn)定性差異。第二頁,共六十二頁,2022年,8月28日
A、遺傳性變異(基因型變異)
——基因結(jié)構(gòu)的改變(基因或轉(zhuǎn)移與重組)引起的性狀變化,這為基因型變異,其可遺傳給子代(穩(wěn)定?)。B、非遺傳性變異(表型變異)
——一定環(huán)境條件的影響下發(fā)生的性狀變化,但基因結(jié)構(gòu)沒有改變,此為表型變異(遺傳?穩(wěn)定?);
——當(dāng)環(huán)境中的影響因素去除后,表型變異的性狀又可復(fù)原,且這種變異不能遺傳。第三頁,共六十二頁,2022年,8月28日一、細(xì)菌的變異現(xiàn)象形態(tài)、結(jié)構(gòu)的變異抗原性變異毒力變異菌落變異耐藥性變異第四頁,共六十二頁,2022年,8月28日
1、形態(tài)、結(jié)構(gòu)變異——細(xì)菌的大小和形態(tài)在不同的生長時(shí)期可不同,生長過程中受外界環(huán)境的影響也可發(fā)生變異。
如:鼠疫耶氏菌在陳舊培養(yǎng)物上細(xì)菌的多形態(tài)性、細(xì)菌L型?!?xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)也可發(fā)生變異(外環(huán)境?)
如:莢膜(肺炎鏈球菌)、芽胞(炭疽芽孢桿菌)、鞭毛(變形桿菌H-O變異)第五頁,共六十二頁,2022年,8月28日
A、3-6%食鹽
鼠疫桿菌────→多形態(tài)性(衰殘型)
瓊脂培基NaCl第六頁,共六十二頁,2022年,8月28日
B、青霉素、溶菌酶
正常形態(tài)細(xì)菌──────→
L型變異
抗體或補(bǔ)體
(部分或完全失去胞壁)X正?;魜y弧菌霍亂弧菌L型第七頁,共六十二頁,2022年,8月28日
C、特殊結(jié)構(gòu)的變異
42-43℃
×
炭疽桿菌
────→
失去形成芽胞能
10-20天
力、毒性降低
1%石炭酸
×
變形桿菌菌落
────→
單個(gè)菌落
(H型,遷徙生長)(O型,失去鞭毛)
鞭毛變異第八頁,共六十二頁,2022年,8月28日2、抗原性變異腸道桿菌多糖重復(fù)單位-----0抗原屬特異性鞭毛H抗原,種的特異性---1相---2相第九頁,共六十二頁,2022年,8月28日3、菌落變異:S—R變異——細(xì)菌菌落的光滑(smooth,S)型菌落表面光滑、濕潤、邊緣整齊;經(jīng)人工培養(yǎng)多次傳代后菌落表面邊緣變?yōu)闉榇植?、干燥、邊緣不整齊的粗糙型
(rough,R)的現(xiàn)象。——
這種變異現(xiàn)象對(duì)于從臨床標(biāo)本中分離致病菌時(shí),該如何挑選菌落具有實(shí)際指導(dǎo)意義(??)。第十頁,共六十二頁,2022年,8月28日
A、S—R變異常見于腸道桿菌,是由于失去LPS的特異性寡糖重復(fù)單位(?)而引起的。B、變異時(shí)不僅菌落的特征發(fā)生改變,且細(xì)菌的其它性狀(理化、抗原性、代謝酶活性、毒力)也同時(shí)發(fā)生了變化。C、一般情況下,S型菌的致病性強(qiáng)(?),但有少數(shù)細(xì)菌是R型菌的致病性強(qiáng)(?),如結(jié)核分枝桿菌、炭疽芽胞桿菌、鼠疫耶氏菌。第十一頁,共六十二頁,2022年,8月28日
第十二頁,共六十二頁,2022年,8月28日4、毒力變異——增強(qiáng)or減弱
膽汁、甘油、馬鈴薯培養(yǎng)基
A、牛型結(jié)核桿菌────────→卡介苗
13年、230代
β棒狀噬菌體B、白喉棒狀桿菌────→
白喉棒狀桿菌
(獲得白喉毒素基因)
第十三頁,共六十二頁,2022年,8月28日第十四頁,共六十二頁,2022年,8月28日5、耐藥性變異——當(dāng)今醫(yī)學(xué)的重要問題——細(xì)菌對(duì)某種抗菌藥物由敏感變成耐藥的變異——有些細(xì)菌還表現(xiàn)為同時(shí)耐受多種抗菌藥物,即多重耐藥性,甚至產(chǎn)生藥物依賴性。如:淋球菌(用第四代環(huán)絲氨酸)結(jié)核(耐異煙肼)痢疾菌(多重耐藥菌株,藥物依賴性菌株鏈霉素)第十五頁,共六十二頁,2022年,8月28日
——金黃色葡萄球菌耐青霉素的菌株已從1946
年的14%上升至目前的80%。A、金葡菌
—青霉素
B、耐藥金葡菌
—甲氧西林
耐藥金葡菌
—萬古霉素耐萬古霉素腸球菌以接合方式傳遞第十六頁,共六十二頁,2022年,8月28日第十七頁,共六十二頁,2022年,8月28日
常見致病菌的耐藥原因細(xì)菌藥物耐藥原因
金葡菌青霉素產(chǎn)生B-內(nèi)酰胺酶
甲氧西林合成PBP2(膜結(jié)合蛋白,降低藥物對(duì)膜的親和力)四環(huán)素藥物泵出腸球菌青霉素酶四環(huán)素核糖體改變綠膿桿菌青霉素酶或PBP改變氨基糖苷類酶或核糖體改變第十八頁,共六十二頁,2022年,8月28日抗菌藥物的作用靶位第十九頁,共六十二頁,2022年,8月28日
耐藥性細(xì)菌在世界各地的分布第二十頁,共六十二頁,2022年,8月28日二、細(xì)菌遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)——細(xì)菌的遺傳物質(zhì)是DNA,大多為單倍體基因組
——細(xì)菌的基因組是指染色體和染色體以外遺傳物質(zhì)所攜帶基因的總稱。
——染色體DNA
——染色體外的核酸成份
A、質(zhì)粒(多型)
B、轉(zhuǎn)座元件
C、整合子第二十一頁,共六十二頁,2022年,8月28日細(xì)菌基因位置編碼致病物質(zhì)幽門染色體侵襲力炭疽質(zhì)粒毒素霍亂染色體毒素白喉、肉毒噬菌體毒素第二十二頁,共六十二頁,2022年,8月28日——原核類細(xì)菌的染色體是幾乎裸露的環(huán)狀、雙螺旋DNA,不含組蛋白,無核膜
包圍,有核蛋白?!?xì)菌基因的結(jié)構(gòu)是連續(xù)的,無內(nèi)含子——細(xì)菌染色體DNA的復(fù)制在大腸埃希菌已證明是雙向半保留復(fù)制1、細(xì)菌染色體第二十三頁,共六十二頁,2022年,8月28日——基因,是具有一定生物學(xué)功能的核苷酸序列,如編碼結(jié)構(gòu)蛋白、酶等
功能?!虏u(毒力島):致病染色體上編碼與毒力或致病相關(guān)因子之(相關(guān))基因的(外源)DNA片段,是分子量較大的基因群?!鋬赡┒擞兄貜?fù)序列、插入序列或tRNA,——可水平傳遞(自身細(xì)胞內(nèi)、細(xì)胞間)第二十四頁,共六十二頁,2022年,8月28日2、質(zhì)粒質(zhì)粒(plasmid):是細(xì)菌染色體以外的遺傳物質(zhì),是環(huán)狀閉合的雙鏈DNA。據(jù)質(zhì)粒基因編碼的生物學(xué)性狀分為:致育質(zhì)粒(F質(zhì)粒):與“有性”繁殖有關(guān)耐藥性質(zhì)粒:編碼細(xì)菌對(duì)抗菌藥物或重金屬鹽類的耐藥性。是接合性耐藥質(zhì)粒(經(jīng)由性菌毛,如R質(zhì)粒),M大另一是非接合耐藥性質(zhì)粒(?,如噬菌體),M小一定條件下,接合性可以活化、轉(zhuǎn)導(dǎo)-傳遞非接合性的或宿主染色體第二十五頁,共六十二頁,2022年,8月28日
3)毒力質(zhì)?;騐i質(zhì)粒:
——編碼與該菌致病性有關(guān)的毒力因子
如:金黃色葡萄球菌——毒力質(zhì)?!砥兠撍卮竽c桿菌——pST——耐熱性腸毒素
——pLT——不耐熱性腸毒素
4)細(xì)菌素質(zhì)粒:編碼產(chǎn)生細(xì)菌素
——含Col質(zhì)粒的Eco.li.,編碼產(chǎn)生大腸菌素5)代謝質(zhì)粒:編碼產(chǎn)生相關(guān)的降解酶
如:沙門菌-發(fā)酵乳糖能力第二十六頁,共六十二頁,2022年,8月28日
——質(zhì)粒DNA的特征質(zhì)粒是一個(gè)完整的復(fù)制子,具有自我復(fù)制的能力
——據(jù)其復(fù)制的性質(zhì)分:
A、緊密型:拷貝數(shù)少,僅與染色體同步復(fù)制
B、松弛型:拷貝數(shù)多,與染色體復(fù)制無關(guān),可隨時(shí)復(fù)制質(zhì)粒DNA所編碼的基因產(chǎn)物賦予細(xì)菌某些性狀特征
——致育性、耐藥性、致病性及生化性狀第二十七頁,共六十二頁,2022年,8月28日
質(zhì)??勺孕衼G失與消除
——但其丟失后,細(xì)菌仍存活。質(zhì)粒的轉(zhuǎn)移性
——經(jīng)結(jié)合、轉(zhuǎn)導(dǎo)、轉(zhuǎn)化等方式在細(xì)菌與細(xì)菌、細(xì)菌與宿主細(xì)胞之間進(jìn)行轉(zhuǎn)移質(zhì)??煞譃橄嗳菪耘c不相容性
——兩種結(jié)構(gòu)(復(fù)制調(diào)控元件)相似密切相關(guān)的質(zhì)粒不能穩(wěn)定共存于一個(gè)宿主菌的現(xiàn)象稱為質(zhì)粒不相容性。第二十八頁,共六十二頁,2022年,8月28日3、轉(zhuǎn)座元件(轉(zhuǎn)座子)轉(zhuǎn)座子,是存在于細(xì)菌染色體或質(zhì)粒DNA分子上的一段特異性核苷酸序列片段,它能在DNA分子中移動(dòng)(轉(zhuǎn)位),不斷改變它們?cè)诨蚪M的位置,能從一個(gè)復(fù)制子單元轉(zhuǎn)移到另一個(gè)復(fù)制子單元中。A、一段特異性核苷酸,在自身轉(zhuǎn)座酶的作用下可移動(dòng)(分子內(nèi)/間)而變換位置;插入位點(diǎn)無需同源核酸片段,分保留性轉(zhuǎn)位、復(fù)制性轉(zhuǎn)位;B、其影響視轉(zhuǎn)位因子本身特征、被整合染色體或質(zhì)粒的整合后狀態(tài);第二十九頁,共六十二頁,2022年,8月28日
——轉(zhuǎn)座因子有三類A、插入序列(insertionsequence,IS)——三者中最小,<=2kb;——兩末端有反向重復(fù)序列(E),中間是ORF(轉(zhuǎn)座酶、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子);——不攜帶任何已知與插入功能無關(guān)的基因區(qū)域;——IS可獨(dú)立轉(zhuǎn)位,也可以是(大)轉(zhuǎn)座子(末端)的一部分;——往往是插入后與插入點(diǎn)附近的序列共同起作用,可能是原細(xì)胞正常代謝的調(diào)節(jié)開關(guān)之一;——自身游離時(shí)無獨(dú)立自主復(fù)制能力。第三十頁,共六十二頁,2022年,8月28日
B、轉(zhuǎn)座噬菌體或前噬菌體——是一些具有轉(zhuǎn)座功能的溶原性噬菌體,當(dāng)整合到細(xì)菌染色體上,能改變?nèi)茉约?xì)菌的某些生物學(xué)性狀(誘變噬菌體),如:白喉棒狀桿菌、肉毒梭菌等的外毒素——另,轉(zhuǎn)座噬菌體從細(xì)菌染色體分離脫落時(shí),可能連帶有細(xì)菌的DNA片段,故它還可能在遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移過程中起載體作用。第三十一頁,共六十二頁,2022年,8月28日
C、轉(zhuǎn)座子(transposon,Tn)
——一般>2kb,除攜帶與轉(zhuǎn)位有關(guān)的基因外,還攜帶耐藥性基因、抗金屬基因、毒素基因及其他結(jié)構(gòu)基因等;可隨機(jī)轉(zhuǎn)位,不能獨(dú)立復(fù)制?!赡苡许?/反向重復(fù)序列,當(dāng)Tn插入某一基因時(shí),一方面可引起插入基因失活產(chǎn)生基因突變;
另一方面可因帶入耐藥性基因而使細(xì)菌獲得耐藥性。第三十二頁,共六十二頁,2022年,8月28日Tn分為復(fù)合型、Tn3系、接合性轉(zhuǎn)座子復(fù)合型:IS—ORF—IS;Tn3系:R—ORF—R接合性:--ORF--,經(jīng)性菌毛的轉(zhuǎn)位轉(zhuǎn)座子可能與細(xì)菌的多重耐藥性有關(guān)。自身游離時(shí)也無獨(dú)立自主復(fù)制能力。第三十三頁,共六十二頁,2022年,8月28日
轉(zhuǎn)座子攜帶耐藥或毒素基因Tn1Tn2Tn3AP(氨芐青霉素)Tn4AP、SM(鏈霉素)、Su(磺胺)Tn5Km(卡那霉素)Tn6KmTn7TMP(甲氧芐氨嘧啶)、SMTn9Cm(氯霉素)Tn10Tc(四環(huán)素)tn551Em(紅霉素)Tn971EmTn1681大腸埃希菌(腸毒素基因)轉(zhuǎn)座子示例第三十四頁,共六十二頁,2022年,8月28日4、整合子整合子是一種運(yùn)動(dòng)性的DNA分子,具有獨(dú)特的結(jié)構(gòu)而可捕獲和整合外源性基因,使之轉(zhuǎn)變成為自身表達(dá)性基因的表達(dá)單位。定位于染色體、質(zhì)?;蜣D(zhuǎn)座子基本結(jié)構(gòu)兩端的保守末端中間的可變區(qū):基因盒(多為耐藥基因)5`保守末端含有功能元件整合酶基因,產(chǎn)物催化基因盒的整合與切除重組位點(diǎn)啟動(dòng)子第三十五頁,共六十二頁,2022年,8月28日
三、細(xì)菌變異的機(jī)制
——基因的突變與損傷后修復(fù)
——基因的轉(zhuǎn)移與重組第三十六頁,共六十二頁,2022年,8月28日突變(mutation):是細(xì)菌遺傳物質(zhì)的結(jié)構(gòu)發(fā)生突然、穩(wěn)定堿基對(duì)且可遺傳的變異,導(dǎo)致細(xì)菌某些性狀發(fā)生遺傳性的變異。DNA的損傷修復(fù):當(dāng)細(xì)菌DNA受到損傷單鏈時(shí),細(xì)胞會(huì)用有效的DNA修復(fù)系統(tǒng)進(jìn)行修復(fù),以保證遺傳的穩(wěn)定性,維持細(xì)胞的存活,并使損傷降為最小。(一).基因的突變與損傷后修復(fù)第三十七頁,共六十二頁,2022年,8月28日——基因突變規(guī)律:自發(fā)性、獨(dú)立性、稀少性:突變率低10-10-10-6/代遺傳性、不對(duì)應(yīng)性:突變性狀優(yōu)勢(shì)存活——突變?cè)蜃匀煌蛔兣c選擇:突變是隨機(jī)的,不定向的,但可
人為篩選或以理化誘導(dǎo),提高突變率??赡嫘裕?/p>
恢復(fù)突變——抑制突變(基因內(nèi)//外)第三十八頁,共六十二頁,2022年,8月28日彷徨試驗(yàn)(fluctuationtest)
選擇第三十九頁,共六十二頁,2022年,8月28日Themethodofaserialdilutionsforviablecounting第四十頁,共六十二頁,2022年,8月28日影印試驗(yàn)(replicaplating)
選擇第四十一頁,共六十二頁,2022年,8月28日——基因突變的機(jī)制1、自發(fā)突變機(jī)制(1)低劑量誘變因素的長期綜合效應(yīng)(2)堿基結(jié)構(gòu)的變化
——互變異構(gòu)效應(yīng)
——5-甲基胞嘧啶自發(fā)脫氨作用(3)環(huán)出效應(yīng)頸環(huán)跳躍第四十二頁,共六十二頁,2022年,8月28日2、人工誘變機(jī)制(1)堿基對(duì)置換:
轉(zhuǎn)換——嘌呤間、嘧啶間顛換——嘌呤與嘧啶間(2)移碼突變(3)缺失或插入突變(4)紫外線的誘變機(jī)制
——骨架斷裂、嘧啶水解、胸嘧啶二聚體第四十三頁,共六十二頁,2022年,8月28日——DNA的損傷后修復(fù)1、光修復(fù):
紫外誘變或殺傷——可見光能+光復(fù)活酶2、切除修復(fù)
UvrC——兩切口(單鏈)——合成——連接3、重組修復(fù)A、跳躍復(fù)制——缺口——重組Pr.——借用完整母鏈片斷——連接——修補(bǔ)缺失母鏈B、突變母鏈仍以切除修復(fù)4、SOS修復(fù)——傾向差錯(cuò)的修復(fù)
——DNA大范圍損傷的應(yīng)急反應(yīng)第四十四頁,共六十二頁,2022年,8月28日基因轉(zhuǎn)移(genetransfer):外源性的遺傳物質(zhì)由供體菌進(jìn)入某受體菌細(xì)胞內(nèi)的過程?;蛑亟M(recombination):轉(zhuǎn)移的基因與受體菌DNA整合在一起,使受體菌獲得供體菌某些特性。外源性遺傳物質(zhì):供體菌染色體DNA,質(zhì)粒DNA及噬菌體基因等。細(xì)菌的基因轉(zhuǎn)移和重組方式:轉(zhuǎn)化、接合、轉(zhuǎn)導(dǎo)、溶原性轉(zhuǎn)換、細(xì)胞融合。(二).基因的轉(zhuǎn)移與重組第四十五頁,共六十二頁,2022年,8月28日1.轉(zhuǎn)化(transformation)轉(zhuǎn)化是供體菌裂解游離的DNA片段轉(zhuǎn)入某受體菌細(xì)胞內(nèi)的過程——自然、人工。發(fā)生事件:宿主菌處于感受態(tài)(解鏈期)自然發(fā)生時(shí)大多是導(dǎo)入一條鏈,同源重組生成異源雙鏈;人工時(shí)大多是超螺旋雙鏈,不一定發(fā)生同源重組(游離)影響因素供受體細(xì)胞之核酸的同源性,受體菌的生理狀態(tài)(感受態(tài)),帶正電荷(+)外圍離子氛(強(qiáng)度):Ca2+
、Mg2+、cAMP第四十六頁,共六十二頁,2022年,8月28日第四十七頁,共六十二頁,2022年,8月28日第四十八頁,共六十二頁,2022年,8月28日2.接合(conjugation)接合:是細(xì)菌通過性菌毛相互連接溝通,將遺傳物質(zhì)(主要是質(zhì)粒一條DNA)從供體菌轉(zhuǎn)移給受體菌。能通過結(jié)合方式轉(zhuǎn)移的質(zhì)粒稱為接合性質(zhì)粒,不能通過性菌毛在細(xì)菌間轉(zhuǎn)移的質(zhì)粒為非接合性質(zhì)粒。第四十九頁,共六十二頁,2022年,8月28日F質(zhì)粒:自orit5`切割單鏈并傳遞該單鏈第五十頁,共六十二頁,2022年,8月28日高頻重組菌(Hfr)——一小部分F質(zhì)??烧先胧荏w菌染色體DNA而隨同復(fù)制,此菌即高頻重組菌(Hfr),但該細(xì)菌可高效轉(zhuǎn)移其染色體上的基因?!狥質(zhì)粒整合入受體菌染色體DNA的末端,對(duì)基因轉(zhuǎn)移起發(fā)動(dòng)功效?!狥質(zhì)粒可從Hfr的染色體上脫離而終止其Hfr狀態(tài),同時(shí)F質(zhì)粒可帶下原Hfr染色體上的的幾個(gè)基因,形成新的質(zhì)?!狥’。第五十一頁,共六十二頁,2022年,8月28日第五十二頁,共六十二頁,2022年,8月28日第五十三頁,共六十二頁,2022年,8月28日第五十四頁,共六十二頁,2022年,8月28日細(xì)菌的耐藥性與耐藥性的基因突變及R質(zhì)粒的接合轉(zhuǎn)移等有關(guān)。日本首先分離到抗多種藥物的宋內(nèi)志賀菌多重耐藥株,多重耐藥性很難用基因突變解釋。健康人中大腸埃希菌30%~50%有R質(zhì)粒,而致病性大腸埃希菌90%有R質(zhì)粒。
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