標(biāo)準(zhǔn)解讀
《YC/T 150-2002 煙草種子 轉(zhuǎn)基因的測(cè)定》是一項(xiàng)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn),主要針對(duì)煙草種子中是否含有轉(zhuǎn)基因成分進(jìn)行檢測(cè)。該標(biāo)準(zhǔn)適用于所有類型的煙草種子,并提供了具體的檢測(cè)方法和步驟。
根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn),首先需要對(duì)樣品進(jìn)行前處理,包括但不限于種子的研磨以及DNA的提取等步驟。這一步驟是后續(xù)能夠準(zhǔn)確檢測(cè)到轉(zhuǎn)基因成分的基礎(chǔ)。接下來(lái),使用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)來(lái)擴(kuò)增目標(biāo)DNA片段,這是因?yàn)樵跓煵莘N子中存在的轉(zhuǎn)基因成分通常以特定的DNA序列為標(biāo)志。通過(guò)設(shè)計(jì)特異性引物并利用PCR技術(shù)放大這些序列,可以有效地識(shí)別出是否存在轉(zhuǎn)基因材料。
此外,該標(biāo)準(zhǔn)還規(guī)定了實(shí)驗(yàn)條件、試劑配制、操作流程等方面的具體要求,確保不同實(shí)驗(yàn)室之間結(jié)果的一致性和可靠性。對(duì)于陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照的選擇與使用也給出了明確指導(dǎo),以便于驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)的有效性及減少假陽(yáng)性和假陰性的發(fā)生率。
整個(gè)過(guò)程中強(qiáng)調(diào)了質(zhì)量控制的重要性,比如通過(guò)重復(fù)測(cè)試或采用不同的檢測(cè)方法來(lái)確認(rèn)初步結(jié)果的準(zhǔn)確性。同時(shí),記錄保存也是不可或缺的一部分,包括原始數(shù)據(jù)、計(jì)算過(guò)程、最終結(jié)論等都應(yīng)詳細(xì)記載,為后續(xù)審查提供依據(jù)。
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- 現(xiàn)行
- 正在執(zhí)行有效
- 2002-09-12 頒布
- 2002-12-01 實(shí)施
文檔簡(jiǎn)介
ICS65.160YCX85備案號(hào):10587—2002中華人民共和國(guó)煙草行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)YC/T150-2002煙草種子轉(zhuǎn)基因的測(cè)定Tobaccoseed-Determinationofgeneticallymodifiedorganism2002-09-12發(fā)布2002-12-01實(shí)施國(guó)家煙草專賣局發(fā)布
YC/T150-2002前本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)煙草標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)農(nóng)業(yè)分技術(shù)委員會(huì)提出。本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)煙草標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位:中國(guó)煙草東北農(nóng)業(yè)試驗(yàn)站本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人:焦慶明、郭兆奎、間新甫、萬(wàn)秀清、于艷華、魏繼承.
YC/T150-2002煙草種子轉(zhuǎn)基因的測(cè)定1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了煙草種子轉(zhuǎn)基因的測(cè)定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于煙草種子。2引用標(biāo)準(zhǔn)下列文件中的條款通過(guò)本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的州用文件,其隨后所有的修改單(不包括誤的內(nèi)容)或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)·然而,鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。YC/T149-2002煙草及煙草制品轉(zhuǎn)基因的測(cè)定3術(shù)語(yǔ)應(yīng)符合YC/T149—2002第2章的規(guī)定4實(shí)驗(yàn)室要求位符合YC/T149~2002第3章的要求。5試劑應(yīng)符合YC/T149—2002第4章的要求6儀器與耗材應(yīng)符合YC/T149-2002第5章的要求7樣品的取樣方法以以品種為單位,即每個(gè)品種作為一個(gè)樣品,對(duì)雖為同一品種,但種子產(chǎn)地或種子生產(chǎn)年份不同,也作為單一樣品取樣,每一樣品隨機(jī)多點(diǎn)取樣108,樣品編號(hào)注明品種名稱、種子產(chǎn)地和生產(chǎn)年份。8DNA提耶8.1前處理隨機(jī)取煙草種子0.5g放入裝有濾紙保濕的培養(yǎng)血中,28℃光照下培養(yǎng)5d.種子萌發(fā)出苗后,用濾紙吸出表面水分8.2DNA提取8.2.1種子萌發(fā)后提取8.2.1.1種子萌發(fā)幼苗稱量約300mg,在滅菌的研缽內(nèi)加液氮研磨呈粉末,裝人1.5mL離心管中。8.2.1.22取300mg液氮研磨后的粉末,加入200L.2×CTAB提取級(jí)沖液,充分混勾后.65℃水浴10min。8.2
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