標(biāo)準(zhǔn)解讀
《NY/T 572-2002 兔出血病血凝和血凝抑制試驗(yàn)方法》是一項(xiàng)針對(duì)兔出血病(RHD)的診斷標(biāo)準(zhǔn),主要通過血凝(HA)與血凝抑制(HI)兩種實(shí)驗(yàn)方式來進(jìn)行。該標(biāo)準(zhǔn)適用于實(shí)驗(yàn)室條件下對(duì)兔出血病病毒或其抗體的存在與否進(jìn)行檢測(cè),從而幫助獸醫(yī)及相關(guān)研究人員快速準(zhǔn)確地判斷動(dòng)物是否感染了這種疾病。
血凝試驗(yàn)基于病毒能夠使紅細(xì)胞聚集形成沉淀這一特性來實(shí)現(xiàn)。具體操作時(shí),將待測(cè)樣品與已知類型的紅細(xì)胞混合,在一定條件下觀察是否會(huì)發(fā)生凝集現(xiàn)象。如果出現(xiàn)明顯的凝集,則表明樣品中含有可引起紅細(xì)胞凝集的物質(zhì),進(jìn)一步分析可以確定是否為兔出血病病毒。
而血凝抑制試驗(yàn)則是在血凝基礎(chǔ)上增加了一步,即先將待測(cè)血清與病毒混合孵育一段時(shí)間后,再加入紅細(xì)胞懸液。如果血清中含有特異性抗體,那么這些抗體會(huì)與病毒結(jié)合,阻止后者與紅細(xì)胞相互作用產(chǎn)生凝集效應(yīng)。因此,當(dāng)加入紅細(xì)胞后未見明顯凝集發(fā)生時(shí),說明原樣本中存在足夠量的兔出血病病毒抗體,反之則表示抗體水平較低或不存在。
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- 已被新標(biāo)準(zhǔn)代替
- 2002-08-27 頒布
- 2002-12-01 實(shí)施
文檔簡(jiǎn)介
TCs.11.220NYB41中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T572-2002免出血病血凝和血凝抑制試驗(yàn)方法Haemagglutinationandhaemagglutinationinhibitiontestsforrabbithaemorrhagicdisease2002-08-27發(fā)布2002-12-01實(shí)施中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部發(fā)布
NY/T572-2002可免出血病(曾稱免病毒性出血癥)是兔的毀滅性疫病,世界動(dòng)物衛(wèi)生組織World(rganizationforAnimalHealth(英),fficeinternationaldesEpizooties(法),IE和我國(guó)分別將之列為B類和二類動(dòng)物疫病本標(biāo)準(zhǔn)采用了()E《診斷試驗(yàn)和疫苗標(biāo)準(zhǔn)手冊(cè)》(2000版)ManualofStandnrdsforDiagnosticTests“ndVaccincs)第2.8.3章規(guī)定的常規(guī)診斷方法(該方法最早系由我國(guó)建立).該章的規(guī)定相比,本杯準(zhǔn)特點(diǎn):根據(jù)本國(guó)實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)·將其具體化,成為操作程序。本標(biāo)準(zhǔn)由農(nóng)業(yè)部畜牧獸醫(yī)局提出。本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)動(dòng)物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸門本標(biāo)準(zhǔn)起點(diǎn)單位:江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所。本標(biāo)準(zhǔn)主嬰起草人:王啟明、童亞芳。
NY/T572-2002免出血病血凝和血凝抑制試驗(yàn)方法1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了免出血病血凝和血凝抑制試驗(yàn)的技術(shù)要求。本標(biāo)準(zhǔn)適用于免出血病的診斷和流行病學(xué)調(diào)查。血凝試驗(yàn)(HA)和血凝抑制試驗(yàn)(HI)2.1材料和試劑2.1.1可疑兔及正常免肝懸液的制備:分別將肝臟剪碎.按1:10加入生理鹽水后勾漿,再以4000r/min離心30min,取上清液做血凝試驗(yàn)。2.1.2生理鹽水。2.1.3阿氏液(Alscvcrs)成分:葡韻糖(化學(xué)純)2.05g氨化鈉0.428檸檬酸鈉(NaaC.H:(),·2H:))化學(xué)純)0.8g檸酸(H.C.Hl(),·H.O)化學(xué)純)0.0558100ml制法:將以上藥品混合加熱溶解、過濾.68.94kPa15min滅菌.4C保存?zhèn)溆谩?.1.41%人"O"型紅細(xì)胞懸液的制備:取新鮮人")"型紅細(xì)胞于阿氏液中保存(置4C可保存一周)用時(shí)取人"O"型紅細(xì)胞以20倍最生理鹽水混勾洗滌紅細(xì)胞,2000『/min離心15min,奔上清,重復(fù)洗徐“次,最后一次離心前.計(jì)算紅細(xì)胞懸液體積(在離心后扣減棄去上清液的體積,即為紅細(xì)胞的體積)洗滌后的紅細(xì)胞用生理鹽水配成1%懸液,置4(備用。2.1.5陽性血清。2.2微量血凝試驗(yàn)2.2.1在96孔V型微景滴定板上,從第2孔至第11孔,每孔加入生理鹽水0.025ml..2.2.2然后在第1、2孔加入1:10的可疑兔肝懸液0.025mL.2.2.3從第2孔開始,充分混合后用0.025ml.移液管作等量倍比稀釋至第10孔,最后1孔奔去0.025ml.。2.2.4第11孔是生理鹽水對(duì)照,第12孔加1:10的正常兔肝懸液對(duì)照。2.2.5每孔各加1%人"O"型紅細(xì)胞0.025mL.立即在徽型振蕩器上搖勾,暨4C冰箱45min待對(duì)照孔的紅細(xì)胞完全沉積后觀察結(jié)果。2.2.6結(jié)果判定和紅細(xì)胞凝集效價(jià)表示方法:a)“"++++"符號(hào)為100%凝集,無紅細(xì)胞沉積;“+++"符號(hào)為75%以上凝集,有少于
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