GMP質量體系硫酸卡那霉素滴眼液中間產品檢驗操作規(guī)程

目的：為檢驗硫酸卡那霉素滴眼液中間產品規(guī)定一個標準的程序，以便獲得準確的實驗數據。范圍：適用于硫酸卡那霉素滴眼液中間產品的檢驗。職責：檢驗員、檢驗室主任對本規(guī)程實施負責。規(guī)程：1、性狀:本品為無色澄明液體。2鑒別：2.1試劑與儀器2.1.1純化水2.1.20.2%蒽酮2.1.3硫酸溶液2.1.4卡那霉素標準品2.1.5硅膠G薄層板2.1.6氯化鋇試液2.1.7鹽酸2.1.8硝酸2.1.9醋酸鉛試液2.1.10醋酸銨試液2.1.11氫氧化鈉溶液2.1.12電子天平(萬分之一克)2.1.13層析缸2.1.14紫外光燈2.1.15微量進樣器(50ul)2.1.16燒杯、量筒2.1.17容量瓶2.1.18單標移液管2.1.195.5%磷酸二氫鉀溶液一乙醇(7:30)2.1.20茚三酮2.1.210.16%氯化亞錫溶液2.1.22乙醇2.2項目與步驟2.2.1顯色鑒別：:①取本品約1ml，加0.2%蒽酮的硫酸溶液4ml,在水浴中加熱15分鐘，冷卻，即顯藍紫色。2.2.2薄層色譜法的鑒別：精密量取本品1.2ml，與卡那霉素標準品50mg，分別置10ml容量瓶中，加水溶解稀釋至刻度，搖勻，按薄層色譜法(SOP-QC-304-00)檢驗，分別吸取上述兩種溶液各2ul，分別點于同一薄層板上，以5.5%磷酸二氫鉀溶液一乙醇(7:30)為展開劑，在20-25℃展開后，晾干，噴以顯色液，揮干，在105℃加熱15分鐘，出現紫紅色斑點，供試品溶液主斑點所顯斑點顏色與對照溶液的主斑點比較，不得更深。2.2.3硫酸鹽的鑒別：1)取本品溶液置試管中，加氯比鋇試液，即生成白色沉淀，分離，沉淀在鹽酸或硝酸中均不溶解為符合規(guī)定。2)取本品水溶液置試管中，加醋酸鉛試液，即生成白色沉淀，分離，沉淀在醋酸銨試液或氫氧化鈉試液中溶解為符合規(guī)定。3)取本品水溶液置試管中，加鹽酸，不生成白色沉淀為符合規(guī)定。3檢查：3.1儀器3.1.1PHS-3C精密PH計3.1.2注射器、針頭3.1.3燒杯3.1.4單標移液管3.1.5澄明度檢測儀3.2項目與步驟3.2.1酸度：取本品約50m，置100ml燒杯中，按PH值測定法(SOP-QC-312-00)檢測，PH值為6.0-7.0為符合規(guī)定。3.2.2裝量：取本品5支，按最低裝量檢查法(SOP-QC-332-00)檢驗，每個容器內容物裝量，并求出平均裝量，應符合規(guī)定；如有1個容器裝量不符合規(guī)定，測另取5支復試，應全部符合規(guī)定。3.2.3澄明度：照澄明度檢查細則和判斷標準(SOP-QC-329-00)檢查，應符合規(guī)定。3.2.5溶液顏色檢查法：取本品5ml，置于25ml的納氏比色管中，加水稀釋至10ml；另取規(guī)定色調和色號的標準比色液10ml置于納氏比色管中，兩管同置白色背景上，自上向下透視或同置白色背景前，平視觀察，供試品管呈現的顏色與對照管比較，不得更深為符合規(guī)定。含量測定：精密量取本品5ml，置25ml容量瓶中，用滅菌水稀釋至刻度搖勻。照抗生素微生物檢定法(SOP-QC-339-00)操作。4.1試劑與儀器4.1.1抗生素檢定培養(yǎng)基I(7.8-8.0)4.1.2磷酸鹽緩沖液(PH7.8)4.1.3枯草芽孢桿菌懸液4.1.4刻度移液管4.1.5容量瓶(50ml,10ml)4.16滅菌刻度吸管4.1.7雙碟4.1.8陶瓦蓋.4.1.9鋼管放置器4.1.10電熱隔水培養(yǎng)箱4.1.11稱一瓶4.1.12CHB-1抗生素效價測量儀4.1.13電子天平(萬分之一克)4.1.14超凈工作臺4.1.15酒精燈4.1.16三角燒瓶(100ml,150ml)4.1.17量筒4.1.18鑷子4.1.19卡那霉素標準品4.1.20按種棒5.2檢驗項目與步驟5.2.1培養(yǎng)基的制備:稱取抗生素檢定培養(yǎng)基I(PH7.8-8.0)25g，加1L蒸餾水，加熱溶解，分裝121℃高壓滅菌30分鐘。5.2.2磷酸鹽緩沖液(PH7.8)制備：稱取磷酸氫二鉀5.59g與磷酸二氫鉀0.41g，加水使成1000ml，濾過，在115℃滅菌30分鐘，備用。5.2.3枯草芽孢桿菌懸液的制備：取枯草芽孢桿菌的營養(yǎng)瓊脂斜面培養(yǎng)物，接種于盛有營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，在35℃-37℃培養(yǎng)7日，用滅菌水將芽孢洗下，在65℃加熱30分鐘，備用。5.2.4標準品溶液制備：5.2.4.1將標準品從冰箱取出，使與室溫平衡，準確稱取卡那霉素對照品約65mg，置50ml容量瓶中，用滅菌水稀釋至刻度，精密吸取10ml置250ml容量瓶中，用磷酸鹽緩沖液（PH7.8）稀釋至刻度，備用。5.2.4.2高劑量標準溶液的制備：精密吸出5.2.4.1制備的標準溶液5ml，置50ml容量瓶中，用磷酸鹽緩沖液(PH7.8)稀釋到刻度，備用。5.2.4.3低劑量標準液的制備：精密吸出5.2.4.1制備的標準溶液5ml，置100ml容量瓶中，用磷酸鹽緩沖液(PH7.8)稀釋至刻度，備用。5.2.5樣品溶液的制備：5.2.5.1取樣品10支混合，精密吸樣品5ml，置25ml容量瓶中，用滅菌水稀釋至刻度，精密吸取10ml置250ml容量瓶中，用磷酸鹽緩沖液(PH7.8)稀釋至刻度，備用。5.2.5.2高劑量樣品溶液的制備：精密吸取5.2.5.1制備的樣品溶液5ml，置50ml容量瓶中，用磷酸鹽緩沖液(PH7.8)稀釋至刻度，備用。5.2.5.3低劑量樣品溶液的制備：精密吸取5.2.5.1制備的樣品溶液5ml，置100ml容量瓶中，用磷酸鹽緩沖液(PH7.8)稀釋至刻度，備用。5.3.6雙碟的制備：按抗生素微生物檢定法(SOP-QC-339-00)操作。5.3.7小鋼管的放置：按抗生素微生物檢定法(SOP-QC-339-00)操作。5.3.8滴碟、培養(yǎng)與測量：抗生素微生物檢定法(SOP-QC-339-00)操作。6記錄與計算：用電腦測試，計算、統(tǒng)計分析的打印紙附于記錄后。本品含硫酸卡那霉素按卡那霉素計算為標示量的90.0%-110.0%。PT=P×按下式計算卡那霉素的最終效價：PT為樣品的真實效