丙肝抗體檢測的困惑與對策課件

1丙肝抗體檢測的困惑與對策

2背景1我國HCV感染以1型為主80%其中以1b型多見64%慢性化率60%-80%肝硬化10%-15%肝細胞癌1%-7%無預防性疫苗3背景2最有效治療方案：聚乙二醇長效a-干擾素（PEG-IFN-a）聯合利巴韋林（Ribavirin)持續(xù)免疫學應答（SVR）基因1型患者低于50%HCV抗體陽性率隨年齡增加而上升男女間無明顯差異5Nature.Reviews.March2005Volume56實驗診斷-2004版丙型肝炎防治指南一、常規(guī)指標ALTAST白蛋白膽堿酯酶PT二、HCV抗體以EIA法對高危人群篩查免疫功能缺陷、自免病、易假陽性，HCVRNA有助于確診HCV感染第三代試劑敏感性、特意性高，可不用重組免疫印跡法（RIBA）驗證72023/2/6臨界值、灰區(qū)概念

載自ChinJabMed.July2006Vol29.No.7應結合臨床情況，慎重考慮灰區(qū)樣本的檢驗結果92023/2/6舉例：HCV抗體陽性標本做確認實驗S/CO比值陰性n(%)不確定n(%)陽性n(%)1.0-4.0(n=98)69(70%)20(20%)9(9%)4.1-8.0(n=31)14(45%)13(42%)4(13%)8.1-12.0(n=32)5(16%)13(41%)14(44%)12.1-20.0(n=63)0(0%)3(5%)60(95%)載自ClinicalChemistry49:6940–944(2003)102023/2/6HCV抗體陽性標本做HCV-RNA檢測S/CO比值陽性n(%)陰性n(%)1.0-8.0(n=30)2(11%)28(89%)8.1-20(n=25)0(0%)25(100%)20.1-30(n=29)17(58%)12(42%)30.1-40(n=172)159(92%)13(8%)>40(n=283)261(92%)22(8%)載自ClinicalChemistry49:6940–944(2003)11舉例13JCliniHepatol,January2011,Vol.27,No.114

需要HCV檢測的規(guī)范化流程15HCV檢測策略因目的而異：診斷疫情監(jiān)測血液篩查——《丙型肝炎病毒實驗室檢測技術規(guī)范》上報稿17復檢陽性反應樣品陽性反應免疫印跡試驗陰性反應報告陰性圖4HCV直接進行補充試驗檢測流程可疑核酸檢測陽性反應陰性反應報告可疑報告陽性以診斷為目的的檢測策略

——HCV直接進行補充試驗檢測流程18復檢陽性樣品可疑免疫印跡試驗陰性反應報告陰性圖5HCV“根據試劑S/CO比值”的確證檢測流程陽性反應報告陽性報告可疑根據S/CO值判斷高S/CO值低S/CO值以診斷為目的的檢測策略

——HCV考慮S/Co比值的確證檢測流程僅限于試劑給出了特定閾值時使用19根據補充試驗結果報告抗-HCV檢測結果的解釋

抗-HCV篩查結果補充試驗結果報告解釋篩查試驗陰性不需檢測抗-HCV陰性未感染HCV，除非懷疑最近被感染或存在其它證據提示感染HCV。篩查試驗陽性，且S/CO比值高未做抗-HCV陽性可能提示既往感染或現在感染了HCV；未做血清學補充試驗。高S/CO比值的樣品常被確證為陽性（≥95％），但尚有<5％的樣品可能為假陽性；可在患者要求下進行特異性更好的補充試驗。篩查試驗陽性免疫印跡陽性抗-HCV陽性提示既往感染或現在感染HCV。篩查試驗陽性免疫印跡陰性抗-HCV陰性未感染HCV，除非懷疑最近被感染或存在其它證據提示感染HCV。篩查試驗陽性免疫印跡可疑抗-HCV可疑不能確定抗-HCV結果及HCV感染狀態(tài)；應再采集另一份樣品（>1個月）重測抗-HCV或HCVRNA。篩查試驗陽性NAT陽性抗-HCV陽性HCVRNA陽性提示活動性HCV感染。篩查試驗陽性NAT陰性免疫印跡陽性抗-HCV陽性HCVRNA陰性存在抗-HCV，提示既往感染或現在感染HCV；由于某些HCV慢性感染病人的HCVRNA間隙陽性，因此一次HCVRNA陰性結果不能排除活動性感染。篩查試驗陽性NAT陰性RIBA陰性抗-HCV陰性HCVRNA陰性未感染HCV。篩查試驗陽性NAT陰性RIBA可疑抗-HCV可疑HCVRNA陰性抗-HCV篩查結果可能是假陽性，在這種情況下，提示未感染HCV。21另一種抗體篩查試劑或NAT以血液篩查為目的的檢測策略樣品陽性反應初篩試驗陰性反應復檢試驗陽性反應陰性反應報告陽性待確證抗體篩查試劑報告陰性圖6HCV血液篩查檢測流程22基本原則1對于篩查試驗陰性樣品，不需要做進一步檢測，可報告“抗HCV陰性”對于篩查試驗陽性樣品，可選擇S/CO比值進行補充試驗，或非S/CO比值的補充試驗23基本原則22a高比值，可報告“抗HCV陽性”，不需要做補充試驗；低比值，最好做RIBA.此方案適合特定的篩查試劑（已證實高比值>95%補充試驗陽性。2b所有篩查試驗陽性標本，均進行RIBA；或先作HCVRNA檢測，陰性標本再測RIBA25丙肝病毒及丙肝抗體試劑21995年第三代EIA-3出現核心抗原比例降低重新構建NS3和NS4，使抗原活性提高增加NS5抗原，診斷價值仍在探討縮短檢測窗口期（58天）26假陽性問題美國CDC報道在HCV低流行率人群，如無償獻血員（低于10%）采用第二代(Abbott)和第三代(Ortho)EIA試劑假陽性率可達30%不能僅憑EIA結果判斷HCV感染以RIBA或HCVRNA進行驗證29對策加強與臨床溝通，交流HCV檢測技術特點利用備注欄，做好解釋，如“復檢”，建議