黃草烏化學(xué)成分與環(huán)境相關(guān)性研究課件

黃草烏化學(xué)成分與環(huán)境相關(guān)性研究答辯人：汪麗婭導(dǎo)師：王永炎教授二零零五年五月碩士論文答辯CORRELATIONANALYSISFORCHEMICALCOMPONENTSOFACONITUMVILMORINIANUMKOM.WITHENVIRONMENTALFACTORS報(bào)告提綱一、選題背景與研究目標(biāo)二、黃草烏原藥材與土壤無(wú)機(jī)元素相關(guān)性分析三、黃草烏生物堿指紋圖譜研究四、黃草烏化學(xué)成分與氣候、土壤生態(tài)因子的關(guān)系研究五、討論碩士論文答辯選題背景與研究目標(biāo)生態(tài)環(huán)境日益惡化和藥用資源的過(guò)度開(kāi)發(fā)，許多野生中藥材資源已經(jīng)不能滿(mǎn)足需求。人工種植中藥材由于來(lái)源復(fù)雜、生長(zhǎng)環(huán)境差異大，采收加工不規(guī)范等原因?qū)е滤幉馁|(zhì)量極不穩(wěn)定。為此，國(guó)家從2002年開(kāi)始進(jìn)行中藥材生產(chǎn)的規(guī)范化管理（簡(jiǎn)稱(chēng)GAP）。選題背景碩士論文答辯黃草烏是云南民間常用藥材，同時(shí)也是一些中成藥的主要原料。對(duì)黃草烏野外生態(tài)資源與生態(tài)環(huán)境方面的調(diào)查發(fā)現(xiàn)：目前黃草烏野生資源退化嚴(yán)重，品種混亂，黃草烏GAP種植缺乏基礎(chǔ)背景資料和理論指導(dǎo)，人工種植的黃草烏質(zhì)量不穩(wěn)定。選題背景選題背景與研究目標(biāo)研究目標(biāo)分析黃草烏化學(xué)成分累積的特點(diǎn)研究黃草烏化學(xué)成分累積與環(huán)境因子間的相關(guān)關(guān)系探討影響黃草烏化學(xué)成分累積的主導(dǎo)環(huán)境因子碩士論文答辯為黃草烏人工標(biāo)準(zhǔn)化種植提供理論依據(jù)研究技術(shù)路線黃草烏野外取樣指紋圖譜分析無(wú)機(jī)元素分析土壤樣品黃草烏資源、生態(tài)環(huán)境調(diào)查與樣品采集采樣點(diǎn)氣候數(shù)據(jù)ICPHPLCRA黃草烏無(wú)機(jī)元素的富集特征不同產(chǎn)地與季節(jié)黃草烏指紋圖譜特征GRA影響黃草烏生物堿累積的主導(dǎo)環(huán)境因子排序評(píng)價(jià)與矯正碩士論文答辯結(jié)果2黃草烏原藥材與土壤的無(wú)機(jī)元素相關(guān)性分析

黃草烏藥材原藥材與土壤間無(wú)機(jī)元素相關(guān)性分析的結(jié)果顯示，二者并無(wú)明顯相關(guān)性。說(shuō)明黃草烏主要通過(guò)選擇性吸收調(diào)控藥材中無(wú)機(jī)元素的含量，這與黃草烏遺傳特性有關(guān).黃草烏原藥材及其土壤無(wú)機(jī)元素相關(guān)性研究

碩士論文答辯結(jié)果3黃草烏原藥材無(wú)機(jī)元素富集系數(shù)

黃草烏原藥材無(wú)機(jī)元素富集系數(shù)的分析結(jié)果顯示：黃草烏對(duì)鈣、鉛、磷和砷的吸收富集作用明顯。黃草烏原藥材及其土壤無(wú)機(jī)元素相關(guān)性研究碩士論文答辯滇烏堿（Ⅰ）（yunaconitine）

黃草烏堿甲（Ⅱ）（vilmorrianineA）

黃草烏堿丙(Ⅲ)（vilmorrianineC）

黃草烏對(duì)砷的富集作用也比較明顯,而砷是形成黃草烏中的化學(xué)成分滇烏堿（Ⅰ）（yunaconitine）、黃草烏堿甲（Ⅱ）（vilmorrianineA）、黃草烏堿丙(Ⅲ)（vilmorrianineC）結(jié)構(gòu)中的必要元素。砷直接參與了上述生物堿的形成。不能孤立的依據(jù)某種無(wú)機(jī)元素的含量高低評(píng)價(jià)藥材中該元素的含量，而應(yīng)分析元素間的相互作用，更多的考察無(wú)機(jī)元素的存在形態(tài)及其作用而不僅僅局限于其含量的多少，單純以現(xiàn)行的環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)作為藥材質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)具有一定的局限性。黃草烏原藥材及其土壤無(wú)機(jī)元素相關(guān)性研究碩士論文答辯黃草烏生物堿高效液相指紋圖譜研究方法的建立藥材提取方法:方法一：堿性乙醚（pH10-11）超聲30min過(guò)濾，旋干甲醇溶解定容至10ml方法二：堿性甲醇（pH10-11）超聲30min過(guò)濾，旋干甲醇溶解定容至10ml方法三：甲醇超聲30min過(guò)濾，旋干甲醇溶解定容至10ml方法四：乙醚超聲30min過(guò)濾，旋干，水溶解過(guò)分離小柱，去除水溶性部分，再用甲醇沖洗分離小柱，溶出脂溶性部分，回收，用甲醇定容至10ml。方法五：甲醇超聲30min過(guò)濾，旋干，水溶解過(guò)分離小柱，去除水溶性部分，再用甲醇沖洗分離小柱，溶出脂溶性部分，回收，用甲醇定容至10ml。色譜條件一：色譜柱一：χTerraRP18柱(3.9ⅹ150mm,5μ)流動(dòng)相：甲醇：0.1%三乙胺流速：1.0ml/min，柱溫：30℃，檢測(cè)波長(zhǎng)：267nm色譜條件二：色譜柱二：μBondapakNH2125?(3.9ⅹ300mm,10μ)流動(dòng)相：乙腈：磷酸三乙胺溶液(0.025mol/L磷酸：0.1%三乙胺(3:1))流速：1.0ml/min，柱溫：30℃，檢測(cè)波長(zhǎng)：267nm色譜條件三：色譜柱三：ZORBAXSB-C18柱(4.6ⅹ250mm,5μ)流動(dòng)相：乙腈：磷酸三乙胺溶液(0.025mol/L磷酸：0.1%三乙胺(3:1))流速：1.0ml/min，柱溫：30℃，檢測(cè)波長(zhǎng)：267nm碩士論文答辯方法一方法二方法三方法四方法五方法六方法七方法八黃草烏生物堿高效液相指紋圖譜研究方法的建立方法九方法十黃草烏生物堿高效液相指紋圖譜研究方法的建立同一地區(qū)不同季節(jié)黃草烏生物堿指紋圖譜的比較XP2-WD(7HJ)XXP2-WD(8HJ)2-WD(8HJ)XP2-WD(9HJ)XP2-WD(10HJ)XP2-WD(11HJ)附圖1.17-11月武定地區(qū)黃草烏生物堿指紋圖譜

不同產(chǎn)地、不同季節(jié)黃草烏生物堿指紋圖譜特征研究碩士論文答辯XP2-FZS(7HJ)XP2-FZS(8HJ)XP2-FZS(9HJ)XP2-FZS(10HJ)XP2-FZS(11HJ)附圖1.27-11月個(gè)舊風(fēng)箏山地區(qū)黃草烏生物堿指紋圖譜

碩士論文答辯同一地區(qū)不同季節(jié)黃草烏生物堿指紋圖譜的比較XP2-DMS(7HJ)XP2-DMS(8HJ)XP2-DMS(9HJ)XP2-DMS(10HJ)XP2-DMS(11HJ)附圖1.37-11月個(gè)舊對(duì)門(mén)山地區(qū)黃草烏生物堿指紋圖譜

碩士論文答辯同一地區(qū)不同季節(jié)黃草烏生物堿指紋圖譜的比較附圖1.57-11月華寧岔納地區(qū)黃草烏生物堿指紋圖譜

XP2-CN(7HJ)XP2-CN(8HJ)XP2-CN(9HJ)XP2-CN(10HJ)XP2-CN(11HJ)碩士論文答辯同一地區(qū)不同季節(jié)黃草烏生物堿指紋圖譜的比較

11月成熟期，黃草烏生物堿指紋圖譜出峰最多，生物堿各組分的相對(duì)峰面積最大。9～11月是黃草烏生物堿的迅速累積期。11月成熟期，黃草烏生物堿總量最高，是采收的最佳季節(jié)。同一地區(qū)不同季節(jié)黃草烏生物堿指紋圖譜的比較結(jié)論碩士論文答辯不同產(chǎn)地相同季節(jié)黃草烏生物堿指紋圖譜比較附圖2.17月武定、華寧岔納、個(gè)舊石門(mén)坎、個(gè)舊對(duì)門(mén)山、個(gè)舊風(fēng)箏山五產(chǎn)地黃草烏生物堿指紋圖譜

XP2-WD(7HJ)XP2-CN(7HJ)XP2-SMK(7HJ)XP2-DMS(7HJ)XP2-FZS(7HJ)碩士論文答辯附圖2.39月武定、華寧岔納、個(gè)舊石門(mén)坎、個(gè)舊對(duì)門(mén)山、個(gè)舊風(fēng)箏山五產(chǎn)地黃草烏生物堿指紋圖譜

XP2-WD(9HJ)XP2-CN(9HJ)XP2-SMK(9HJ)XP2-DMS(9HJ)XP2-FZS(9HJ)不同產(chǎn)地相同季節(jié)黃草烏生物堿指紋圖譜比較碩士論文答辯附圖2.410月武定、華寧岔納、個(gè)舊石門(mén)坎、個(gè)舊對(duì)門(mén)山、個(gè)舊風(fēng)箏山五產(chǎn)地黃草烏生物堿指紋圖譜

XP2-WD(10HJ)XP2-CN(10HJ)XP2-SMK(10HJ)XP2-DMS(10HJ)XP2-FZS(10HJ)不同產(chǎn)地相同季節(jié)黃草烏生物堿指紋圖譜比較碩士論文答辯不同產(chǎn)地黃草烏生物堿各組分相關(guān)性分析結(jié)果碩士論文答辯不同產(chǎn)地黃草烏生物堿各組分相關(guān)性分析結(jié)果碩士論文答辯不同產(chǎn)地黃草烏生物堿各組分相關(guān)性分析結(jié)果各個(gè)采樣點(diǎn)的指紋圖譜共有峰相關(guān)性分析結(jié)果顯示：各地區(qū)峰1（保留時(shí)間16.387-16.813min）和峰2（保留時(shí)間22.268-22.441min）顯著正相關(guān)。碩士論文答辯黃草烏化學(xué)成分與氣候、土壤生態(tài)因子的關(guān)系研究灰色關(guān)聯(lián)分析方法

系統(tǒng)關(guān)聯(lián)分析中，以往常用的定量方法是數(shù)理統(tǒng)計(jì)法，如回歸分析、方差分析、主成分分析、主定量分析等，盡管這些方法解決了許多實(shí)際問(wèn)題，但他們往往要求大樣本，且要求只有典型的概率分布，而這在實(shí)際中卻很難實(shí)現(xiàn)。灰色系統(tǒng)理論提出的灰色關(guān)聯(lián)分析方法則可不受這些局限，這種分析方法可在不完全的信息中，對(duì)所要分析研究的各因素，通過(guò)一定的數(shù)據(jù)處理，在隨機(jī)的因素序列間，找出它們的關(guān)聯(lián)性，發(fā)現(xiàn)主要矛盾，找到主要特性和主要影響因素。

所謂灰色關(guān)聯(lián)分析(GRA,GrayRelationshipanalysis)是基于行為因子序列的微觀或宏觀幾何接近，以分析和確定因子間的影響程度或因子對(duì)主行為的貢獻(xiàn)測(cè)度而進(jìn)行的一種分析方法。

碩士論文答辯第三部分灰色關(guān)聯(lián)分析的基本思想：一種相對(duì)性的排序分析目的：尋找一種能夠衡量各因子間的關(guān)聯(lián)度大小的量化方法，以便找出影響系統(tǒng)發(fā)展態(tài)勢(shì)的重要因素步驟：確定原始數(shù)據(jù)矩陣原始數(shù)據(jù)無(wú)量綱化處理帶入DPS軟件進(jìn)行相關(guān)分析灰色關(guān)聯(lián)分析方法碩士論文答辯黃草烏各生物堿相對(duì)峰面積與氣候土壤因子（原始數(shù)據(jù)）

灰色關(guān)聯(lián)分析碩士論文答辯原始數(shù)據(jù)無(wú)量綱化處理結(jié)果（初值化處理結(jié)果）

灰色關(guān)聯(lián)分析碩士論文答辯氣候、土壤因子對(duì)黃草烏生物堿累積影響的灰色關(guān)聯(lián)分析結(jié)果

灰色關(guān)聯(lián)分析碩士論文答辯結(jié)論氣候、土壤各因子對(duì)黃草烏總生物堿影響的關(guān)聯(lián)序列為降水>相對(duì)濕度>年均溫>日照>鉀>風(fēng)速>磷>鈣>砷>鉛。降水量低、年均溫高、相對(duì)濕度低的地區(qū)，黃草烏總生物堿含量較高。

在各產(chǎn)地黃草烏生物堿指紋圖譜共有峰中，不同的生物堿，對(duì)其影響的主導(dǎo)環(huán)境因子是不相同的。在各產(chǎn)地黃草烏指紋圖譜共有峰中，并不是所有的化學(xué)成分均與環(huán)境因子有很強(qiáng)的相關(guān)性。峰5（保留時(shí)間30.793-31.090min）、峰6（保留時(shí)間31.786-32.258min）與氣候、土壤各因子的相關(guān)性相對(duì)較小。碩士論文答辯黃草烏化學(xué)成分與氣候、土壤生態(tài)因子的關(guān)系研究討論土壤因素對(duì)植物次生代謝的影響

土壤是植物生長(zhǎng)的基礎(chǔ),由于土壤類(lèi)型、質(zhì)地、含水量、pH值、肥力狀況以及所含微量元素的不同，造成了植物次生代謝物含量的差異。藥用植物微量元素含量與其生長(zhǎng)的土壤中該元素水平密切相關(guān)但不完全成正相關(guān)的關(guān)系。因?yàn)橹参镂胀寥乐形⒘吭卮嬖谥鲃?dòng)吸收和被動(dòng)吸收的問(wèn)題。黃草烏微量元素與土壤無(wú)量元素?zé)o明顯的正相關(guān)性，以主動(dòng)吸收為主，對(duì)無(wú)機(jī)元素的富集受植物本身的遺傳因素的影響，同時(shí)又與外界的生長(zhǎng)條件有關(guān)，二者比例各是多少，通常很難確定。研究發(fā)現(xiàn)磷、鉀是土壤元素中影響黃草烏生物堿積累的主要元素。這些元素可能主要是通過(guò)促進(jìn)初生代謝來(lái)影響次生代謝物生物堿的合成。碩士論文答辯植物次生代謝物合成累積動(dòng)態(tài)

討論不同種類(lèi)植物中的化學(xué)成分的積累動(dòng)態(tài)不同，大量次生代謝產(chǎn)物的發(fā)生，常出現(xiàn)在植物生長(zhǎng)發(fā)育的一定階段。黃草烏生物堿累積高峰期與其生長(zhǎng)高峰期不一致，恰好相互錯(cuò)位，滯后于生長(zhǎng)高峰期。出現(xiàn)這一現(xiàn)象的主要原因可能為：次生代謝與蛋白質(zhì)、脂肪及核酸等初生代謝存在著原料的競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系，次生代謝只在初生代謝中間產(chǎn)物累積到一定程度并在調(diào)節(jié)次生代謝酶的催化作用下才出現(xiàn)高峰。因此，次生代謝的高峰期往往滯后于初生代謝的高峰期。碩士論文答辯討論環(huán)境因子對(duì)植物次生代謝產(chǎn)物生物堿合成的影響

植物體生物堿的代謝與環(huán)境的相關(guān)性很大，環(huán)境因子中光照、溫度、降水極大影響了生物堿的代謝過(guò)程.研究表明高溫高濕的環(huán)境有利于植物體內(nèi)高氮化合物的代謝，不利于生物堿的合成；高溫低濕的環(huán)境有利于生物堿的合成。黃草烏生物堿與環(huán)境關(guān)系的研究結(jié)果與上述結(jié)論相符，進(jìn)一步證實(shí)了高溫低濕的環(huán)境有利于生物堿的合成。有些研究發(fā)現(xiàn)，光照充足的條件利于生物堿的合成，紫外線可誘導(dǎo)生物堿的合成。本研究發(fā)現(xiàn)高強(qiáng)度短日照促進(jìn)黃草烏生物堿的累積，這可能