探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化

探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

（一）通過探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化，來研究一個(gè)種群的數(shù)量變化情況，嘗試構(gòu)建種群增長(zhǎng)的數(shù)學(xué)模型。

（二）通過使用血球計(jì)數(shù)板掌握單細(xì)胞生物的計(jì)數(shù)方法。二、實(shí)驗(yàn)原理

（一）酵母菌可以用液體培養(yǎng)基來培養(yǎng)，培養(yǎng)液中的酵母菌種群的增長(zhǎng)情況與培養(yǎng)液中的成分、空間、PH、溫度等因素有關(guān)，我們可以根據(jù)培養(yǎng)液中的酵母菌數(shù)量和時(shí)間為坐標(biāo)軸做曲線，從而掌握酵母菌種群數(shù)量的變化情況。二、實(shí)驗(yàn)原理

（二）利用血球計(jì)數(shù)板在顯微鏡下直接計(jì)數(shù)是一種常用的細(xì)胞計(jì)數(shù)法，這種方法可以直接測(cè)定樣品中全部的細(xì)胞數(shù)目，所以一般用于單細(xì)胞微生物數(shù)量的測(cè)定，由于血球計(jì)數(shù)板上的計(jì)數(shù)室蓋上蓋玻片后的容積是一定的，所以可根據(jù)在顯微鏡下觀察到的細(xì)胞數(shù)目來計(jì)算單位體積的細(xì)胞的總數(shù)目。三、探究問題

培養(yǎng)液中酵母菌種群的數(shù)量是怎樣隨時(shí)間變化的？四、作出假設(shè)

在有限的環(huán)境條件下，酵母菌種群的數(shù)量隨時(shí)間呈__

_型增長(zhǎng)變化。S五、材料用具

酵母菌菌種，無菌馬鈴薯培養(yǎng)液或肉湯培養(yǎng)液，無菌水，試管，棉塞，恒溫培養(yǎng)箱，顯微鏡，無菌滴管，無菌移液管，小燒杯或小試管，血球計(jì)數(shù)板(2mm×2mm)、紗布、濾紙、鑷子、蓋玻片等。一、血球計(jì)數(shù)板1、血球計(jì)數(shù)板的結(jié)構(gòu)

血球計(jì)數(shù)板是一種專門用于計(jì)算較大單細(xì)胞微生物數(shù)量的儀器，由一塊比普通載玻片厚的特制玻片制成的玻片中有四條下凹的槽，構(gòu)成三個(gè)平臺(tái)。中間的平臺(tái)較寬，其中間又被一短橫槽隔為兩半，每半邊上面刻有一個(gè)方格網(wǎng)。大方格中方格小方格

方格網(wǎng)上刻有9個(gè)大方格，其中只有中間的一個(gè)大方格為計(jì)數(shù)室，供微生物計(jì)數(shù)用。

大方格的長(zhǎng)和寬各為1mm，深度為0.1mm，即1mm×1mm×0.1mm，其容積為0.1mm3；大方格的長(zhǎng)和寬各為2mm，深度為0.1mm，即2mm×2mm×0.1mm，其容積為0.4mm3計(jì)數(shù)室通常也有兩種規(guī)格16×25型：即大方格內(nèi)分為16中格，每一中格又分為25小格25×16型：即大方格內(nèi)分為25中格，每一中格又分為16小格。

不管計(jì)數(shù)室是哪一種構(gòu)造，其每一大方格都是由16×25=25×16=400個(gè)小方格組成。

2、計(jì)數(shù)16×25型：

一般取四角的四個(gè)中方格（100個(gè)小方格）計(jì)數(shù)25×16型：一般計(jì)數(shù)四個(gè)角和中央的五個(gè)中方格（80個(gè)小方格）的細(xì)胞數(shù)。

3、計(jì)算

以1mm×1mm×0.1mm型為例計(jì)數(shù)室容積為0.1mm3，則每個(gè)小方格的容積為1/4000mm3

。100個(gè)小方格細(xì)胞總數(shù)/100×400×10000×稀釋倍數(shù)

酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)／1mL=80個(gè)小方格細(xì)胞總數(shù)/80×400×10000×稀釋倍數(shù)

例1通常用血球計(jì)數(shù)板對(duì)培養(yǎng)液中酵母菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，若計(jì)數(shù)室為1mm×1mm×0.1mm方格，由400個(gè)小方格組成。若多次重復(fù)計(jì)數(shù)后，算得每個(gè)小方格中平均有5個(gè)酵母菌，則10mL該培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)有

個(gè)。2×108例2檢測(cè)員將1mL水樣稀釋10倍后，用抽樣檢測(cè)的方法檢測(cè)每毫升藍(lán)藻的數(shù)量；將蓋玻片放在計(jì)數(shù)室上，用吸管吸取少許培養(yǎng)液使其自行滲入計(jì)數(shù)室，并用濾紙吸去多余液體。已知每個(gè)計(jì)數(shù)室由25×16＝400個(gè)小格組成，容納液體的總體積為0．1mm3。

現(xiàn)觀察到圖中該計(jì)數(shù)室所示a、b、c、d、e5個(gè)中格80個(gè)小格內(nèi)共有藍(lán)藻n個(gè)，則上述水樣中約有藍(lán)藻

個(gè)／mL。5n×1051.怎樣進(jìn)行酵母菌的計(jì)數(shù)。抽樣檢測(cè)培養(yǎng)液厚度為0.1mm，可算出10ml培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)的公式：2.5×104x(x為小方格內(nèi)酵母菌數(shù))2.從試管中吸出培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)之前，要將試管輕輕振蕩幾下，為什么？使酵母菌細(xì)胞分布均勻，減少實(shí)驗(yàn)誤差。3.本實(shí)驗(yàn)需要設(shè)置對(duì)照？如果需要,請(qǐng)討論對(duì)照組應(yīng)怎樣設(shè)計(jì)和操作，如果不需要，請(qǐng)說明理由。不需要，本實(shí)驗(yàn)旨在探究培養(yǎng)液中酵母菌在一定條件下的種群數(shù)量變化，不同的時(shí)間量已經(jīng)起到相互對(duì)照。4.需要做重復(fù)實(shí)驗(yàn)嗎？不用重復(fù)，只要分組重復(fù)實(shí)驗(yàn)獲得平均值即可。

5.如果一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌過多，難以數(shù)清，應(yīng)當(dāng)采取怎樣的措施？

搖勻試管取1mL酵